Wpływ niedoboru witaminy B12 na mikroflorę jelitową niemowląt

Witamina B12 odgrywa ważną rolę w syntezie DNA i funkcjach neurologicznych. Niedobór witaminy B12 jest jednym z najczęstszych niedoborów mikroelementów i coraz częściej występuje u niemowląt. Niedobór rozwija się częściej między 4 a 12 miesiącem życia, zbiegając się ze zmniejszonym magazynowaniem płodowym. Najwyższe wskaźniki niedoboru witaminy B12 obserwowano u niemowląt karmionych piersią przez matki stosujące dietę ubogą w witaminę B12. Dane dotyczące rozpowszechnienia niedoboru witaminy B12 w Turcji dotyczą głównie kobiet w ciąży i wahają się od 34% do 72%. W naszym poprzednim badaniu 36,3% niemowląt (n=222) miało niedobór witaminy B12. Częstość występowania była jeszcze wyższa (43%) u niemowląt karmionych wyłącznie piersią przez 6 miesięcy.

Fizjologiczne i neurologiczne konsekwencje niedoborów mikroelementów zostały szeroko omówione. Chociaż wiadomo, że osoby z dużą ilością bakterii w jelicie cienkim mają zwykle niski status kobalaminy, mniej wiadomo na temat jej wpływu na rozwijającą się mikroflorę jelitową. Sugeruje się, że wczesne czynniki środowiskowe wpływające na mikroflorę jelitową w tym kluczowym okresie rozwojowym mogą prowadzić do długotrwałych konsekwencji dla zdrowia i chorób. Dostępne dane ograniczają się głównie do wpływu żelaza. Przegląd literatury nie przyniósł żadnego badania, które badałoby wpływ witaminy B12 na rozwijającą się mikroflorę jelitową.

Badanie jest prowadzone w ambulatorium dziecięcym Uniwersytetu Marmara. Klinika ma siedzibę w szpitalu i znajduje się w Pendik w Stambule. Przychodnia zapewnia dobrą opiekę nad dzieckiem; a oprócz pomiarów antropometrycznych niemowlęta są rutynowo badane pod kątem niedokrwistości w wieku od 4 do 6 miesięcy.

Dziewięćdziesiąt dwa niemowlęta karmione wyłącznie piersią są brane pod uwagę w celu zakwalifikowania. Dwoje niemowląt zostało wykluczonych z powodu wcześniejszego stosowania antybiotyków, a 90 niemowląt zostało włączonych do badania.

Probówki do pobierania kału są podawane rodzicom niemowląt, które spełniają kryteria włączenia podczas rutynowego pobierania krwi. Do celów raportowania poziom witaminy B12 w surowicy <203 pg/ml uważa się za niedobór witaminy B12, a poziom ≥203 pg/ml za wystarczający.

Niemowlęta z niedoborem witaminy B12 są leczone domięśniowo witaminą B12 (hydroksykobalaminą), 250-500 mcg dwa razy w tygodniu przez tydzień, a następnie 500 mcg tygodniowo przez kolejne 3 tygodnie. Miesiąc po suplementacji w zalecanej dawce, w podgrupie osób (n=11) z niedoborem witaminy B12 stwierdza się przypominanie stolca.

Próbki przechowuje się w temperaturze 4°C iw czasie krótszym niż 5 godzin zamraża się je w temperaturze -80°C do czasu dalszej analizy.

Kwestionariusze są wypełniane, wykonywane są pomiary antropometryczne, a próbki kału są transportowane na suchym lodzie do firmy Diagen Inc w celu ekstrakcji DNA. Ekstrakcja DNA zostanie przeprowadzona przez firmę Diagen Inc. Do protokołu ekstrakcji zostanie użyte urządzenie do ekstrakcji QuickGene (Kurabo, Ameryka Północna).

Wyekstrahowane próbki DNA zostaną wysłane do Diversigen Inc (Houston, USA) w celu zsekwencjonowania regionu 16S rRNA genu V4.