Omkeerbaar cerebraal vasoconstrictiesyndroom en Varicella Zoster-virus (RCVS&VZV)

In de vorige pilotstudie werd reactivering van VZV bij 63,6% van de patiënten bevestigd met RCVS door celgemedieerde immuunrespons (CMI)-test en 18,2% door speeksel-PCR. Geen van de patiënten die gewoon gestrest waren, vertoonde reactivering van VZV. Aangezien ongeveer 20% vals-negatieve resultaten had in angiografische bevindingen van RCVS, stelden we de effectgrootte in op 0,63 in de groep proefpersonen en 0,12 in de groep controles. Met alfawaarden van 0,05 en bètawaarden van 0,2 berekenden we het streefgetal van de studie. Als de verhouding tussen gevallen en controles 1:2 is, waren 9 casuspatiënten en 18 controlepatiënten nodig en als de verhouding 1:3 is, waren 8 casuspatiënten en 24 controlepatiënten nodig. We verwachten binnen twee jaar 10 casuspatiënten en 20 tot 30 controlepatiënten te kunnen inschrijven, rekening houdend met het uitvalpercentage van 10~20%.

Klinische basisinformatie met betrekking tot leeftijd, geslacht, rookgeschiedenis en medische comorbiditeiten waaronder hypertensie (behandeld, systolische bloeddruk ≥140 mmHg of diastolische bloeddruk ≥90 mmHg bij ontslag), diabetes (behandeld, nuchtere bloedglucose ≥126 mg/d), hyperlipidemie (behandeld, totaal cholesterolgehalte ≥ 200 mg/dl of low-density lipoprotein-gehalte ≥ 140 mg/dl) en coronaire hartziekte worden verzameld bij opname. Laboratoriumtesten, waaronder volledig bloedbeeld, bloedchemie, c-reactief proteïne en erytrocytsedimentsnelheid zullen worden uitgevoerd. Afbeeldingen van hersen-MRI, MR-angiografie, CT-angiografie of digitale substractie-angiografie zullen worden verzameld, indien aanwezig.

Tests voor VZV-specifieke antilichaamresponsen en T-cel-gemedieerde immuunrespons zullen worden uitgevoerd door respectievelijk VZV-specifieke ELISA en IFN-γ ELISPOT. Het resultaat voor T-celreacties wordt weergegeven als spotnummer per 10^6 PBMC's. Op de dag van bloedafname wordt het plasma geïsoleerd en ingevroren (-80℃). Perifere mononucleaire cellen worden gescheiden van de resterende bloedmonsters en bevroren bewaard (-190 ℃). Smelt de bevroren perifere mononucleaire cellen en inoculeer ze op een plaat (T-Track humaan IFN-γ, Lophius) met anti-humaan IFN-γ-antilichaam en inoculeer VZV-lysaat (Microbix) 50 ug/mL erop. Na 24 uur incubatie wordt de kleuring uitgevoerd en wordt de vlek gelezen in een geautomatiseerde ELISPOT-lezer (ELR07-lezersysteem, Autoimmune Diagnostika GmbH).

Voor statistische analyse worden patiënten met donderslaghoofdpijn verdeeld in twee groepen op basis van de aanwezigheid van RCVS. Onder hen zal de mate van infectie met het varicella zoster-virus worden vergeleken en geanalyseerd. Fisher's exact-test, Mann-Whitney-test, Pearson-correlatie zullen worden uitgevoerd. Ook zal logistische regressieanalyse worden gebruikt en zullen covariaten indien nodig worden aangepast. Gevoeligheid en specificiteit van tests voor reactivering van VZV en RCVS zullen ook worden geanalyseerd.