Vliv nedostatku vitamínu B12 na střevní mikroflóru kojenců

Vitamin B12 hraje důležitou roli v syntéze DNA a neurologických funkcích. Nedostatek vitaminu B12 je jedním z nejčastějších nedostatků mikroživin a u kojenců je stále častější. Nedostatek se rozvíjí častěji mezi 4. až 12. měsícem věku, což se shoduje se sníženou zásobou plodu. Nejvyšší míra nedostatku vitaminu B12 byla pozorována u kojenců, které kojily matky, které dostávají stravu s nízkým obsahem vitaminu B12. Údaje o prevalenci nedostatku vitaminu B12 v Turecku se týkají především těhotných žen a pohybují se mezi 34 % až 72 %. V naší předchozí studii mělo 36,3 % kojenců (n=222) nedostatek vitamínu B12. Prevalence byla ještě vyšší (43 %) u kojenců výhradně kojených po dobu 6 měsíců.

Fyziologické a neurologické důsledky nedostatků mikroživin byly široce řešeny. Ačkoli je známo, že jedinci s vysokou bakteriální zátěží v tenkém střevě mívají nízký stav kobalaminu, o jeho účincích na vyvíjející se střevní mikroflóru je známo méně. Předpokládá se, že rané environmentální faktory ovlivňující střevní mikrobiotu během tohoto klíčového vývojového období mohou vést k dlouhodobým následkům na zdraví a nemoci. Dostupné údaje jsou většinou omezeny na účinky železa. Přehled literatury nepřinesl žádnou studii, která by zkoumala účinky vitaminu B12 na vyvíjející se střevní mikroflóru.

Studie se provádí na dětské ambulantní klinice Marmarské univerzity. Klinika sídlí v nemocnici a nachází se v Pendik, Istanbul. Ambulance poskytuje kvalitní péči o děti; a kromě antropometrických měření jsou kojenci rutinně vyšetřováni na anémii ve věku 4 až 6 měsíců.

Pro získání způsobilosti je osloveno devadesát dva výhradně kojených dětí. Dvě kojence jsou vyloučeny z důvodu předchozího užívání antibiotik a je zařazeno 90 kojenců.

Zkumavky na odběr stolice se dávají rodičům kojenců, kteří splňují kritéria pro zařazení při rutinním odběru krve. Pro účely zprávy je sérový vitamin B12 <203 pg/ml považován za nedostatek vitaminu B12 a ≥203 pg/ml za dostatečný vitamin B12.

Kojenci s nedostatkem vitaminu B12 jsou léčeni intramuskulárním vitaminem B12 (hydroxykobalamin), 250-500 mcg dvakrát týdně po dobu jednoho týdne a poté 500 mcg týdně po dobu dalších 3 týdnů. Měsíc po suplementaci v doporučené dávce se stolice odebere u podskupiny subjektů (n=11) s nedostatkem vitaminu B12.

Vzorky se uchovávají při 4 °C a za méně než 5 hodin se zmrazí při -80 °C do další analýzy.

Jsou vyplněny dotazníky, jsou provedena antropometrická měření a vzorky stolice jsou transportovány na suchém ledu do Diagen Inc. Extrakce DNA Extrakce DNA bude provedena společností Diagen Inc. Pro extrakční protokol bude použito extrakční zařízení QuickGene (Kurabo, Severní Amerika).

Extrahované vzorky DNA budou zaslány společnosti Diversigen Inc (Houston, USA) pro sekvenování oblasti 16S rRNA genu V4.