Tutkimus eksosomien proteomiikasta ja hemodynamiikasta sepsisessä
Havaintotutkimus kardiopulmonaalisista elimistä ja hemodynaamisista parametreista vapautuneesta eksosomiproteomiikasta sepsisessä
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Interventio / Hoito
Yksityiskohtainen kuvaus
Tausta: Sepsis, joka määritellään infektioksi, jossa on merkkejä systeemisestä infektiosta, on edelleen huomattavan sairastuvuuden ja kuolleisuuden lähde. Monet eläinsepsismallit olivat havainneet, että sepsis aiheutti useiden elinten vajaatoiminnan. Autofagia, apoptoosi voi sisältää sepsikseen liittyvän useiden elinten vajaatoiminnan. Massaspektrometriaan perustuvat proteomiikkatutkimukset kliinisissä populaatioissa sekä jyrsijä- ja nisäkäseläinmalleissa olivat alkaneet löytää monia uusia sepsiksen biomarkkereita. Verestä tai virtsasta oli löydetty esoksomeja, jotka esittivät signaalin autofagiasta ja apoptoosista. Toisaalta pulssin muotoinen sydämen minuuttitilavuus (PiCCO) voi laskea hemodynaamisia parametreja, joita on käytetty sepsiksen kardiopulmonaalisen vajaatoiminnan arvioimiseen.
Tutkimuksen tavoitteet: Tämä tutkimus on ensimmäinen tutkimus eksosomeille, jotka on puhdistettu verestä ja virtsasta septisista potilaista, joilla oli useita elinvaurioita. Proteomiikkatutkimukset veri- tai virtsanäytteiden eksosomeissa. Analysoi eksosomien autofaagi- ja apoptoosiin liittyviä biomarkkereita bioinformatiikan avulla. Löytää korrelaatiot eksosomien biomarkkerien ja hemodynaamisten parametrien välillä.
Materiaalit ja menetelmät: Mukaan otetaan yhteensä 30 potilasta, joilla on sepsis, septinen sokki tai monielinten vajaatoiminta, joista 15 septisellä potilaalla oli sydän- ja keuhkoelinten vajaatoiminta, muilla ei. Kaikki potilaat, jotka on otettu mukaan ja luokiteltu eloonjääneiden sepsiskampanjan kriteerien mukaan, myös hoitavat eloonjääneiden sepsiskampanjan ohjeiden mukaan. Tietoja kerätään tammikuusta 2016 joulukuuhun 2016. Eksosomi eristetään ja puhdistetaan sakkaroosigradienttiultrasentrifugoinnilla. Magneettihelmien puhdistusta, 2D-geelielektroforeesia ja MALDI-TOF:ia käytetään septisten potilaiden virtsassa tai veressä olevien eksosomien proteomiikan analysointiin. Western blottaus tehdään proteomiikan löytämien proteiinien osoittamiseksi. Pulssin muotoinen sydämen minuuttitilavuus tarkkaili sydämen supistumiskykyä, loppudiastolisen tilavuuden parametreja ja keuhkojen vesiparametreja. Lopuksi löytää korrelaatiot eksosomikohtaisen elimen ja autofagia-apoptoosin biomarkkerien ja hemodynaamisten parametrien välillä.
Mahdollinen vaikutus: Eksosomiproteomiikan järjestelmällinen määrittäminen vereen ja virtsaan septisistä potilaista, joilla on ollut useita elinten vajaatoimintaa tai ei. Autofagia-apoptoosin biomarkkerit eksosomeissa havaitaan ja korreloidaan hemodynaamisten parametrien kanssa spesifisen elimen vajaatoiminnan arvioimiseksi sepsiksessä.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
-
Taipei, Taiwan, 23142
- Division of Pulmonary and Critical Care Medicine, Department of Internal Medicine, Taipei Tzu Chi Hospital, Buddhist Tzu Chi Medical Foundation
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Sepsis määriteltiin henkeä uhkaavaksi elimen toimintahäiriöksi, joka johtuu isännän epäsäännöllisestä vasteesta infektioon.
Potilas, jolla on sepsis, joka vietiin teho-osastolle. PiCCO hemodynamiikka asetettiin
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Sepsispotilaat, jotka tulevat teho-osastolle
- Sepsiksen diagnostiset kriteerit: akuutti muutos SOFA:n kokonaispistemäärässä ≥ 2 pistettä, mikä johtuu infektiosta
- Potilas hyväksyy sykemittarin jatkuvan sydämen minuuttimonitorin (PiCCO) hemodynaamiseen seurantaan
Poissulkemiskriteerit:
- Potilaat, joilla on akuutit SOFA-muutokset < 2 pistettä, suljetaan pois
- auria, virtsaa ei voida kerätä
- Aikaisempi kardiopulmonaalinen samanaikainen sairaus. Krooninen hengitysvajaus, johon liittyy hengityslaiteriippuvuus ja krooninen sydämen vajaatoiminta.
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
Kohortit ja interventiot
Ryhmä/Kohortti |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Sepsis, johon liittyy kardiopulmonaalinen vajaatoiminta
Potilas, jolla on sepsis ja myös hengityselinten ja sydämen toimintahäiriö, vahvistettu hemodynaamisilla parametreilla
|
Pulssin muotoinen sydämen minuuttitilavuus tarkkaili sydämen supistumiskykyä, loppudiastolisen tilavuuden parametreja ja keuhkojen vesiparametreja.
|
|
Sepsis ilman kardiopulmonaalista vajaatoimintaa
Potilas, jolla on sepsis ilman hengitys- ja sydänkohtauksia
|
Pulssin muotoinen sydämen minuuttitilavuus tarkkaili sydämen supistumiskykyä, loppudiastolisen tilavuuden parametreja ja keuhkojen vesiparametreja.
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Hemodynaamisten parametrien muutos (sydämen supistumiskyky: CFI)
Aikaikkuna: Perustaso, 6 tuntia
|
Muutos lähtötilanteesta sydämen toimintaindeksi (CFI; L/min) 6 tunnin kohdalla.
Sydämen toimintaindeksi (CFI; L/min) lasketaan lämpölaimennusmenetelmällä.
PiCCO2-laite (Pulsion Medical Systems, München, Saksa)
|
Perustaso, 6 tuntia
|
|
Hemodynaamisten parametrien muutos (esilataus: GEDI)
Aikaikkuna: Perustaso, 6 tuntia
|
Muutos perustasosta Global end-diastolic index (GEDI; ml/m2) 6 tunnin kohdalla.
Globaali loppudiastolinen indeksi (GEDI; ml/m2) lasketaan lämpölaimennusmenetelmällä.
PiCCO2-laite (Pulsion Medical Systems, München, Saksa).
|
Perustaso, 6 tuntia
|
|
Hemodynaamisten parametrien muutos (jälkikuormitus: SVRI)
Aikaikkuna: Perustaso, 6 tuntia
|
Muutos lähtötilanteesta Systeeminen vaskulaarinen vastusindeksi (SVRI; dynes x s x cm-5/m2) 6 tunnin kohdalla.
Systeeminen verisuoniresistenssiindeksi (SVRI; dynes x sek x cm-5/m2) lasketaan lämpölaimennusmenetelmällä.
PiCCO2-laite (Pulsion Medical Systems, München, Saksa).
|
Perustaso, 6 tuntia
|
|
Hemodynaamisten parametrien muutos (nesteherkkyys: SVV)
Aikaikkuna: Perustaso, 6 tuntia, yksi päivä ja 3 päivää
|
Muutos lähtötilanteen iskutilavuuden vaihtelusta (SVV, %) 6 tunnin kohdalla.
Iskutilavuuden vaihtelu (SVV, %) lasketaan spontaanisti PiCCO2-laitteella (Pulsion Medical Systems, München, Saksa).
|
Perustaso, 6 tuntia, yksi päivä ja 3 päivää
|
|
Hemodynaamisten parametrien muutos (keuhkovesi: ELWI)
Aikaikkuna: Perustaso, 6 tuntia
|
Muutos lähtötilanteen ekstravaskulaarisesta keuhkovesiindeksistä (EVLWI; ml/kg) 6 tunnin kohdalla.
Ekstravaskulaarinen keuhkovesiindeksi (EVLWI; ml/kg) lasketaan PiCCO-laitteella (Pulsion Medical Systems, München, Saksa).
EVLWI tarkoittaa kokonaisvettä keuhkokudoksessa, se lisää keuhkopöhöä tai ARDS:ää.
PVPI tarkoittaa keuhkojen verisuonten läpäisevyyttä ja aina korkeaa ARDS:ää (akuutti hengitysvaikeusoireyhtymä)
|
Perustaso, 6 tuntia
|
|
Hemodynaamisten parametrien muutos (keuhkojen läpäisevyys: PVPI)
Aikaikkuna: Perustaso, 6 tuntia
|
Muutos keuhkojen verisuonten läpäisevyysindeksistä (PVPI; suhde) 6 tunnin kohdalla.
pulmonary vascular permeability index (PVPI) lasketaan PiCCO-laitteella (Pulsion Medical Systems, München, Saksa).
EVLWI tarkoittaa kokonaisvettä keuhkokudoksessa, se lisää keuhkopöhöä tai ARDS:ää.
PVPI tarkoittaa keuhkojen verisuonten läpäisevyyttä ja aina korkeaa ARDS:ää (akuutti hengitysvaikeusoireyhtymä)
|
Perustaso, 6 tuntia
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Autofagian biomarkkerit eksosomeissa: LC3II (Western blot)
Aikaikkuna: 6 tuntia
|
LC3II ilmestyy fagosomi-lysomonifuusion aikana.
Eksosomi kerätään sepsiksen seerumista.
LC3II havaitaan ja tunnistetaan Western blotilla.
|
6 tuntia
|
|
Autofagian biomarkkerit eksosomeissa: LC3II (NTA)
Aikaikkuna: 6 tuntia
|
LC3II ilmestyy fagosomi-lysomonifuusion aikana.
Eksosomi kerätään sepsiksen seerumista.
Myöhemmin LC3II merkitään ja yhdistetään nanohiukkasten jäljitysanalyysillä.
Pitoisuudet (hiukkasia/ml) koon mukaan (nm) tai intensiteetti (a.u.) koon mukaan (nm)
|
6 tuntia
|
|
Autofagian modifioijat eksosomeissa: mTOR (Western blot)
Aikaikkuna: 6 tuntia
|
nisäkäskohde rapamysiini (mTOR) voi moduloida autofagiaprosessia.
Eksosomi kerätään sepsiksen seerumista.
mTOR havaitaan ja tunnistetaan Western blotilla.
|
6 tuntia
|
|
Autofagian modifioijat eksosomeissa: mTOR (NTA)
Aikaikkuna: 6 tuntia
|
nisäkäskohde rapamysiini (mTOR) voi moduloida autofagiaprosessia.
Eksosomi kerätään sepsiksen seerumista.
mTOR merkitään ja yhdistetään nanohiukkasten jäljitysanalyysillä.
Pitoisuudet (hiukkasia/ml) koon mukaan (nm) tai intensiteetti (a.u.) koon mukaan (nm)
|
6 tuntia
|
|
Autofagian modifioijat eksosomeissa: HSP70 (Western blot)
Aikaikkuna: 6 tuntia
|
lämpöshock-proteiini 70 (HSP70) voi moduloida autofagian prosessia.
Eksosomi kerätään sepsiksen seerumista.
HSP70 havaitaan ja tunnistetaan Western blotilla.
|
6 tuntia
|
|
Autofagian modifioijat eksosomeissa: HSP70 (NTA)
Aikaikkuna: 6 tuntia
|
lämpöshock-proteiini 70 (HSP70) voi moduloida autofagian prosessia.
Eksosomi kerätään sepsiksen seerumista.
Myöhemmin HSP70 merkitään ja yhdistetään nanohiukkasten jäljitysanalyysillä.
Pitoisuudet (hiukkasia/ml) koon mukaan (nm) tai intensiteetti (a.u.) koon mukaan (nm)
|
6 tuntia
|
|
Autofagian modifioijat eksosomeissa: sekvestosomi 1 (Western blot)
Aikaikkuna: 6 tuntia
|
sekvestosomi 1 (SQSMT1/p62) voi moduloida autofagiaprosessia.
Eksosomi kerätään sepsiksen seerumista.
sekvestosomi 1 havaitaan ja tunnistetaan Western blotilla.
|
6 tuntia
|
|
Autofagian modifioijat eksosomeissa: sekvestosomi 1 (NTA)
Aikaikkuna: 6 tuntia
|
sekvestosomi 1 (SQSMT1/p62) voi moduloida autofagiaprosessia.
Eksosomi kerätään sepsiksen seerumista.
Myöhemmin sekvestosomi 1 merkitään ja yhdistetään nanohiukkasten jäljitysanalyysillä.
Pitoisuudet (hiukkasia/ml) koon mukaan (nm) tai intensiteetti (a.u.) koon mukaan (nm)
|
6 tuntia
|
|
Eksosomimerkki: CD9 (Western blot)
Aikaikkuna: 6 tuntia
|
CD9 on eksosomin pintamarkkeri.
Eksosomi kerätään sepsiksen seerumista.
CD9 havaitaan ja tunnistetaan Western blotilla.
|
6 tuntia
|
|
Eksosomimerkki: CD9 (NTA)
Aikaikkuna: 6 tuntia
|
CD9 on eksosomin pintamarkkeri.
Eksosomi kerätään sepsiksen seerumista.
Myöhemmin CD9 merkitään ja yhdistetään nanohiukkasten jäljitysanalyysillä.
Pitoisuudet (hiukkasia/ml) koon mukaan (nm) tai intensiteetti (a.u.) koon mukaan (nm)
|
6 tuntia
|
|
Tehohoitokuolleisuus
Aikaikkuna: Jopa 30 päivää
|
Tehohoitokuolleisuus (%), kuolleisuus tehohoitoon käynnin aikana / tehohoitoon otetun kokonaismäärä
|
Jopa 30 päivää
|
|
28 päivän kuolleisuus
Aikaikkuna: Jopa 28 päivää
|
28 päivän kuolleisuus (%), kuolleisuus 28 vuorokauden aikana / 28 päivän kokonaishoito
|
Jopa 28 päivää
|
|
Sairaalakuolleisuus
Aikaikkuna: Jopa 90 päivää
|
Sairaalakuolleisuus (%), kuolleisuus sairaalahoidon aikana / sairaalahoidon kokonaismäärä
|
Jopa 90 päivää
|
|
Oleskelun kesto teho-osastolla
Aikaikkuna: Jopa 30 päivää
|
ICU-hoidon kesto (päivää)
|
Jopa 30 päivää
|
|
Sairaalassa oleskelun pituus
Aikaikkuna: Yli 90 päivää
|
Sairaalassa oleskelun kesto (päivää)
|
Yli 90 päivää
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Tutkijat
- Opintojohtaja: Wen-Lin Su, PhD, Division of Pulmonary and Critical Care Medicine, Department of Internal Medicine, Taipei Tzu Chi Hospital
Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä
Yleiset julkaisut
- Lo S, Yuan SS, Hsu C, Cheng YJ, Chang YF, Hsueh HW, Lee PH, Hsieh YC. Lc3 over-expression improves survival and attenuates lung injury through increasing autophagosomal clearance in septic mice. Ann Surg. 2013 Feb;257(2):352-63. doi: 10.1097/SLA.0b013e318269d0e2.
- Gao M, Ha T, Zhang X, Wang X, Liu L, Kalbfleisch J, Singh K, Williams D, Li C. The Toll-like receptor 9 ligand, CpG oligodeoxynucleotide, attenuates cardiac dysfunction in polymicrobial sepsis, involving activation of both phosphoinositide 3 kinase/Akt and extracellular-signal-related kinase signaling. J Infect Dis. 2013 May 1;207(9):1471-9. doi: 10.1093/infdis/jit036. Epub 2013 Jan 28.
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (TODELLINEN)
Ensisijainen valmistuminen (TODELLINEN)
Opintojen valmistuminen (TODELLINEN)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (TODELLINEN)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (TODELLINEN)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- 05-XD15-039
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .