Effetti del consumo di germogli di broccoli nei soggetti in sovrappeso (SPROUTvsFAT)

Abbiamo eseguito uno studio interventistico di follow-up per valutare l'effetto del consumo giornaliero di germogli di broccoli durante 10 settimane (70 giorni). Lo studio è stato condotto presso l'Università Cattolica di Murcia sotto la supervisione del Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC).

Lo studio è stato condotto secondo la Dichiarazione di Helsinki sugli studi umani e approvato dal Comitato Etico dell'Università Cattolica di Murcia e dal Sottocomitato di Bioetica del Dipartimento di Etica del CSIC per il progetto AGL-2013-46247-P. I volontari (n=40; ​​21 M, 19 W) sono stati reclutati presso l'Università Cattolica di Murcia (UCAM) e tutti sono stati informati sulle caratteristiche dello studio e hanno firmato il consenso informato scritto. Le abitudini dietetiche e di stile di vita sono state registrate da tutti i partecipanti. Non ci sono stati abbandoni durante l'intero periodo di studio e non sono stati segnalati effetti avversi dovuti all'ingestione di germogli di broccoli.

Una settimana prima dell'inizio del periodo di intervento, ai soggetti è stato chiesto di evitare il consumo di verdure Brassica (broccoli, ravanelli, cavolfiori, cavolini di Bruxelles, mostarde, tra gli altri) e dei loro derivati, e di seguire una dieta ben bilanciata (basata sulla dieta mediterranea), senza altri criteri di restrizione alimentare. Queste istruzioni dietetiche sono state mantenute durante l'intero periodo di studio. Inoltre, è stato loro richiesto di registrare qualsiasi segno di effetto avverso, malattia o deviazione dalla dieta sperimentale. I soggetti hanno mantenuto il loro stile di vita abituale durante lo studio.

Il primo giorno ai partecipanti sono state consegnate le porzioni di germogli di broccoli freschi da assumere per l'intera settimana (7 vaschette di germogli di broccoli da 30 g ciascuna) e ogni settimana avevano un appuntamento per fornire loro i prodotti freschi. L'intervento è consistito in un periodo di 10 settimane che prevedeva il consumo giornaliero di una porzione (30 g) di germogli di broccoli freschi e crudi. Questa quantità è coerente con una mezza porzione secondo l'OMS. I soggetti sono stati istruiti a ingerire 1 vassoio al giorno e a tenere i vassoi refrigerati (4º C) a casa. L'assunzione dei germogli di broccolo è stata inclusa nella loro normale dieta quotidiana e non è stato stabilito un orario specifico di consumo, con l'unica limitazione di evitare la cottura dei germogli e di consumarli freschi. Le procedure di cottura possono influenzare il contenuto di glucosinolati così come la loro biodisponibilità e pertanto sono state fornite ai partecipanti alcune ricette per facilitare l'assunzione dei germogli senza influire sulla composizione fitochimica e sull'assorbimento. Dopo il periodo di intervento, un periodo di recupero di follow-up per tutti i soggetti è proseguito per altri 90 giorni senza ingestione di germogli di broccoli.

I campioni di sangue a digiuno e i campioni di urina delle 24 ore sono stati prelevati il ​​giorno 0 (prima dell'inizio dell'intervento), il giorno 70 (fine del periodo di intervento), il giorno 90 (20 giorni dopo la fine dell'intervento) e il giorno 160 (90 giorni dopo la fine dell'intervento) ). I campioni di sangue sono stati raccolti da ciascun soggetto mediante prelievo venoso dalla vena antecubitale; 3 mL sono stati posti in tubi di eparina e centrifugati a 10000 rpm per 10 minuti a 4ºC. Il plasma è stato aliquotato e conservato a -80ºC fino all'analisi. Le analisi sono state eseguite una volta terminato ogni periodo e nello stesso lotto per ridurre al minimo le variazioni analitiche. Il volume totale delle urine delle 24 ore è stato registrato per calcolare le quantità assolute dei composti e dei metaboliti escreti nel periodo di studio e le aliquote sono state congelate a -80ºC per ulteriori analisi. Sono stati misurati anche il peso corporeo e la percentuale di massa grassa e il BMI è stato calcolato in ogni momento del campionamento.

I marcatori di infiammazione come IL-6, proteina C-reattiva, IL-1β e TNF-α nel plasma sono stati determinati nel nostro laboratorio utilizzando kit ELISA ad alta sensibilità.

I livelli di glucosinolati, isotiocianati e dei loro metaboliti sono stati misurati nelle urine mediante un UHPLC-QqQ-MS/MS rapido, sensibile e ad alto rendimento.