Frequência do polimorfismo do gene do receptor de estrogênio 1 na síndrome da fibromialgia

Objetivo: O fato de a fibromialgia e a enxaqueca serem mais comuns em mulheres em idade reprodutiva e sua incidência ser maior do que em outras populações sugere que essas três doenças podem ter uma base genética comum. Portanto, nosso objetivo foi investigar se existe uma relação entre os polimorfismos ESR-1 594G> A (rs2228480), ESR-1 325C> G (rs2295190) e a doença da fibromialgia.

Introdução: Síndrome da fibromialgia (SFM), dor corporal difusa, doença musculoesquelética crônica com aumento da fadiga e sensibilidade e distúrbio do sono em regiões anatômicas específicas. O diagnóstico de SFM é baseado nos critérios de classificação de 1990 do American College of Rheumatology (ACR). A FM afeta frequentemente mulheres entre os 30 e os 50 anos e a sua prevalência situa-se entre 1% e 4% de toda a população, 0-4% nos homens e 2,5-10,5% nas mulheres. Os pesquisadores descobriram que a forte tendência familiar na FM tem um risco de desenvolver FM em parentes de primeiro grau de pacientes com FM, 8 vezes mais do que na população em geral. Familiares de pacientes com FM são mais suscetíveis à dor e mais propensos a desenvolver condições como síndrome do intestino irritável (SII), disfunção temporomandibular (DTM), cefaléia-enxaqueca, síndrome das pernas inquietas e outras síndromes de dor regional. Vários estudos têm sido conduzidos para demonstrar o polimorfismo genético específico na FM. Até o momento, os polimorfismos nos genes do receptor de serotonina, transportador de serotonina, receptor de dopamina D4 e catecol-O-metiltransferase são altos. Todos esses polimorfismos identificados são responsáveis ​​pelo metabolismo e transporte de monoaminas; Estes são compostos que desempenham um papel crítico na resposta humana ao estresse.

A ocorrência mais frequente de SFM em mulheres é observada em adultos jovens, indicando o efeito dos hormônios sexuais na fisiopatologia dessa condição. No entanto, o mecanismo de ação desses efeitos hormonais ainda é desconhecido e é motivo de debate. Os hormônios esteróides, em particular o estrogênio, afetam os receptores do sistema nervoso periférico e central (SNC) (receptor de estrogênio-1; receptor de estrogênio-a [Era] e receptor de estrogênio-2; receptor de estrogênio-b [ERb]), o processo inflamatório e a transmissão da dor central. Por exemplo, o estrogênio pode afetar diretamente monócitos e macrófagos para regular a produção de citocinas (por exemplo, interleucina-1 [IL-1], IL-6 e fator de necrose tumoral-a [TNF-a]).

A enxaqueca é um distúrbio neurológico caracterizado por episódios de dor hemicraniana caracterizados por ataques. prevalência de um ano de enxaqueca na população geral na Turquia 16,4%, enquanto a proporção de pacientes com FM foi significativamente menor (9). A incidência de dor de cabeça aumentou em pacientes com síndrome de fibromialgia. Enxaquecas e dores de cabeça não enxaquecosas foram relatadas em pacientes com FM entre 28% e 58%. Da mesma forma, em um estudo realizado em 33 pacientes com FM, a enxaqueca atual estava presente em 45% e a história de enxaqueca ao longo da vida foi de 55%. Relatou-se que a prevalência de enxaqueca é aproximadamente 2 vezes maior (período reprodutivo) e a gravidade das crises de enxaqueca em mulheres em comparação com os homens. Estudos que investigam a relação entre níveis de hormônios sexuais e polimorfismos devido a estados reprodutivos mais frequentes mostraram que eles estão associados a polimorfismos do receptor alfa de estrogênio (ERa 594G> A (rs2228480), ERa 325C> G (rs2295190).

Métodos: Estabelecimento de grupos de estudo: 100 pacientes com diagnóstico de síndrome de fibromialgia de acordo com os critérios do ACR 1990, de 18 a 65 anos, com características sociodemográficas semelhantes. 100 pacientes de controle serão levados. Quanto aos critérios de inclusão dos pacientes; Ter entre 18 e 60 anos de idade, ter diagnóstico de SFM primária de acordo com os critérios diagnósticos do ACR 1990, aceitar participar do estudo, ausência de qualquer doença hormonal sexual. O grupo controle será composto por voluntários com características semelhantes de idade e gênero. Os voluntários incluídos no grupo de controle não terão hormônio sexual. Os participantes serão informados sobre o assunto antes de serem incluídos no estudo e as autorizações necessárias serão obtidas.

O formulário semiestruturado de informações sociodemográficas elaborado por nós será utilizado de acordo com a experiência clínica e as informações obtidas nas fontes digitalizadas e os objetivos do estudo (ANEXO-1) Idade, sexo, escolaridade, estado civil, IMC, família história de doenças de fibromialgia e sintomas acompanhantes. Acompanhado dos sintomas; Serão questionados sintomas de DTM como cefaléia do tipo enxaqueca, dor e travamento da mandíbula, distúrbio do sono, boca seca, olhos secos, sintomas de intestino irritável, sintomas de pernas inquietas, inchaço dos tecidos moles, fadiga, sintomas depressivos ou histórico de depressão. Os pacientes com cefaléia serão avaliados por um neurologista quanto ao diagnóstico de enxaqueca. A avaliação da dor dos casos será feita pela Escala Visual Analógica (EVA). Para isso, será utilizada uma régua de 10 cm. Os pacientes serão avaliados uma vez e a quantidade apropriada de amostras de sangue será coletada dos pacientes após a avaliação.

Coleta de Amostras de Sangue: Amostras de sangue de 5 mL dos grupos de controle e pacientes serão coletadas em tubos de citrato estéreis. O sangue nos tubos será armazenado a -80°C até o isolamento do DNA.

Isolamento do DNA genômico: O DNA genômico será isolado do sangue usando um kit de isolamento de DNA. A pureza do DNA será determinada por método espectrofotométrico.

Genotipagem: A genotipagem dos polimorfismos ESR-1 325 C> G e 594 G> A no grupo de estudo será realizada usando kit de análise de polimorfismo de nucleotídeo único e sondas de hidrólise de corante duplo específicas de sequência e análise de segregação alélica em cadeia de polimerase em tempo real reação (RT-PCR) usando primers. A genotipagem de cada paciente e controle será repetida 3 vezes para garantir a confiabilidade dos resultados da análise.

Métodos estatísticos: O número de indivíduos a serem incluídos no estudo foi determinado por Análise de Poder Estatístico. Neste estudo, quando α = 0,05, β = 0,10, 1- β = 0,90, optou-se por levar 100 indivíduos para cada grupo de pacientes e controle, e a força do teste encontrada foi p = 0,9072. Todos os dados obtidos no estudo serão avaliados com o programa SPSS 18. O teste do χ2 e os testes t de Student e Mann-Whitney serão utilizados para avaliar a adequação das variáveis ​​nominais e contínuas.