Protokol hodnocení zařízení pro měření spermií

Karcinom prostaty (PC) je celosvětově vysoce rozšířený a v současnosti je 3. nejčastěji diagnostikovaným karcinomem prostaty v hongkongské mužské populaci s více než 2000 novými případy diagnostikovanými ročně. V závislosti na klinickém stagingu a také stavu pacienta mohou být pacientům nabídnuty různé způsoby léčby, včetně kurativní chirurgie nebo radioterapie, paliativní androgenní deprivační terapie, která bude mít dobrou odezvu. V současnosti však existuje pouze jeden biologický marker, PSA, pro sledování postupu onemocnění a odpovědi na léčbu. Zatímco testování PSA poskytlo rozumné posouzení stavu a progrese onemocnění, je to invazivní krevní test a pro některé pacienty možná méně pohodlný. Proto existuje potřeba prozkoumat novější markery pro monitorování léčebné odpovědi a je zapotřebí progrese onemocnění.

Jedním příkladem takových rakovinných biomarkerů jsou přírodní polyaminy. Zájem o tyto analyty začal v roce 1971, kdy Russell oznámil značný nárůst polyaminů v moči, jako je putrescin (Put), spermidin (Spd) a spermin (Spm) u pacientů s různými typy solidních nádorů a leukémií. Poté pokračovaly polyaminové studie zaměřené na specifické druhy rakoviny, jako je rakovina děložního čípku, kolorektální rakovina a rakovina prsu atd.

V naší nedávné studii jsme zkoumali potenciální roli polyaminů v moči jako biomarkerů rakoviny prostaty. Do studie byli zařazeni pacienti s rakovinou prostaty (PCa), pacienti s benigní hyperplazií prostaty (BPH) a zdravé kontroly (HC) vykazující PSA > 4,0 ng/ml. Byly získány vzorky jejich moči a hladiny Put, Spd, Spm v moči byly stanoveny ultra vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií spojenou s trojitým kvadrupólovým hmotnostním spektrometrem (UPLC-MS/MS). K vyhodnocení jejich diagnostické přesnosti byla použita křivka provozních charakteristik přijímače (ROC) a Studentův t-test. Mezi třemi biogenními polyaminy prokázal Spm dobrou diagnostickou výkonnost při srovnání jejich hladin u pacientů s PCa a pacientů s BPH (1,47 u PCa vs 5,87 u BPH; p<0,0001). Výsledky byly v souladu s výsledky transrektální ultrazvukové biopsie prostaty (TRUSPB) s hodnotou plochy pod křivkou (AUC) 0,83±0,03. Urinární Spm by tedy mohl mít potenciál sloužit jako nový diagnostický biomarker PCa, což by zase mohlo pomoci vyřešit problém omezené citlivosti a specificity testu PSA v séru. V naší další práci jsme potvrdili, že spermin je dobrým markerem pro detekci rakoviny prostaty a také prokázal dobrou korelaci s gradingem rakoviny.

Současné měření sperminu však vyžadovalo použití kapalinové chromatografie (LCM) v laboratoři, což by mohlo omezit jeho klinické použití. Proto byl navržen jednoduchý přístroj na měření sperminů (SMD) pro snadnější každodenní použití, jako je jednoduchý screening rakoviny a také kombinované hodnocení s hladinou PSA v séru. SMD je jednoduché zařízení s automatickým odsáváním moči a také hodnocením hladiny spermií. Nejprve se čerstvě odebere asi 30 cc moči připraveným sběrným zařízením. Poté bude kryt SMD odstraněn a aspirační hrot zařízení bude ponořen do vzorku moči. Po pevném přitlačení na zařízení se do SMD odsaje malý vzorek moči. Zařízení poté automaticky vyhodnotí hladinu sperminu v moči. Výsledek bude poté odečten v okénku indikátoru asi po 5 minutách. Pokud byla hladina pod předem nastavenou mezní hodnotou, tj. naznačovala zvýšené riziko rakoviny prostaty, okénko indikátoru se změní na červenou barvu.

Pokud je však hladina sperminu vyšší než mezní hodnota, tj. nízké riziko rakoviny, okénko indikátoru zmodrá. Souprava však nebyla validována v klinickém vzorku moči. Proto bychom rádi provedli vyhodnocení přesnosti této SMD pomocí laboratorně naměřené hladiny sperminu pomocí LCM a také patologického výsledku z biopsie prostaty.