Syndrom reverzibilní cerebrální vazokonstrikce a virus varicella zoster (RCVS&VZV)

V předchozí pilotní studii byla reaktivace VZV potvrzena u 63,6 % pacientů s RCVS testem buněčné imunitní odpovědi (CMI) a 18,2 % pomocí Saliva PCR. U žádného z pacientů, kteří byli jednoduše ve stresu, nedošlo k reaktivaci VZV. Vzhledem k tomu, že asi 20 % mělo falešně negativní výsledky v angiografických nálezech RCVS, stanovili jsme velikost účinku na 0,63 ve skupině subjektů a 0,12 ve skupině kontrol. Pomocí hodnot alfa 0,05 a beta hodnot 0,2 jsme vypočítali cílové číslo studie. Pokud je poměr případů ke kontrolám 1:2, bylo zapotřebí 9 pacientů s případem a 18 kontrolních pacientů a pokud je poměr 1:3, bylo zapotřebí 8 pacientů s případem a 24 kontrolních pacientů. Očekáváme, že do dvou let zapíšeme 10 pacientů s případem a 20 až 30 kontrolních pacientů, s ohledem na míru poklesu 10–20 %.

Základní klinické informace týkající se věku, pohlaví, kuřácké anamnézy a zdravotních komorbidit včetně hypertenze (léčená, systolický krevní tlak ≥140 mmHg nebo diastolický krevní tlak ≥90 mmHg při propuštění), diabetes (léčená, glykémie nalačno ≥126 mg/den), hyperlipidémie (léčeno, hladina celkového cholesterolu ≥200 mg/dl nebo hladina lipoproteinu s nízkou hustotou ≥140 mg/dl) a onemocnění koronárních tepen bude shromážděno při přijetí. Budou provedeny laboratorní testy včetně kompletního krevního obrazu, biochemie krve, c-reaktivního proteinu a sedimentace erytrocytů. Budou shromážděny snímky MRI mozku, MR angiografie, CT angiografie nebo digitální substrakční angiografie, pokud jsou k dispozici.

Testy na VZV specifické protilátkové odpovědi a T-buňkami zprostředkovanou imunitní odpověď budou provedeny VZV specifickou ELISA a IFN-γ ELISPOT, v daném pořadí. Výsledek odpovědí T buněk bude ukázán jako počet bodů na 10^6 PBMC. V den odběru vzorku krve bude plazma izolována a zmražena (-80℃). Periferní mononukleární buňky budou odděleny od zbývajících vzorků krve a budou uchovávány ve zmrazeném stavu (-190℃). Roztavte zmrazené periferní mononukleární buňky a naočkujte je na destičku (T-Track lidský IFN-γ, Lophius) protilátkou proti lidskému IFN-γ a naočkujte na ně lyzát VZV (Microbix) 50 ug/ml. Po inkubaci 24 hodin se provede barvení a skvrna se odečte v automatické čtečce ELISPOT (čtecí systém ELR07, Autoimmune Diagnostika GmbH).

Pro statistickou analýzu budou pacienti s bouřkovou bolestí hlavy rozděleni do dvou skupin podle přítomnosti RCVS. Mezi nimi bude porovnána a analyzována míra infekce virem varicella zoster. Bude proveden Fisherův přesný test, Mann-Whitney test, Pearsonova korelace. Rovněž bude použita logistická regresní analýza a v případě potřeby budou upraveny kovariáty. Rovněž bude analyzována citlivost a specificita testů na reaktivaci VZV a RCVS.