Estrogeenireseptori 1 -geenin polymorfismin esiintymistiheys fibromyalgiaoireyhtymässä

Tavoite: Se, että fibromyalgia ja migreeni ovat yleisempiä lisääntymisiässä olevilla naisilla ja niiden esiintyvyys on korkeampi kuin muissa populaatioissa, viittaa siihen, että näillä kolmella sairaudella voi olla yhteinen geneettinen perusta. Siksi pyrimme tutkimaan, onko ESR-1 594G> A (rs2228480), ESR-1 325C> G (rs2295190) polymorfismien ja fibromyalgiataudin välillä yhteyttä.

Johdanto: Fibromyalgia-oireyhtymä (FMS), diffuusi kehon kipu, krooninen tuki- ja liikuntaelin sairaus, johon liittyy lisääntynyt väsymys ja arkuus sekä unihäiriöt tietyillä anatomisilla alueilla. FMS-diagnoosi perustuu American College of Rheumatology (ACR) 1990 -luokituskriteereihin. FM sairastaa usein 30–50-vuotiaita naisia, ja sen esiintyvyys on 1–4 prosenttia koko väestöstä, 0–4 prosenttia miehistä ja 2,5–10,5 prosenttia naisista. Tutkijat ovat havainneet, että FM:n voimakkaalla perhetaipumuksella on FM-potilaiden ensimmäisen asteen sukulaisten riski FM:n kehittymiseen, 8 kertaa suurempi kuin muussa väestössä. FM-potilaiden perheenjäsenet ovat alttiimpia kivulle ja heillä on todennäköisemmin sairauksia, kuten ärtyvän suolen oireyhtymä (IBS), temporomandibulaarinen häiriö (TMD), päänsärky-migreeni, levottomat jalat -oireyhtymä ja muita alueellisia kipuoireyhtymiä. Useita tutkimuksia on tehty spesifisen geneettisen polymorfismin osoittamiseksi FM:ssä. Tähän mennessä serotoniinireseptorin, serotoniinin kuljettajan, dopamiini D4 -reseptorin ja katekoli-O-metyylitransferaasigeenien polymorfismien on havaittu olevan korkeita. Kaikki nämä tunnistetut polymorfismit ovat vastuussa monoamiinien metaboliosta ja kuljetuksesta; Nämä ovat yhdisteitä, joilla on kriittinen rooli ihmisen stressireaktiossa.

FMS-tautia esiintyy useammin naisilla nuorilla aikuisilla, mikä osoittaa sukupuolihormonien vaikutuksen tämän tilan patofysiologiaan. Näiden hormonaalisten vaikutusten vaikutusmekanismia ei kuitenkaan vielä tunneta, ja se on keskustelun aihe. Steroidihormonit, erityisesti estrogeeni, vaikuttavat sekä ääreis- että keskushermoston (CNS) reseptoreihin (estrogeenireseptori-1; estrogeenireseptori-a [Era] ja estrogeenireseptori-2; estrogeenireseptori-b [ERb]), tulehdusprosessiin ja keskuskivun siirtyminen. Esimerkiksi estrogeeni voi suoraan vaikuttaa monosyytteihin ja makrofageihin säätelemään sytokiinien tuotantoa (esim. interleukiini-1 [IL-1], IL-6 ja tuumorinekroositekijä-a [TNF-a]).

Migreeni on neurologinen sairaus, jolle on tunnusomaista hemikraniaalisen kivun jaksot, joille ovat ominaisia ​​kohtaukset. yhden vuoden migreenin esiintyvyys Turkin väestössä 16,4 %, kun taas FM-potilaiden osuus oli merkittävästi pienempi (9). Päänsäryn ilmaantuvuus lisääntyi potilailla, joilla oli fibromyalgiaoireyhtymä. Migreeniä ja ei-migreenistä päänsärkyä on raportoitu potilailla, joilla on FM 28–58 %. Vastaavasti 33 FM-potilaalla tehdyssä tutkimuksessa nykyinen migreeni oli läsnä 45 prosentilla ja elinikäinen migreenihistoria oli 55 prosenttia. Migreenin esiintyvyyden on raportoitu olevan noin 2-kertainen (lisääntymisaika) ja migreenikohtausten vakavuuden naisilla miehiin verrattuna. Sukupuolihormonitasojen ja lisääntymistilojen yleistymisestä johtuvien polymorfismien välistä suhdetta tutkivat tutkimukset ovat osoittaneet, että ne liittyvät estrogeenireseptori-alfa (ERa 594G> A (rs2228480), ERa 325C> G (rs2295190) polymorfismiin.

Menetelmät: Tutkimusryhmien muodostaminen: 100 potilasta, joilla on diagnosoitu fibromyalgia-oireyhtymä ACR 1990 -kriteerien mukaisesti, 18-65 vuotta vanhoja ja joilla on samanlaiset sosiodemografiset ominaisuudet. Otetaan 100 kontrollipotilasta. Potilaiden sisällyttämiskriteerinä; Ikä 18-60 vuotta, primaarisen FMS-diagnoosin suorittaminen ACR 1990 -diagnostisten kriteerien mukaisesti, suostumus osallistumaan tutkimukseen, sukupuolihormonisairauden puuttuminen. Vertailuryhmä koostuu vapaaehtoisista, joilla on samanikäiset ja sukupuoliset ominaisuudet. Kontrolliryhmään otetuilla vapaaehtoisilla ei ole sukupuolihormonia. Osallistujille tiedotetaan aiheesta ennen tutkimukseen ottamista ja hankitaan tarvittavat luvat.

Laadittuamme puolistrukturoitua sosiodemografista tietolomaketta käytetään kliinisen kokemuksen ja skannatuista lähteistä saatujen tietojen ja tutkimuksen tavoitteiden mukaisesti (LIITE-1) Ikä, sukupuoli, koulutustaso, siviilisääty, BMI, perhe fibromyalgiasairauksien historia ja niihin liittyvät oireet. Mukana oireet; TMD-oireet, kuten migreenityyppinen päänsärky, leuan kipu ja lukittuminen, unihäiriöt, suun kuivuminen, silmien kuivuminen, ärtyvän suolen oireet, levottomat jalat, pehmytkudosten turvotus, väsymys, masennusoireet tai masennushistoria, kyseenalaistetaan. Neurologi arvioi päänsärkypotilaat migreenin diagnoosin suhteen. Tapausten kivun arviointi tehdään Visual Analog Scale (VAS) -asteikolla. Tätä varten käytetään 10 cm viivainta. Potilaat arvioidaan kerran ja arvioinnin jälkeen potilailta otetaan sopiva määrä verinäytteitä.

Verinäytteiden kerääminen: 5 ml verinäytteitä kontrolli- ja potilasryhmistä otetaan steriileihin sitraattiputkiin. Putkissa olevaa verta säilytetään -80 °C:ssa DNA:n eristämiseen asti.

Genomisen DNA:n eristäminen: Genominen DNA eristetään verestä käyttämällä DNA-eristyssarjaa. DNA:n puhtaus määritetään spektrofotometrisellä menetelmällä.

Genotyypitys: ESR-1 325 C> G ja 594 G> A polymorfismien genotyypitys tutkimusryhmässä suoritetaan käyttämällä yhden nukleotidin polymorfismin analyysipakkausta ja sekvenssispesifisiä kaksoisvärihydrolyysikoettimia ja alleelisegregaatioanalyysiä reaaliaikaisessa polymeraasiketjussa reaktiota (RT-PCR) käyttäen alukkeita. Jokaisen potilaan ja kontrollin genotyypitys toistetaan 3 kertaa analyysitulosten luotettavuuden varmistamiseksi.

Tilastolliset menetelmät: Tutkimukseen otettavien yksilöiden lukumäärä määritettiin Statistical Power Analysis -analyysillä. Tässä tutkimuksessa, kun α = 0,05, β = 0,10, 1- β = 0,90, päätettiin ottaa 100 yksilöä jokaiseen potilaaseen ja kontrolliryhmään, ja testin vahvuudeksi todettiin p = 0,9072. Kaikki tutkimuksesta saadut tiedot arvioidaan SPSS 18 -ohjelmalla. Nimellisten ja jatkuvien muuttujien sopivuuden arvioinnissa käytetään χ2-testiä sekä Student-t- ja Mann-Whitney-testejä.