Účinky konzumace brokolicových klíčků u subjektů s nadváhou (SPROUTvsFAT)

Provedli jsme intervenční následnou studii k vyhodnocení vlivu denní konzumace brokolicových klíčků po dobu 10 týdnů (70 dní). Studie byla provedena na Katolické univerzitě v Murcii pod dohledem Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC).

Studie byla provedena v souladu s Helsinskou deklarací lidských studií a schválena Etickou komisí Katolické univerzity v Murcii, jakož i podvýborem pro bioetiku katedry etiky CSIC pro projekt AGL-2013-46247-P. Dobrovolníci (n=40; ​​21 milionů, 19 Ž) byli přijati na Katolické univerzitě v Murcii (UCAM) a všichni byli informováni o charakteristikách studie a podepsali písemně informovaný souhlas. U všech účastníků byly zaznamenány dietní a životní stylové návyky. Během celého období studie nedošlo k žádnému vysazení a nebyly hlášeny žádné nežádoucí účinky v důsledku požití brokolicových klíčků.

Týden před začátkem období intervence byly subjekty požádány, aby se vyvarovaly konzumace zeleniny Brassica (mimo jiné brokolice, ředkvičky, květáku, růžičkové kapusty, hořčice) az nich odvozených produktů a aby dodržovaly dobře vyváženou stravu (na základě na středomořské stravě), bez dalších kritérií pro omezení potravin. Tyto dietní pokyny byly dodržovány po celou dobu studie. Kromě toho byli požádáni, aby zaznamenali jakékoli známky nepříznivého účinku, nemoci nebo odchylky od experimentální stravy. Subjekty během studie udržovaly svůj obvyklý životní styl.

První den dostali účastníci porce čerstvých brokolicových klíčků, které měli sníst na celý týden (7 táců s brokolicovými klíčky po 30 g) a každý týden měli domluvenou schůzku, aby jim poskytli čerstvé produkty. Intervence spočívala v 10týdenním období, které zahrnovalo denní konzumaci porce (30 g) syrových, čerstvých brokolicových klíčků. Toto množství odpovídá poloviční porci podle WHO. Subjekty byly instruovány, aby konzumovaly 1 tác denně a uchovávaly tácky doma v chladu (4 °C). Příjem brokolicových klíčků byl zahrnut do jejich běžné denní stravy a nebyla stanovena žádná konkrétní doba konzumace, jediným omezením bylo vyhnout se vaření klíčků a konzumovat je čerstvé. Postupy vaření mohou ovlivnit obsah glukosinolátů i jejich biologickou dostupnost, a proto byly účastníkům poskytnuty některé recepty, které usnadňují příjem klíčků bez ovlivnění fytochemického složení a vstřebávání. Po období intervence pokračovalo období následného zotavení u všech subjektů dalších 90 dnů bez požití brokolicových klíčků.

Vzorky krve nalačno a 24hodinové vzorky moči byly odebrány v den 0 (těsně před zahájením intervence), den 70 (konec období intervence), den 90 (20 dnů po ukončení intervence) a den 160 (90 dnů po ukončení intervence ). Vzorky krve byly odebrány každému subjektu venepunkcí z antekubitální žíly; 3 ml byly umístěny do heparinových zkumavek a centrifugovány při 10 000 otáčkách za minutu po dobu 10 minut při 4 °C. Plazma byla rozdělena na alikvoty a skladována při -80 °C až do analýzy. Analýzy byly provedeny po ukončení každého období a ve stejné dávce, aby se minimalizovaly analytické odchylky. Celkový objem 24h moči byl zaznamenán pro výpočet absolutních množství sloučenin a metabolitů vyloučených v období studie a alikvoty byly zmrazeny při -80 °C pro další analýzu. Tělesná hmotnost a procento tukové hmoty byly rovněž měřeny a BMI vypočteno v každém časovém bodě odběru vzorků.

Markery zánětu jako IL-6, C-reaktivní protein, IL-1β a TNF-α v plazmě byly stanoveny v naší laboratoři pomocí vysoce citlivých souprav ELISA.

Hladiny glukosinolátů, isothiokyanátů a jejich metabolitů byly měřeny v moči rychlou, citlivou a vysoce výkonnou UHPLC-QqQ-MS/MS.