Az exoszóma proteomikájának és hemodinamikájának tanulmányozása szepszisben
Szepszisben a kardiopulmonális szervekből és hemodinamikai paraméterekből származó exoszóma proteomika megfigyelési vizsgálata
A tanulmány áttekintése
Állapot
Körülmények
Beavatkozás / kezelés
Részletes leírás
Háttér: A szepszis, amelyet szisztémás fertőzésre utaló fertőzésként határoznak meg, továbbra is jelentős morbiditás és mortalitás forrása. Számos állati szepszis modell azt találta, hogy a szepszis több szervi elégtelenséget vált ki. Az autofágia, az apoptózis magában foglalhatja a szepszishez kapcsolódó többszörös szervi elégtelenség folyamatát. A tömegspektrometrián alapuló proteomikai vizsgálatok klinikai populációkon, valamint rágcsáló- és emlősállatmodelleken a szepszis számos új biomarkerének felfedezésével kezdődtek. A vérben vagy a vizeletben ezoxomákat találtak, amelyek az autofágia és az apoptózis jelét mutatták. Másrészt a pulzuskontúr szívteljesítmény (PiCCO) képes kiszámítani azokat a hemodinamikai paramétereket, amelyeket a szepszis kardiopulmonális elégtelensége esetén használtak.
A tanulmány célja: Ez a kutatás lesz az első olyan vizsgálat, amely több szervi elégtelenségben szenvedő szeptikus betegek vérében és vizeletében tisztított exoszómákat vizsgálja. Proteomikai vizsgálatok vér- vagy vizeletminták exoszómáiban. Az exoszómák autofágokkal és apoptózissal kapcsolatos biomarkereinek elemzése bioinformatika segítségével. Az exoszóma biomarkerek és a hemodinamikai paraméterek közötti összefüggések feltárása.
Anyagok és módszerek: Összesen 30 szepszisben, szeptikus sokkban vagy többszörös szervi elégtelenségben szenvedő beteg kerül bevonásra, akik közül 15 szeptikus betegnek volt kardiopulmonális szervi elégtelensége, másoknak nem. Az összes beteg a túlélő szepszis kampány kritériumai szerint besorolt és besorolt, valamint a túlélő szepszis kampány irányelvei szerint is kezelhető. Az adatokat 2016 januárjától 2016 decemberéig gyűjtjük. Az exoszómát szacharóz gradiens ultracentrifugálással izoláljuk és tisztítjuk. Mágneses gyöngyök tisztítását, 2D gélelektroforézist és MALDI-TOF-ot használnak a szeptikus betegek vizeletében vagy vérében lévő exoszóma proteomikájának elemzésére. Western blotot fognak végezni a proteomika által talált fehérjék bizonyítására. A pulzuskontúros perctérfogat a szív kontraktilitását, a végdiasztolés térfogat paramétereit és a tüdővíz paramétereit figyelte. Végül az exoszóma-specifikus szerv és az autofágia-apoptózis biomarkerek és a hemodinamikai paraméterek közötti összefüggések feltárása.
Lehetséges hatás: Az exoszóma proteomika szisztematikus megállapítása a szeptikus betegek vérében és vizeletében, akiknek több szervi elégtelenségük volt vagy nem. Az autofágia-apoptózis biomarkereket az exoszómákban kimutatjuk, és korreláljuk a hemodinamikai paraméterekkel, hogy megítéljük a szepszis specifikus szervi elégtelenségét.
Tanulmány típusa
Beiratkozás (Tényleges)
Kapcsolatok és helyek
Tanulmányi helyek
-
-
-
Taipei, Tajvan, 23142
- Division of Pulmonary and Critical Care Medicine, Department of Internal Medicine, Taipei Tzu Chi Hospital, Buddhist Tzu Chi Medical Foundation
-
-
Részvételi kritériumok
Jogosultsági kritériumok
Tanulmányozható életkorok
Egészséges önkénteseket fogad
Tanulmányozható nemek
Mintavételi módszer
Tanulmányi populáció
A szepszist életveszélyes szervi diszfunkcióként határozták meg, amely a gazdaszervezet fertőzésre adott nem szabályozott reakciója miatt következett be.
Szepszisben szenvedő beteg, aki intenzív osztályra került. A PiCCO hemodinamikát beállítottuk
Leírás
Bevételi kritériumok:
- Az intenzív osztályra felvett szepszises betegek
- A szepszis diagnosztikai kritériumai: a fertőzésnek tulajdonítható akut változás a teljes SOFA pontszámban ≥ 2 pont
- A pulzusjelző folyamatos szívteljesítmény monitort (PiCCO) a páciens elfogadja hemodinamikai monitorozásra
Kizárási kritériumok:
- Azok a betegek, akiknél akut SOFA-változások < 2 pont, kizárásra kerülnek
- auria, vizelet nem gyűjthető
- Korábbi kardiopulmonális társbetegség. Krónikus légzési elégtelenség lélegeztetőgép-függőséggel és krónikus szívelégtelenséggel.
Tanulási terv
Hogyan készül a tanulmány?
Tervezési részletek
Kohorszok és beavatkozások
Csoport / Kohorsz |
Beavatkozás / kezelés |
|---|---|
|
Szepszis kardiopulmonális elégtelenséggel
Hemodinamikai paraméterekkel igazolt szepszises, légzőszervi és szívérintett beteg
|
A pulzuskontúros perctérfogat a szív kontraktilitását, a végdiasztolés térfogat paramétereit és a tüdővíz paramétereit figyelte.
|
|
Szepszis kardiopulmonális elégtelenség nélkül
Szepszisben szenvedő beteg légúti és szívbetegség nélkül
|
A pulzuskontúros perctérfogat a szív kontraktilitását, a végdiasztolés térfogat paramétereit és a tüdővíz paramétereit figyelte.
|
Mit mér a tanulmány?
Elsődleges eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
A hemodinamikai paraméterek változása (szívösszehúzódás: CFI)
Időkeret: Alapállapot, 6 óra
|
Változás a kiindulási szívfunkciós indexhez (CFI; L/perc) képest 6 óránál.
A szívfunkciós indexet (CFI; L/min) termodilúciós módszerrel számítják ki.
PiCCO2 készülék (Pulsion Medical Systems, München, Németország)
|
Alapállapot, 6 óra
|
|
A hemodinamikai paraméterek változása (előtöltés: GEDI)
Időkeret: Alapállapot, 6 óra
|
Változás a kiindulási értékhez képest, a globális végdiasztolés index (GEDI; ml/m2) 6 óra elteltével.
A globális végdiasztolés indexet (GEDI; mL/m2) termodilúciós módszerrel számítjuk ki.
PiCCO2 készülék (Pulsion Medical Systems, München, Németország).
|
Alapállapot, 6 óra
|
|
A hemodinamikai paraméterek változása (utóterhelés: SVRI)
Időkeret: Alapállapot, 6 óra
|
Változás a kiindulási szisztémás vaszkuláris rezisztencia indexhez (SVRI; dynes x sec x cm-5/m2) képest 6 óra elteltével.
A szisztémás vaszkuláris rezisztencia indexet (SVRI; dynes x sec x cm-5/m2) termodilúciós módszerrel számítjuk ki.
PiCCO2 készülék (Pulsion Medical Systems, München, Németország).
|
Alapállapot, 6 óra
|
|
A hemodinamikai paraméterek változása (folyadék érzékenység: SVV)
Időkeret: Alaphelyzet, 6 óra, egy nap és 3 nap
|
Változás az alapvonali lökettérfogat változáshoz (SVV, %) képest 6 óránál.
A lökettérfogat változását (SVV, %) a PiCCO2 készülék (Pulsion Medical Systems, München, Németország) spontán módon számítja ki.
|
Alaphelyzet, 6 óra, egy nap és 3 nap
|
|
A hemodinamikai paraméterek változása (tüdővíz: ELWI)
Időkeret: Alapállapot, 6 óra
|
Változás a kiindulási Extravascularis tüdővíz indexhez (EVLWI; ml/kg) képest 6 óra után.
Az extravascularis tüdővíz indexet (EVLWI; mL/kg) a PiCCO készülék (Pulsion Medical Systems, München, Németország) számítja ki.
Az EVLWI a tüdőszövet összes víztartalmát jelenti, a tüdőödéma vagy az ARDS növekedését jelenti.
A PVPI a pulmonalis vaszkuláris permeabilitást jelenti, és mindig magas az ARDS-ben (akut légzési distressz szindróma)
|
Alapállapot, 6 óra
|
|
A hemodinamikai paraméterek változása (tüdőpermeabilitás: PVPI)
Időkeret: Alapállapot, 6 óra
|
Változás a kiindulási pulmonalis vaszkuláris permeabilitási indexhez (PVPI; arány) képest 6 óránál.
A pulmonalis vaszkuláris permeabilitási indexet (PVPI) a PiCCO készülék (Pulsion Medical Systems, München, Németország) számítja ki.
Az EVLWI a tüdőszövet összes víztartalmát jelenti, a tüdőödéma vagy az ARDS növekedését jelenti.
A PVPI a pulmonalis vaszkuláris permeabilitást jelenti, és mindig magas az ARDS-ben (akut légzési distressz szindróma)
|
Alapállapot, 6 óra
|
Másodlagos eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Autofágia biomarkerek exoszómákban: LC3II (Western blot)
Időkeret: 6 óra
|
Az LC3II a fagoszóma-lizomon fúzió során jelenik meg.
Az exoszómát a szepszis szérumából gyűjtik össze.
Az LC3II-t Western-blot segítségével detektáljuk és azonosítjuk.
|
6 óra
|
|
Autofágia biomarkerek exoszómákban: LC3II (NTA)
Időkeret: 6 óra
|
Az LC3II a fagoszóma-lizomon fúzió során jelenik meg.
Az exoszómát a szepszis szérumából gyűjtik össze.
Később az LC3II-t megjelölik és kombinálják a nanorészecskék nyomkövetési analízisével.
Koncentráció (részecskék/ml) méret szerint (nm) vagy intenzitás (a.u.) méret szerint (nm)
|
6 óra
|
|
Autofágia módosítók exoszómákban: mTOR (Western blot)
Időkeret: 6 óra
|
A rapamicin (mTOR) emlős célpontja módosíthatja az autofágia folyamatát.
Az exoszómát a szepszis szérumából gyűjtik össze.
Az mTOR-t Western-blot-vizsgálattal lehet kimutatni és azonosítani.
|
6 óra
|
|
Autofágia módosítók exoszómákban: mTOR (NTA)
Időkeret: 6 óra
|
A rapamicin (mTOR) emlős célpontja módosíthatja az autofágia folyamatát.
Az exoszómát a szepszis szérumából gyűjtik össze.
Az mTOR-t nanorészecskék nyomkövetési analízissel jelölik és kombinálják.
Koncentráció (részecskék/ml) méret szerint (nm) vagy intenzitás (a.u.) méret szerint (nm)
|
6 óra
|
|
Autofágia módosítók exoszómákban: HSP70 (Western blot)
Időkeret: 6 óra
|
A hősokk fehérje 70 (HSP70) módosíthatja az autofágia folyamatát.
Az exoszómát a szepszis szérumából gyűjtik össze.
A HSP70-et Western-blot segítségével lehet detektálni és azonosítani.
|
6 óra
|
|
Autofágia módosítók exoszómákban: HSP70 (NTA)
Időkeret: 6 óra
|
A hősokk fehérje 70 (HSP70) módosíthatja az autofágia folyamatát.
Az exoszómát a szepszis szérumából gyűjtik össze.
Később a HSP70-et megjelölik és kombinálják a nanorészecskék nyomkövetési analízisével.
Koncentráció (részecskék/ml) méret szerint (nm) vagy intenzitás (a.u.) méret szerint (nm)
|
6 óra
|
|
Autofágia módosítók exoszómákban: 1. szekvestszóma (Western blot)
Időkeret: 6 óra
|
Az 1. szekvestszóma (SQSMT1/p62) módosíthatja az autofágia folyamatát.
Az exoszómát a szepszis szérumából gyűjtik össze.
Az 1. szekvestszómát Western blot segítségével detektáljuk és azonosítjuk.
|
6 óra
|
|
Autofágia módosítók exoszómákban: 1. szekvestszóma (NTA)
Időkeret: 6 óra
|
Az 1. szekvestszóma (SQSMT1/p62) módosíthatja az autofágia folyamatát.
Az exoszómát a szepszis szérumából gyűjtik össze.
Később az 1. szekvesztoszómát megjelölik és kombinálják a nanorészecskék nyomkövetési analízisével.
Koncentráció (részecskék/ml) méret szerint (nm) vagy intenzitás (a.u.) méret szerint (nm)
|
6 óra
|
|
Exoszóma marker: CD9 (Western blot)
Időkeret: 6 óra
|
A CD9 az exoszóma felszíni markere.
Az exoszómát a szepszis szérumából gyűjtik össze.
A CD9 detektálása és azonosítása Western-blot segítségével történik.
|
6 óra
|
|
Exoszóma marker: CD9 (NTA)
Időkeret: 6 óra
|
A CD9 az exoszóma felszíni markere.
Az exoszómát a szepszis szérumából gyűjtik össze.
Később a CD9-et megjelölik és kombinálják a nanorészecskék nyomkövetési analízisével.
Koncentráció (részecskék/ml) méret szerint (nm) vagy intenzitás (a.u.) méret szerint (nm)
|
6 óra
|
|
Az intenzív osztályos halálozás
Időkeret: Akár 30 napig
|
Intenzív osztályos halálozás (%), halálozás az intenzív osztályon történő felvétel során/teljes intenzív osztályos felvétel
|
Akár 30 napig
|
|
28 napos halálozás
Időkeret: Akár 28 napig
|
28 napos mortalitás (%), halálozás 28 nap alatt/összes 28 napos felvétel
|
Akár 28 napig
|
|
Kórházi halálozás
Időkeret: Akár 90 napig
|
Kórházi halálozás (%), halálozás a kórházi kezelés során/összes kórházi felvétel
|
Akár 90 napig
|
|
Az intenzív osztályon való tartózkodás időtartama
Időkeret: Akár 30 napig
|
Az intenzív osztályon való tartózkodás időtartama (nap)
|
Akár 30 napig
|
|
A kórházi tartózkodás időtartama
Időkeret: Legfeljebb 90 nap
|
A kórházi tartózkodás időtartama (nap)
|
Legfeljebb 90 nap
|
Együttműködők és nyomozók
Nyomozók
- Tanulmányi igazgató: Wen-Lin Su, PhD, Division of Pulmonary and Critical Care Medicine, Department of Internal Medicine, Taipei Tzu Chi Hospital
Publikációk és hasznos linkek
Általános kiadványok
- Lo S, Yuan SS, Hsu C, Cheng YJ, Chang YF, Hsueh HW, Lee PH, Hsieh YC. Lc3 over-expression improves survival and attenuates lung injury through increasing autophagosomal clearance in septic mice. Ann Surg. 2013 Feb;257(2):352-63. doi: 10.1097/SLA.0b013e318269d0e2.
- Gao M, Ha T, Zhang X, Wang X, Liu L, Kalbfleisch J, Singh K, Williams D, Li C. The Toll-like receptor 9 ligand, CpG oligodeoxynucleotide, attenuates cardiac dysfunction in polymicrobial sepsis, involving activation of both phosphoinositide 3 kinase/Akt and extracellular-signal-related kinase signaling. J Infect Dis. 2013 May 1;207(9):1471-9. doi: 10.1093/infdis/jit036. Epub 2013 Jan 28.
Tanulmányi rekorddátumok
Tanulmány főbb dátumok
Tanulmány kezdete (TÉNYLEGES)
Elsődleges befejezés (TÉNYLEGES)
A tanulmány befejezése (TÉNYLEGES)
Tanulmányi regisztráció dátumai
Először benyújtva
Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Első közzététel (TÉNYLEGES)
Tanulmányi rekordok frissítései
Utolsó frissítés közzétéve (TÉNYLEGES)
Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Utolsó ellenőrzés
Több információ
A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések
További vonatkozó MeSH feltételek
Egyéb vizsgálati azonosító számok
- 05-XD15-039
Gyógyszer- és eszközinformációk, tanulmányi dokumentumok
Egy amerikai FDA által szabályozott gyógyszerkészítményt tanulmányoz
Egy amerikai FDA által szabályozott eszközterméket tanulmányoz
Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .