L'impatto della carenza di vitamina B12 sul microbiota intestinale infantile

La vitamina B12 svolge un ruolo importante nella sintesi del DNA e nelle funzioni neurologiche. La carenza di vitamina B12 è una delle carenze di micronutrienti più comuni ed è diventata sempre più frequente nei neonati. La carenza si sviluppa più spesso tra i 4 ei 12 mesi di età, in coincidenza con la diminuzione del deposito fetale. I più alti tassi di carenza di vitamina B12 sono stati osservati tra i bambini allattati al seno da madri che seguono una dieta a basso contenuto di vitamina B12. I dati sulla prevalenza della carenza di vitamina B12 in Turchia si riferiscono principalmente alle donne in gravidanza e variano tra il 34% e il 72%. Nel nostro studio precedente, il 36,3% dei neonati (n=222) era carente di vitamina B12. La prevalenza era ancora più alta (43%) nei bambini allattati esclusivamente al seno per 6 mesi.

Le conseguenze fisiologiche e neurologiche delle carenze di micronutrienti sono state ampiamente affrontate. Sebbene sia noto che gli individui con un'elevata carica batterica nel loro intestino tenue tendono ad avere uno stato basso di cobalamina, meno si sa sui suoi effetti sul microbiota intestinale in via di sviluppo. Si suggerisce che i primi fattori ambientali che influenzano il microbiota intestinale durante questo cruciale periodo di sviluppo possano portare a conseguenze a lungo termine sulla salute e sulla malattia. I dati disponibili sono per lo più limitati agli effetti del ferro. La revisione della letteratura non ha prodotto alcuno studio che indaghi sugli effetti della vitamina B12 sul microbiota intestinale in via di sviluppo.

Lo studio è condotto presso l'ambulatorio pediatrico dell'Università di Marmara. La clinica ha sede in un ospedale e si trova a Pendik, Istanbul. L'ambulatorio fornisce una buona assistenza all'infanzia; e oltre alle misurazioni antropometriche, i bambini vengono regolarmente sottoposti a screening per l'anemia dai 4 ai 6 mesi di età.

Novantadue neonati allattati esclusivamente al seno vengono contattati per l'idoneità. Due neonati sono esclusi a causa di un precedente uso di antibiotici e vengono arruolati 90 neonati.

Le provette per la raccolta delle feci vengono fornite ai genitori dei neonati che soddisfano i criteri di inclusione durante il prelievo di sangue di routine. Per la segnalazione, la vitamina B12 sierica <203 pg/ml è considerata come carenza di vitamina B12 e ≥203 pg/ml come vitamina B12 sufficiente.

I neonati con carenza di vitamina B12 sono trattati con vitamina b12 intramuscolare (idrossicobalamina), 250-500 mcg due volte a settimana per una settimana, e poi 500 mcg a settimana per altre 3 settimane. Un mese dopo l'integrazione nella dose raccomandata, le feci vengono raccolte in un sottogruppo di soggetti (n=11) con carenza di vitamina B12.

I campioni vengono conservati a 4 C e in meno di 5 ore vengono congelati a -80 C fino a ulteriori analisi.

I questionari vengono completati, vengono prese le misure antropometriche e i campioni fecali vengono trasportati su ghiaccio secco alla Diagen Inc per l'estrazione del DNA L'estrazione del DNA sarà eseguita dalla Diagen Inc. Per il protocollo di estrazione verrà utilizzato il dispositivo di estrazione QuickGene (Kurabo, Nord America).

I campioni di DNA estratti saranno inviati a Diversigen Inc (Houston, USA) per il sequenziamento della regione 16S rRNA Gene V4.