Požadavky na methionin během zdravého lidského těhotenství

Protokol dne před studiem:

Účastníci budou požádáni, aby se sešli za účelem krátkého (1 hodinového) hodnocení před studiem v rámci přípravy na studijní den. Během této doby bude posouzena způsobilost účastníků. Subjekty dorazí do oddělení klinického výzkumu a hodnocení (CREU) Výzkumného ústavu dětské nemocnice v Britské Kolumbii s půstem přes noc (alespoň 8 hodin od posledního kalorického příjmu; žádné ranní cvičení a asistovaný transport, aby se minimalizoval stres). Formulář souhlasu bude důkladně vysvětlen a subjekt bude instruován, aby se zastavil a položil otázky kdykoli, kdy je zmatený nebo nepohodlný. Pokud budou účastníci ochotni se zúčastnit, bude získán ústní souhlas a podpis. V tento den účastníci vyplní dotazník a provedou se následující měření: výška (Harpenden Stadiometer; Holtain Limited, UK) a hmotnost (elektrická váha; HealthOMeter Professional, Sunbeam Products, Inc.), analýza bioelektrické impedance (BIA ; Q4 Bioimpedance Analyzer, RJL Systems, MI), kožní řasa na 3 místech (Harpenden Calipers; Baty International, UK), glykémie (One Touch Ultra, LifeScan, Inc.) a klidový energetický výdej (REE; Vmax Encore, Viasys, CA ). REE popisuje kalorický požadavek na vitální funkci v nepřítomnosti fyzické námahy. Tato hodnota bude použita k výpočtu celkového energetického obsahu experimentálních diet, aby bylo zajištěno, že budou splněny specifické kalorické potřeby každého účastníka. Glukóza bude stanovena na gestační diabetes mellitus (GDM; hladina glukózy v plazmě nalačno 5,3 mmol/l svědčí pro GDM). Skinfold a BIA měření budou shromažďována pro stanovení mateřského tuku a hmoty bez tuku.

Protokol studijního dne:

Zdravé těhotné ženy (20–40 let), které souhlasily a zúčastnily se dne před zahájením studie, budou studovány ve dvou fázích gestace (n=15/fáze) v rozsahu testovaného příjmu methioninu (v rozmezí 0–40 mg/kg /den). Na začátku a na konci dne bude proveden test moči měrkou. Každý den studie bude oddělen týdnem a bude dostávat jiný náhodný příjem methioninového testu. V den studie přijdou účastníci nalačno v přibližně 8 hodin ráno po dobu celkem osmi hodin. Dostanou osm hodinových jídel, což představuje 1/12 jejich vyvážené nutriční potřeby na den. Jídla se skládají z koktejlu s pomerančovou příchutí se složením vaječných bílkovin, vyváženým dostatečným množstvím sacharidů a lipidů. S testovacím jídlem bude poskytnuta stopovací aminokyselina (L-[1-13C] fenylalanin) k posouzení oxidace stopovače na 13CO2 (13C-oxid uhličitý) v dechu v reakci na testovanou/limitující aminokyselinu (methionin). Nepřímá kalorimetrie s otevřeným okruhem bude prováděna, dokud nebude získáno 5 datových bodů v ustáleném stavu pro měření VCO2 (výstup oxidu uhličitého; Vmax Encore, Viasys, CA). Tato technika, nazývaná metoda oxidace indikátorových aminokyselin, je nový, neinvazivní a zcela bezpečný přístup zejména v těhotenství.

Během 8hodinové studie budou odebírány biologické vzorky (dech, moč, krev) a analyzovány na obsah 13CO2 a metabolity aminokyselin síry.