Frequenza del polimorfismo del gene del recettore dell'estrogeno 1 nella sindrome fibromialgica

Obiettivo: Il fatto che la fibromialgia e l'emicrania siano più comuni nelle donne in età riproduttiva e la loro incidenza sia più alta rispetto ad altre popolazioni suggerisce che queste tre malattie possano avere una base genetica comune. Pertanto, abbiamo mirato a indagare se esiste una relazione tra i polimorfismi ESR-1 594G> A (rs2228480), ESR-1 325C> G (rs2295190) e la malattia fibromialgica.

Introduzione: sindrome fibromialgica (FMS), dolore corporeo diffuso, malattia muscoloscheletrica cronica con aumento della fatica e dolorabilità e disturbi del sonno in specifiche regioni anatomiche. La diagnosi di FMS si basa sui criteri di classificazione del 1990 dell'American College of Rheumatology (ACR). La FM colpisce frequentemente le donne tra i 30 ei 50 anni e la sua prevalenza è compresa tra l'1% e il 4% dell'intera popolazione, 0-4% negli uomini e 2,5-10,5% nelle donne. I ricercatori hanno scoperto che la forte tendenza familiare nella FM ha un rischio di sviluppare FM nei parenti di primo grado di pazienti con FM, 8 volte di più rispetto alla popolazione generale. I familiari dei pazienti con FM sono più suscettibili al dolore e hanno maggiori probabilità di sviluppare condizioni come la sindrome dell'intestino irritabile (IBS), il disturbo temporomandibolare (TMD), l'emicrania, la sindrome delle gambe senza riposo e altre sindromi dolorose regionali. Sono stati condotti diversi studi per dimostrare il polimorfismo genetico specifico nella FM. Ad oggi, i polimorfismi nei geni del recettore della serotonina, del trasportatore della serotonina, del recettore della dopamina D4 e della catecol-O-metiltransferasi sono risultati elevati. Tutti questi polimorfismi identificati sono responsabili del metabolismo e del trasporto delle monoammine; Questi sono composti che svolgono un ruolo fondamentale nella risposta umana allo stress.

L'occorrenza più frequente di FMS nelle donne si osserva nei giovani adulti, indicando l'effetto degli ormoni sessuali sulla fisiopatologia di questa condizione. Tuttavia, il meccanismo d'azione di questi effetti ormonali è ancora sconosciuto ed è oggetto di dibattito. Gli ormoni steroidei, in particolare gli estrogeni, influenzano i recettori del sistema nervoso centrale e periferico (SNC) (Recettore degli estrogeni-1; Recettore degli estrogeni-a [Era] e Recettore degli estrogeni-2; Recettore degli estrogeni-b [ERb]), il processo infiammatorio e la trasmissione del dolore centrale. Ad esempio, gli estrogeni possono influenzare direttamente monociti e macrofagi per regolare la produzione di citochine (p. es., interleuchina-1 [IL-1], IL-6 e fattore di necrosi tumorale-a [TNF-a]).

L'emicrania è un disturbo neurologico caratterizzato da episodi di dolore emicranico caratterizzato da attacchi. prevalenza di un anno di emicrania nella popolazione generale in Turchia 16,4%, mentre la percentuale di pazienti con FM era significativamente inferiore (9). L'incidenza del mal di testa è aumentata nei pazienti con sindrome fibromialgica. Emicrania e cefalea non emicranica sono state riportate in pazienti con FM tra il 28% e il 58% . Allo stesso modo, in uno studio condotto su 33 pazienti affetti da FM, l'emicrania in corso era presente al 45% e la storia di emicrania nel corso della vita era del 55%. È stato riportato che la prevalenza dell'emicrania è di circa 2 volte (periodo riproduttivo) e la gravità degli attacchi di emicrania nelle donne rispetto agli uomini. Studi che indagano la relazione tra livelli di ormoni sessuali e polimorfismi dovuti a stati riproduttivi più frequenti hanno dimostrato che sono associati a polimorfismi del recettore alfa degli estrogeni (ERa 594G> A (rs2228480), ERa 325C> G (rs2295190).

Metodi: Costituzione di gruppi di studio: 100 pazienti con diagnosi di sindrome fibromialgica secondo i criteri dell'ACR 1990, di età compresa tra 18 e 65 anni e con caratteristiche sociodemografiche simili. Verranno prelevati 100 pazienti di controllo. Come criteri di inclusione per i pazienti; Avere un'età compresa tra i 18 ei 60 anni, ricevere la diagnosi di FMS primaria secondo i criteri diagnostici ACR 1990, accettare di partecipare allo studio, assenza di qualsiasi malattia ormonale sessuale. Il gruppo di controllo sarà composto da volontari con caratteristiche di età e sesso simili. I volontari inseriti nel gruppo di controllo non avranno ormoni sessuali. I partecipanti saranno informati sull'argomento prima di essere inseriti nello studio e verranno presi i permessi necessari.

Il modulo informativo sociodemografico semi-strutturato da noi preparato verrà utilizzato in conformità con l'esperienza clinica e le informazioni ottenute dalle fonti scansionate e gli obiettivi dello studio (ALLEGATO-1) Età, sesso, livello di istruzione, stato civile, indice di massa corporea, famiglia storia di malattie fibromialgiche e sintomi di accompagnamento. Accompagnato dai sintomi; Saranno messi in discussione i sintomi TMD come mal di testa di tipo emicranico, dolore e blocco della mascella, disturbi del sonno, secchezza delle fauci, secchezza oculare, sintomi dell'intestino irritabile, sintomi delle gambe senza riposo, gonfiore dei tessuti molli, affaticamento, sintomi depressivi o storia della depressione. I pazienti con mal di testa saranno valutati da un neurologo in termini di diagnosi di emicrania. La valutazione del dolore dei casi sarà effettuata mediante Visual Analog Scale (VAS). Per questo verrà utilizzato un righello da 10 cm. I pazienti verranno valutati una volta e la quantità appropriata di campioni di sangue verrà raccolta dai pazienti dopo la valutazione.

Raccolta di campioni di sangue: 5 mL di campioni di sangue dai gruppi di controllo e di pazienti verranno prelevati in provette sterili con citrato. Il sangue nelle provette verrà conservato a -80°C fino all'isolamento del DNA.

Isolamento del DNA genomico: Il DNA genomico sarà isolato dal sangue utilizzando un kit di isolamento del DNA. La purezza del DNA sarà determinata mediante metodo spettrofotometrico.

Genotipizzazione: la genotipizzazione dei polimorfismi ESR-1 325 C> G e 594 G> A nel gruppo di studio verrà eseguita utilizzando un kit di analisi del polimorfismo a singolo nucleotide e sonde di idrolisi a doppio colorante specifiche per sequenza e analisi di segregazione allelica nella catena della polimerasi in tempo reale reazione (RT-PCR) utilizzando primer. La genotipizzazione di ogni paziente e controllo sarà ripetuta 3 volte per garantire l'affidabilità dei risultati dell'analisi.

Metodi statistici: il numero di individui da includere nello studio è stato determinato mediante Statistical Power Analysis. In questo studio, quando α = 0,05, β = 0,10, 1- β = 0,90, si è deciso di prendere 100 individui per ciascun gruppo di pazienti e di controllo, e la forza del test è risultata essere p = 0,9072. Tutti i dati ottenuti dallo studio saranno valutati con il programma SPSS 18. Il test χ2 ei test Student-t e Mann-Whitney saranno utilizzati per valutare l'adeguatezza delle variabili nominali e continue.