Timisnar – dílčí studie biomarkerů (Timisnar-mirna) (TiMiSNAR-miRNA)

Neoadjuvantní chemoradioterapie (nCHT) následovaná chirurgickým zákrokem je základní léčbou lokálně pokročilého karcinomu rekta, což vede k významnému zmenšení velikosti nádoru (downsizing) a posunu k časnějšímu stádiu onemocnění v primárním nádoru a lymfatických uzlinách (downstaging). Rozsáhlé histopatologické vyšetření vzorku tumoru po operaci včetně gradingu regrese tumoru (TRG) a stavu lymfatických uzlin (ypN) pomohlo retrospektivně vizualizovat individuální citlivost tumoru na CRT. Vzhledem k tomu, že odpověď na nCHT je heterogenní, jsou však nutné platné biomarkery ke sledování odpovědi nádoru. Relevantní počet studií se zaměřil na identifikaci molekulárních markerů získaných z nádorové tkáně, zatímco relevance biomarkerů na bázi krve je hodnocena méně přísně.

Vzorky krve, tzn. Tekutá biopsie však nabízí několik výhod:

1. Odběr vzorků krve je méně invazivní, levnější, snadno se naplánuje a téměř bez závažných komplikací.
2. Krevní vzorky jsou zdrojem čerstvé DNA a RNA, bez úprav díky konzervačním látkám; zvláště v případě rakoviny rekta, kromě intratumorální heterogenity, jsou biopsie nádoru obecně doprovázeny normální, adenomatózní nebo stromální tkání. Tato kontaminace může ovlivnit výsledky molekulárních analýz
3. Vyšetřování krve od pacientů může vysvětlit molekulární heterogenitu a nahradit nádorovou zátěž, protože fragmenty nebo biomarkery odvozené z nádoru jsou shromažďovány ze všech nádorových buněk v těle pacienta prostřednictvím oběhu.
4. Tekutá biopsie může nabídnout jak možnost dynamického monitorování během léčby, tak možnost hodnocení aktivity onemocnění i po patologické kompletní odpovědi (pCR) nebo po resekci nádoru, kdy již není ponechána žádná tkáň pro molekulární analýzy.

V klinické praxi je dosud karcinoembryonální antigen (CEA) stanoven jako nádorový marker související s kolorektálním karcinomem (CRC), ale nedoporučuje se jako screeningový test na kolorektální karcinom. Za prvé, normální hladiny CEA nevylučují možnost kolorektálního karcinomu. Za druhé, zvýšená CEA není kategoricky spojena s CRC nebo v období sledování s progresí onemocnění. Cirkulující nádorová DNA (ctDNA) dnes představuje hlavní přístup ke sledování nádorové zátěže a rezistence na terapii, k hodnocení přítomnosti reziduálního onemocnění po potenciálně kurativní léčbě a ke sledování recidivy onemocnění s vysokou senzitivitou a specificitou.

Jako potenciální alternativa k CEA a ctDNA jsou v současné době zkoumány mikroRNA (miRNA), které mají sloužit jako biomarkery založené na krvi. miRNA jsou malé nekódující RNA, které regulují genovou expresi post-transkripční vazbou mRNA, což podporuje destabilizaci cílových miRNA. Cílová specifičnost miRNA je do značné míry předurčena jejich tzv. „seed-sekvencí“ (obsahující nukleotidy na pozici 2-7 miRNA). Jsou mezi druhy vysoce konzervované, stabilní a snadno detekovatelné i v malých koncentracích. Byly široce analyzovány ve fyziologických a patologických procesech a jejich exprese je tkáňově specifická.

Dosud nebyl proveden žádný screeningový přístup k identifikaci relevantních miRNA jako biomarkerů v krvi pacientů s rakovinou konečníku.