Frekvence polymorfismu genu estrogenového receptoru 1 u fibromyalgického syndromu

Cíl: Skutečnost, že fibromyalgie a migréna jsou častější u žen v reprodukčním věku a jejich výskyt je vyšší než u jiné populace, naznačuje, že tato tři onemocnění mohou mít společný genetický základ. Proto jsme se zaměřili na prozkoumání, zda existuje vztah mezi polymorfismy ESR-1 594G> A (rs2228480), ESR-1 325C> G (rs2295190) a onemocněním fibromyalgie.

Úvod: Fibromyalgický syndrom (FMS), difuzní bolest těla, chronické muskuloskeletální onemocnění se zvýšenou únavou a citlivostí a poruchy spánku ve specifických anatomických oblastech. Diagnóza FMS je založena na klasifikačních kritériích American College of Rheumatology (ACR) z roku 1990. FM často postihuje ženy ve věku 30 až 50 let a její prevalence se pohybuje mezi 1 % a 4 % z celé populace, 0-4 % u mužů a 2,5-10,5 % u žen. Výzkumníci zjistili, že silná familiární tendence u FM má riziko rozvoje FM u prvostupňových příbuzných pacientů s FM, 8krát vyšší než u běžné populace. Rodinní příslušníci pacientů s FM jsou náchylnější k bolesti a je u nich pravděpodobnější, že se u nich rozvinou stavy, jako je syndrom dráždivého tračníku (IBS), temporomandibulární porucha (TMD), bolest hlavy-migréna, syndrom neklidných nohou a další regionální bolestivé syndromy. Bylo provedeno několik studií k prokázání specifického genetického polymorfismu u FM. Doposud bylo zjištěno, že polymorfismy v genech serotoninového receptoru, serotoninového transportéru, dopaminového D4 receptoru a katechol-O-methyltransferázy jsou vysoké. Všechny tyto identifikované polymorfismy jsou zodpovědné za metabolismus a transport monoaminů; Jsou to sloučeniny, které hrají klíčovou roli v lidské stresové reakci.

Častější výskyt FMS u žen je pozorován u mladých dospělých, což ukazuje na vliv pohlavních hormonů na patofyziologii tohoto stavu. Mechanismus účinku těchto hormonálních účinků je však stále neznámý a je předmětem diskuse. Steroidní hormony, zejména estrogen, ovlivňují receptory periferního i centrálního nervového systému (CNS) (estrogenový receptor-1; estrogenový receptor-a [Era] a estrogenový receptor-2; estrogenový receptor-b [ERb]), zánětlivý proces a přenos centrální bolesti. Estrogen může například přímo ovlivňovat monocyty a makrofágy, aby reguloval produkci cytokinů (např. interleukin-1 [IL-1], IL-6 a tumor nekrotizující faktor-a [TNF-a]).

Migréna je neurologická porucha charakterizovaná epizodami hemikraniální bolesti charakterizované záchvaty. jednoroční prevalence migrény v obecné populaci v Turecku 16,4 %, zatímco podíl pacientů s FM byl signifikantně nižší [9]. Výskyt bolestí hlavy se zvýšil u pacientů s fibromyalgickým syndromem. Migrénové a nemigrenózní bolesti hlavy byly hlášeny u pacientů s FM mezi 28 % a 58 %. Podobně ve studii provedené na 33 pacientech s FM byla současná migréna přítomna u 45 % a celoživotní anamnéza migrény byla 55 %. Prevalence migrény byla hlášena jako přibližně dvojnásobná (reprodukční období) a závažnost záchvatů migrény u žen ve srovnání s muži. Studie zkoumající vztah mezi hladinami pohlavních hormonů a polymorfismy v důsledku častějších reprodukčních stavů ukázaly, že jsou spojeny s polymorfismy estrogenového receptoru alfa (ERa 594G> A (rs2228480), ERa 325C> G (rs2295190).

Metodika: Sestavení studijních skupin: 100 pacientů s diagnózou Fibromyalgický syndrom dle kritérií AČR 1990, ve věku 18-65 let, s obdobnými sociodemografickými charakteristikami. Bude odebráno 100 kontrolních pacientů. Jako vstupní kritéria pro pacienty; Ve věku mezi 18 a 60 lety, s diagnózou primární FMS podle diagnostických kritérií ACR 1990, souhlas s účastí ve studii, nepřítomnost jakéhokoli onemocnění pohlavních hormonů. Kontrolní skupina bude složena z dobrovolníků s podobnými věkovými a genderovými charakteristikami. Dobrovolníci přijatí do kontrolní skupiny nebudou mít žádný pohlavní hormon. Účastníci budou o předmětu informováni před nástupem do studie a budou odebrána potřebná povolení.

Námi připravený polostrukturovaný formulář sociodemografických informací bude použit v souladu s klinickými zkušenostmi a informacemi získanými z naskenovaných zdrojů a cílů studie (PŘÍLOHA-1) Věk, pohlaví, úroveň vzdělání, rodinný stav, BMI, rodina anamnéza onemocnění fibromyalgie a doprovodných příznaků. Doprovázeno příznaky; Budou zpochybněny příznaky TMD, jako je bolest hlavy migrénového typu, bolest a zablokování čelistí, porucha spánku, sucho v ústech, suché oči, příznaky podrážděného střeva, příznaky neklidných nohou, otoky měkkých tkání, únava, depresivní příznaky nebo deprese. Pacienty s bolestí hlavy zhodnotí neurolog z hlediska diagnózy migrény. Hodnocení bolesti u případů bude provedeno pomocí vizuální analogové škály (VAS). K tomu poslouží 10 cm pravítko. Pacienti budou hodnoceni jednou a po vyhodnocení bude pacientům odebráno příslušné množství vzorků krve.

Odběr vzorků krve: Vzorky krve o objemu 5 ml od kontrolní skupiny a skupiny pacientů budou odebrány do sterilních, citrátových zkumavek. Krev ve zkumavkách bude skladována při -80 °C až do izolace DNA.

Izolace genomové DNA: Genomická DNA bude izolována z krve pomocí soupravy pro izolaci DNA. Čistota DNA bude stanovena spektrofotometrickou metodou.

Genotypizace: Genotypizace ESR-1 325 C> G a 594 G> A polymorfismy ve studované skupině budou provedeny pomocí soupravy pro analýzu polymorfismu jednoho nukleotidu a sekvenčně specifických sond pro hydrolýzu s dvojitým barvivem a analýzy alelické segregace v řetězci polymerázy v reálném čase reakce (RT-PCR) s použitím primerů. Genotypizace každého pacienta a kontroly se zopakuje 3krát, aby byla zajištěna spolehlivost výsledků analýzy.

Statistické metody: Počet jedinců, kteří mají být zahrnuti do studie, byl stanoven pomocí statistické analýzy síly. V této studii, když α = 0,05, β = 0,10, 1- β = 0,90, bylo rozhodnuto vzít 100 jedinců do každého pacienta a kontrolní skupiny a bylo zjištěno, že síla testu je p = 0,9072. Všechna data získaná ze studie budou vyhodnocena programem SPSS 18. K hodnocení vhodnosti nominálních a spojitých proměnných bude použit χ2 test a Student-t a Mann-Whitneyho testy.