Sindrome da vasocostrizione cerebrale reversibile e virus della varicella zoster (RCVS&VZV)

Nel precedente studio pilota, la riattivazione del VZV è stata confermata nel 63,6% dei pazienti affetti da RCVS mediante test di risposta immunitaria mediata dalle cellule (CMI) e nel 18,2% mediante PCR con saliva. Nessuno dei pazienti che erano semplicemente stressati ha mostrato la riattivazione del VZV. Considerando che circa il 20% ha avuto risultati falsi negativi nei risultati angiografici di RCVS, abbiamo impostato la dimensione dell'effetto a 0,63 nel gruppo di soggetti e 0,12 nel gruppo di controllo. Utilizzando valori alfa di 0,05 e valori beta di 0,2, abbiamo calcolato il numero target dello studio. Se il rapporto tra casi e controlli è 1:2, sono necessari 9 casi-pazienti e 18 controlli-pazienti e se il rapporto è 1:3, sono necessari 8 casi-pazienti e 24 controlli-pazienti. Prevediamo di arruolare 10 pazienti caso e 20-30 pazienti controllo entro due anni, considerando il tasso di abbandono del 10~20%.

Informazioni cliniche di base relative a età, sesso, storia del fumo e comorbilità mediche tra cui ipertensione (trattata, pressione arteriosa sistolica ≥140 mmHg o pressione arteriosa diastolica ≥90 mmHg alla dimissione), diabete (trattato, glicemia a digiuno ≥126 mg/d), iperlipidemia (trattato, livello di colesterolo totale ≥200 mg/dl o livello di lipoproteine ​​a bassa densità ≥140 mg/dl) e malattia coronarica saranno raccolti al momento del ricovero. Saranno eseguiti test di laboratorio, tra cui emocromo completo, chimica del sangue, proteina c-reattiva e velocità di sedimentazione degli eritrociti. Se presenti, verranno raccolte immagini di risonanza magnetica cerebrale, angiografia RM, angiografia TC o angiografia a sottrazione digitale.

I test per le risposte anticorpali specifiche per VZV e per la risposta immunitaria mediata da cellule T saranno eseguiti rispettivamente mediante ELISA specifico per VZV e IFN-γ ELISPOT. Il risultato per le risposte delle cellule T verrà mostrato come numero spot per 10 ^ 6 PBMC. Il giorno della raccolta del campione di sangue, il plasma verrà isolato e congelato (-80 ℃). Le cellule mononucleate periferiche saranno separate dai rimanenti campioni di sangue e mantenute congelate (-190℃). Sciogliere le cellule mononucleate periferiche congelate e inocularle su una piastra (T-Track IFN-γ umano, Lophius) con anticorpo anti-IFN-γ umano e inoculare lisato VZV (Microbix) 50 ug/mL su di esse. Dopo 24 ore di incubazione, verrà eseguita la colorazione e lo spot verrà letto in un lettore automatizzato ELISPOT (sistema di lettura ELR07, Autoimmune Diagnostika GmbH).

Per l'analisi statistica, i pazienti con cefalea a rombo di tuono saranno divisi in due gruppi in base alla presenza di RCVS. Tra questi, verrà confrontato e analizzato il tasso di infezione da virus varicella zoster. Verranno eseguiti il ​​test esatto di Fisher, il test di Mann-Whitney, la correlazione di Pearson. Inoltre, verrà utilizzata l'analisi di regressione logistica e le covariate verranno adeguate se necessario. Verranno inoltre analizzate la sensibilità e la specificità dei test per la riattivazione di VZV e RCVS.