Requerimientos de metionina durante el embarazo humano saludable

Protocolo previo al día de estudio:

Se les pedirá a los participantes que se reúnan para una breve evaluación previa al estudio (1 hora) en preparación para el día del estudio. La elegibilidad de los participantes se evaluará durante este tiempo. Los sujetos llegarán a la Unidad de Evaluación e Investigación Clínica (CREU) del Instituto de Investigación del Hospital Infantil de la Columbia Británica habiendo ayunado durante la noche (al menos 8 horas desde la última ingesta calórica; sin ejercicio matutino y transporte asistido para minimizar el estrés). Se explicará minuciosamente el formulario de consentimiento y se indicará al sujeto que se detenga y haga preguntas en cualquier punto en el que se sienta confuso o incómodo. Si los participantes están dispuestos a participar, se obtendrá el consentimiento verbal y una firma. En este día, los participantes completarán un cuestionario y se tomarán las siguientes medidas: altura (estadiómetro de Harpenden; Holtain Limited, Reino Unido) y peso (balanza eléctrica; HealthOMeter Professional, Sunbeam Products, Inc.), análisis de impedancia bioeléctrica (BIA ; Q4 Bioimpedance Analyzer, RJL Systems, MI), pliegue cutáneo en 3 sitios (Harpenden Calipers; Baty International, Reino Unido), glucosa en sangre (One Touch Ultra, LifeScan, Inc.) y gasto de energía en reposo (REE; Vmax Encore, Viasys, CA ). La REE describe el requerimiento calórico para la función vital en ausencia de esfuerzo físico. Este valor se utilizará para calcular el contenido total de energía de las dietas experimentales para garantizar que se satisfagan las necesidades calóricas específicas de cada participante. Se evaluará la glucosa en sangre para detectar diabetes mellitus gestacional (DMG; nivel de glucosa en plasma en ayunas de 5,3 mmol/l indicativo de DMG). Se tomarán medidas de pliegues cutáneos y BIA para determinar la grasa materna y la masa libre de grasa.

Protocolo del día de estudio:

Se estudiarán mujeres embarazadas sanas (20-40 años) que hayan dado su consentimiento y hayan participado en el día previo al estudio en dos etapas de gestación (n=15/etapa) en un rango de ingestas de metionina de prueba (que van desde 0-40 mg/kg /día). Al principio y al final del día se realizará una prueba de orina con tira reactiva. Cada día de estudio estará separado por una semana y recibirá una ingesta de prueba de metionina aleatoria diferente. El día del estudio, los participantes ingresarán en ayunas a las ~8 am por un total de ocho horas. Recibirán ocho comidas por hora, que representan 1/12 de su necesidad nutricional balanceada para el día. Las comidas consisten en un batido sabor naranja con composición de proteína de huevo, equilibrado con suficientes hidratos de carbono y lípidos. Se proporcionará un aminoácido marcador (L-[1-13C] fenilalanina) con las comidas de prueba para evaluar la oxidación del marcador a 13CO2 (dióxido de carbono 13C) en el aliento en respuesta al aminoácido de prueba/limitante (metionina). Se realizará calorimetría indirecta de circuito abierto hasta que se obtengan 5 puntos de datos de estado estable para la medición de VCO2 (salida de dióxido de carbono; Vmax Encore, Viasys, CA). Esta técnica, denominada método de oxidación de aminoácidos indicadores, es un enfoque novedoso, no invasivo y completamente seguro, especialmente durante el embarazo.

A lo largo del período de estudio de 8 horas, se recolectarán muestras biológicas (aliento, orina, sangre) y se analizarán para determinar el contenido de 13CO2 y los metabolitos de aminoácidos azufrados.