Receptory komplementu C5a u Hidradenitis suppurativa

Hidradenitis suppurativa je vysilující chronické zánětlivé folikulární kožní onemocnění. Odhadovaná prevalence HS se pohybuje mezi 1 a 4 %, i když se donedávna jednalo o poddiagnostikované onemocnění (Revuz J, 2009). V akutním stadiu se u pacientů objevují bolestivé zanícené uzliny (vředy) a abscesy v tříslech, hýždích a podpaží. V pozdní fázi dochází k tvorbě sinusového traktu a zjizvení. Možnosti léčby zahrnují antibiotika, anti-TNF a chirurgické metody (široké excize a deroofing). Většina pacientů však na léčbu nereaguje nebo na léčbu reaguje pouze částečně nebo dočasně (von der Werth JM, 2001; Napolitano M, 2017; Nazary M, 2011; van der Zee HH, 2012).

Patogeneze HS je z velké části neznámá a možné příčiny zahrnují ucpanou apokrinní žlázu nebo vlasový folikul, nadměrné pocení, androgenní dysfunkci a genetické poruchy. Defektní cytokinové reakce a infiltrace různých imunitních buněk naznačují autoinflamatorní povahu onemocnění (Giamarellos-Bourboulis EJ, 2007; van der Zee HH; 2011; van der Zee HH, 2012), což je v souladu s významným zlepšením pozorované u pacientů, kterým byl podáván blokátor tumor nekrotizujícího faktoru-a (TNF-a) adalimumab (Kimball AB, 2016). Neutrofily byly identifikovány v kožních lézích a jsou považovány za hlavní typ buněk produkujících hnis. Komplement C5a je hlavním chemotaktickým faktorem, který stimuluje infiltraci neutrofilů. Role C5a se v HS začala zkoumat teprve nedávno. (Blok JL, 2016; Kanni T, 2018). Otevřená studie fáze 2 prokázala, že 50% klinické odpovědi HS bylo dosaženo až u 83 % pacientů užívajících protilátku C5a (IFX-1, NCT 03001622). Cílení na C5a signalizaci tedy může představovat slibnou terapeutickou strategii u HS.

Většina účinků C5a vyplývá z vazby na kanonický receptor 5a komplementu 1, C5aR. Existuje však druhý receptor C5a, C5L2, jehož role jsou stále kontroverzní. Pro C5L2 byly navrženy prozánětlivé i protizánětlivé vlastnosti. Tyto protichůdné výsledky mohou být závislé na konkrétních fyziologických nebo patologických stavech (Zhang T, 2017). ChemoCentryx má řadu účinných a selektivních malomolekulárních inhibitorů C5aR (C5aRi), které jsou vyvíjeny pro zánětlivá onemocnění, jako je vaskulitida spojená s ANCA, glomerulopatie C3 a HS. V tomto návrhu použijeme tyto C5aRi ke zkoumání rozdílných účinků cílení na C5aR.

Studovat design

Ex vivo systém kultivace kůže bude použit ke zkoumání účinků inhibice C5aR na aktivaci neutrofilů/zánětlivé aktivity. Čtyřmilimetrové (4mm) lézní a perilezionální kožní biopsie budou odebrány z kožních excizí 40 pacientů se známou Hidradenitis Suppurativa. Bude použit přebytečný kožní excizní materiál z "deroofment" léčby pacientů s HS. Pro srovnání budou odebírány biopsie peri-lézí a lézí. Tyto vzorky budou dodány do ChemoCentryx k přímé analýze nebo ošetření inhibitory C5a a/nebo C5a. Analýza bude zahrnovat, aniž by byl výčet omezující, histologickou analýzu, zkoumání populací imunitních buněk a povrchových markerů, hladiny proteinové a genové exprese faktorů komplementu, cytokinů a chemokinů. Pro tyto analýzy bude použita průtoková cytometrie, imunohistochemie, ELISA a další standardní testy. Tyto studie rozšíří probíhající studie s Dr. Kavitou a kolegy a ověří hypotézu, že pokračující aktivace neutrofilů a dalších leukocytů exprimujících C5a v kožních lézích pacientů s HS přispívá k poškození tkáně.

Plánujeme odběr vzorků plazmy od 40 pacientů s HS s aktivním onemocněním. Veškerý odběr vzorků bude probíhat podle přesně definovaného protokolu s maximálně 30 ml odebrané krve. Vzorky budou okamžitě převezeny do ChemoCentryxu ke zpracování. Budou zkoumány populace imunitních buněk, hladiny exprese C5aR a dalších souvisejících faktorů, reakce na ex vivo stimulace a další charakteristiky krevních buněk. Plazma a sérum budou odebrány a analyzovány na hladiny faktorů komplementu, cytokinů a chemokinů. Vzorky plazmy budou také použity ke stimulaci imunitních buněk purifikovaných od zdravých dárců. Inhibitory C5a a C5aR budou použity ke stanovení role C5aR v těchto in vitro testech.

Účastníci obdrží souhlas a zapíší se na jednu úvodní studijní návštěvu s odběrem krve a/nebo kožní tkáně. Dokončení této návštěvy bude považováno za ukončení účasti jednotlivce ve studii. Účastníci však mohou na základě uvážení hlavního zkoušejícího získat souhlas a opětovně se zapsat na budoucí studijní návštěvu s odběrem krve a/nebo kožní tkáně. Znovu zapsaní účastníci si ponechají svůj původní kód studie a odebrané vzorky budou označeny datem a číslem návštěvy.