Efectos del Consumo de Brotes de Brócoli en Sujetos con Sobrepeso (SPROUTvsFAT)

Realizamos un estudio de seguimiento intervencionista para evaluar el efecto del consumo diario de brotes de brócoli durante 10 semanas (70 días). El estudio se llevó a cabo en la Universidad Católica de Murcia bajo la supervisión del Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC).

El estudio se realizó de acuerdo con la Declaración de Helsinki de Estudios Humanos y fue aprobado por el Comité de Ética de la Universidad Católica de Murcia así como por el Subcomité de Bioética del Departamento de Ética del CSIC para el proyecto AGL-2013-46247-P. Los voluntarios (n=40; ​​21 H, 19 H) fueron reclutados en la Universidad Católica de Murcia (UCAM) y todos ellos fueron informados de las características del estudio y firmaron el consentimiento informado por escrito. Se registraron los hábitos dietéticos y de estilo de vida de todos los participantes. No hubo abandonos durante todo el período de estudio y no se informaron efectos adversos debido a la ingestión de brotes de brócoli.

Una semana antes del inicio del período de intervención, se solicitó a los sujetos que evitaran el consumo de vegetales Brassica (brócoli, rábano, coliflor, coles de Bruselas, mostazas, entre otros) y sus derivados, y que siguieran una dieta balanceada (basada en en dieta mediterránea), sin otros criterios de restricción alimentaria. Estas instrucciones dietéticas se mantuvieron durante todo el período de estudio. Además, se les solicitó registrar cualquier signo de efecto adverso, enfermedad o desviación de la dieta experimental. Los sujetos mantuvieron su estilo de vida habitual durante el estudio.

El primer día se entregaron a los participantes las raciones de brotes de brócoli frescos para toda la semana (7 bandejas de brotes de brócoli de 30 g cada una) y cada semana tenían una cita para entregarles los productos frescos. La intervención consistió en un período de 10 semanas que incluyó el consumo diario de una porción (30 g) de brotes de brócoli crudos y frescos. Esta cantidad es consistente con media ración según la OMS. Los sujetos fueron instruidos para ingerir 1 bandeja por día y mantener las bandejas refrigeradas (4º C) en casa. La ingesta de los germinados de brócoli se incluyó en su dieta diaria normal y no se estableció un horario específico de consumo, con la única limitación de evitar la cocción de los germinados y consumirlos frescos. Los procedimientos de cocción pueden afectar el contenido de glucosinolatos así como su biodisponibilidad, por lo que se proporcionaron algunas recetas a los participantes para facilitar la ingesta de los germinados sin afectar la composición y absorción fitoquímica. Después del período de intervención, continuó un período de recuperación de seguimiento para todos los sujetos durante otros 90 días sin ingestión de brotes de brócoli.

Se tomaron muestras de sangre en ayunas y muestras de orina de 24 h el día 0 (justo antes de iniciar la intervención), el día 70 (fin del período de intervención), el día 90 (20 días después de finalizada la intervención) y el día 160 (90 días después de finalizada la intervención). ). Se recogieron muestras de sangre de cada sujeto mediante venopunción de la vena antecubital; Se colocaron 3 mL en tubos con heparina y se centrifugaron a 10000 rpm durante 10 min a 4ºC. El plasma se dividió en alícuotas y se almacenó a -80ºC hasta su análisis. Los análisis se realizaron una vez finalizado cada período y en el mismo lote para minimizar las variaciones analíticas. Se registró el volumen total de orina de 24 h para calcular las cantidades absolutas de los compuestos y metabolitos excretados en el período de estudio y se congelaron alícuotas a -80 ºC para su posterior análisis. También se midieron el peso corporal y el porcentaje de masa grasa y se calculó el IMC en cada punto de muestreo.

En nuestro laboratorio se determinaron marcadores de inflamación como IL-6, proteína C reactiva, IL-1β y TNF-α en plasma mediante kits ELISA de alta sensibilidad.

Los niveles de glucosinolatos, isotiocianatos y sus metabolitos se midieron en la orina mediante un UHPLC-QqQ-MS/MS rápido, sensible y de alto rendimiento.