Vliv DNMT SNP na methylaci DNA v primární ITP

Imunitní trombocytopenie (ITP) je imunitně zprostředkované získané onemocnění dospělých a dětí charakterizované přechodným nebo přetrvávajícím poklesem počtu krevních destiček a v závislosti na stupni trombocytopenie zvýšeným rizikem krvácení (Rodeghiero et al., 2009). Mezinárodní směrnice definují trombocytopenii jako počet krevních destiček v periferní krvi nižší než 100 000/ul (Raj, 2017). Hodnoty počtu krevních destiček mezi 100 000/ul a 150 000/ul se často nacházejí u zdánlivě zdravých lidí (Adibi et al., 2007) a tento práh snižuje obavy z mírné „fyziologické“ trombocytopenie spojené s těhotenstvím (Neunert et al., 2011).

Imunitní trombocytopenie může být primární nebo sekundární. Primární ITP je diagnóza vyloučení. Sekundární ITP se vyskytuje v důsledku základního onemocnění/stavu. Mezi příčiny sekundární ITP patří infekce (CMV, Helicobacter pylori, HCV, HIV, Varicella zoster), systémový lupus erythematodes, antifosfolipidový syndrom, léky indukované, lymfoproliferativní poruchy, po transplantaci kostní dřeně a po očkování (Neunert et al., 2011). .

Primární ITP je získané autoimunitní onemocnění způsobující jak zvýšenou destrukci krevních destiček, tak jejich nedostatečnou produkci. K tomu by mohl přispět více než jeden mechanismus, včetně autoreaktivních B lymfocytů, polarizace Th1/Tc1, lýzy krevních destiček zprostředkované T-buňkami a abnormálních cirkulujících buněk Treg. Také metylace DNA se může podílet na patofyziologii ITP (Semple et al., 2010, Wang et al., 2011).

Metylace DNA je dědičný, stabilní a také reverzibilní způsob modifikace DNA; může regulovat genovou expresi bez změny nukleotidových sekvencí (Huiyuan et al., 2013). Methylace DNA je zprostředkována DNA methyltransferázami (DNMT). Ve skupině DNMT je pět členů včetně DNMT3A a DNMT3B (Okano et al., 1999). DNMT3A a DNMT3B katalyzují de novo metylaci a jsou důležité při vytváření vzorců metylace DNA v embryu a během vývoje plodu (Sawalha, 2008).

Stav metylace DNA se podílí na regulaci imunitní odpovědi, ztráta metylačního vzoru v imunitních buňkách bude mít za následek autoimunitní onemocnění indukcí aberantní genové exprese. ITP je autoimunitní onemocnění s mnoha imunitními deficity s abnormální metylací DNA zapojenou do etiologie onemocnění (Huiyuan et al., 2013). Chen et al., 2011 došli k závěru, že aberantní metylace DNA se může podílet na patogenezi ITP kvantifikací koncentrace methylcytosinu v genomové DNA. Našli hypometylační vzorec v CD4 T buňkách pacientů s ITP.

DNMT3A a DNMT3B DNA methyltransferázy jsou kódovány různými geny na odlišných chromozomech (Sawalha, 2008). V genu DNMT3A existuje mnoho jednonukleotidových polymorfismů (SNP), které mohou ovlivnit katalytickou aktivitu enzymu DNMT3A, včetně -448G/A SNP (Zhao et al., 2012). V genu DNMT3B bylo identifikováno 21 polymorfismů včetně -149 C/T SNP a -579 G/T SNP (Zhang et al., 2015).

V předchozí studii v Assiut University Hospital (AbdelKader et al., 2018) byla alela DNMT3A -448 G/A SNP varianty A významně spojena se sníženým rizikem primární ITP, zatímco DNMT3B -149C/T SNP varianta T- alely byl významně spojen s téměř dvojnásobným zvýšením rizika primární ITP. Základní mechanismus této asociace však nebyl zkoumán. Pro pochopení této asociace autoři doporučili studovat expresi mRNA genů DNMT, enzymatickou aktivitu DNA metyltransferáz, kvantifikaci globální metylované DNA a/nebo metylační stav metylačně citlivých genů zapojených do primární patogeneze ITP.