Uno studio sulla proteomica e sull'emodinamica dell'esosoma nella sepsi

Contesto: la sepsi, definita come un'infezione con evidenza di infezione sistemica, continua ad essere fonte di notevole morbilità e mortalità. Molti modelli di sepsi animale avevano scoperto che la sepsi induceva insufficienza multiorgano. L'autofagia, l'apoptosi può comportare il processo di insufficienza multiorgano correlata alla sepsi. Gli studi di proteomica basati sulla spettrometria di massa nelle popolazioni cliniche e nei modelli animali di roditori e mammiferi erano iniziati con la scoperta di molti nuovi biomarcatori di sepsi. Gli esosomi trovati nel sangue o nelle urine presentavano il segnale dell'autofagia e dell'apoptosi. D'altra parte, la gittata cardiaca a contorno del polso (PiCCO) può calcolare i parametri emodinamici che erano stati utilizzati per la valutazione nell'insufficienza cardiopolmonare della sepsi.

Obiettivi dello studio: Questa ricerca sarà il primo studio sugli esosomi purificati nel sangue e nelle urine di pazienti settici che presentavano insufficienza multiorgano. Studi di proteomica negli esosomi da campioni di sangue o urina. Analizzare l'autofago e i biomarcatori correlati all'apoptosi degli esosomi mediante bioinformatica. Per trovare le correlazioni tra biomarcatori di esosomi e parametri emodinamici.

Materiali e metodi: saranno inclusi un totale di 30 pazienti con sepsi, shock settico o insufficienza multiorgano, di cui 15 pazienti settici presentavano insufficienza d'organo cardiopolmonare, altri no. Tutti i pazienti inclusi e classificati secondo i criteri della campagna per la sepsi sopravvissuta, vengono trattati anche secondo le linee guida della campagna per la sepsi sopravvissuta. I dati saranno raccolti da gennaio 2016 a dicembre 2016. L'esosoma sarà isolato e purificato mediante ultracentrifugazione in gradiente di saccarosio. La purificazione di biglie magnetiche, l'elettroforesi su gel 2D e il MALDI-TOF saranno utilizzati per analizzare la proteomica dell'esosoma nelle urine o nel sangue di pazienti settici. Verrà effettuato il western blotting per provare le proteine ​​trovate dalla proteomica. La portata cardiaca del contorno del polso ha monitorato la contrattilità cardiaca, i parametri del volume telediastolico e i parametri dell'acqua polmonare. Infine, per trovare le correlazioni tra organo specifico dell'esosoma e biomarcatori di autofagia-apoptosi e parametri emodinamici.

Possibile effetto: verrà eseguita la creazione sistematica di proteomica esosomica nel sangue e nelle urine di pazienti settici che hanno avuto o meno insufficienza multiorgano. I biomarcatori dell'autofagia-apoptosi negli esosomi saranno rilevati e correlati ai parametri emodinamici, per giudicare l'insufficienza d'organo specifica nella sepsi.