Un estudio de proteómica y hemodinámica de exosomas en sepsis

Antecedentes: La sepsis, definida como una infección con evidencia de infección sistémica, continúa siendo una fuente de morbilidad y mortalidad considerable. Muchos modelos animales de sepsis habían encontrado que la sepsis inducía falla orgánica múltiple. La autofagia, la apoptosis puede implicar el proceso de insuficiencia orgánica múltiple relacionada con la sepsis. Los estudios de proteómica basados ​​en espectrometría de masas en poblaciones clínicas y en modelos animales de roedores y mamíferos habían comenzado con el descubrimiento de muchos biomarcadores novedosos de sepsis. Los esoxomas que se habían encontrado en sangre u orina presentaban la señal de autofagia y apoptosis. Por otro lado, el gasto cardíaco por contorno de pulso (PiCCO) puede calcular parámetros hemodinámicos que se han utilizado para la evaluación en la insuficiencia cardiopulmonar de la sepsis.

Objetivos del estudio: Esta investigación será el primer estudio de exosomas purificados en sangre y orina de pacientes sépticos que tenían fallas orgánicas múltiples. Estudios de proteómica en exosomas de muestras de sangre u orina. Analice autofagos y biomarcadores relacionados con la apoptosis de los exosomas mediante bioinformática. Encontrar las correlaciones entre biomarcadores de exosomas y parámetros hemodinámicos.

Materiales y Métodos: Se incluirán un total de 30 pacientes con sepsis, shock séptico o falla orgánica múltiple, de los cuales 15 pacientes sépticos presentaron falla orgánica cardiopulmonar, otros no. Todos los pacientes incluidos y clasificados de acuerdo con los criterios de la campaña de sepsis sobreviviente, también se tratan de acuerdo con las pautas de la campaña de sepsis sobreviviente. Los datos se recopilarán desde enero de 2016 hasta diciembre de 2016. El exosoma se aislará y purificará mediante ultracentrifugación en gradiente de sacarosa. La purificación de perlas magnéticas, la electroforesis en gel 2D y MALDI-TOF se utilizarán para analizar la proteómica del exosoma en la orina o la sangre de pacientes sépticos. Se realizará una transferencia Western para probar las proteínas encontradas por proteómica. El gasto cardíaco de contorno de pulso controló la contractilidad cardíaca, los parámetros de volumen diastólico final y los parámetros de agua pulmonar. Finalmente, para encontrar las correlaciones entre el órgano específico del exosoma y los biomarcadores de autofagia-apoptosis y los parámetros hemodinámicos.

Posible efecto: se realizará el establecimiento sistemático de la proteómica de exosomas en sangre y orina de pacientes sépticos que hayan tenido o no insuficiencia multiorgánica. Los biomarcadores de autofagia-apoptosis en los exosomas se detectarán y correlacionarán con los parámetros hemodinámicos, para juzgar la falla orgánica específica en la sepsis.