Srdeční biomarkery u preeklampsie: Predikce onemocnění a riziko budoucích kardiovaskulárních příhod u přeživších (PreeclampBIO)

Preeklampsie je onemocnění, které je silně spojeno s rizikem mrtvice a dalších kardiovaskulárních onemocnění. Toto je stav s větší prevalencí v zemích světa s nízkými a středními příjmy, zejména v subsaharské Africe, kde je nemocnost a úmrtnost údajně vyšší. Očekává se větší počet přeživších s rostoucími globálními zisky ve snižování mateřské úmrtnosti spojené s preeklampsií. Tato kardiovaskulární onemocnění ischemie myokardu, infarkt myokardu a mrtvice jsou hlavními příčinami náhlé smrti, protože prekurzorové stavy; ateroskleróza a hypertenze jsou většinou asymptomatické. Pro tyto stavy existují zavedené biomarkery, které lze použít jako screeningové nástroje. Nízká vytíženost rutinní zdravotní péče a asymptomatická povaha těchto příhod zvyšují riziko náhlé předčasné smrti na tyto stavy. Postnatální období nabízí dobrou příležitost pro screening těchto příhod s cílem odhalit rizikové ženy a nabídnout včasnou preventivní péči.

Preeklampsie je v podstatě onemocnění trofoblastu, bylo také prokázáno, že souvisí s oxidačním stresem, fenoménem, ​​který zvyšuje hladinu peroxidace LDL cholesterolu, což vede k jeho zvýšenému vychytávání makrofágy, což má za následek tvorbu pěnových buněk a aterosklerózu. Preeklampsie je také spojena se zánětlivými změnami, které mění vaskulární integritu – účinek, který může přetrvávat i po těhotenství, což vede k ateroskleróze, která predisponuje k ischemii myokardu, infarktu myokardu a mrtvici.

Tyto změny ve vaskulatuře jsou asymptomatické a pokud není včas odhalena hypertenze a není zahájena vazoprotektivní nebo antitrombotická léčba, může dojít k náhlé smrti v důsledku cévní mozkové příhody nebo akutního infarktu myokardu.

Hypertenzní srdeční onemocnění se týká srdečních onemocnění, která jsou důsledkem účinku hypertenze. Srdce v tomto případě nyní pracuje pod vyšším tlakem, což má za následek hypertrofii srdečního svalu, ztluštění srdeční arteriální vaskulatury (vedoucí k onemocnění koronárních tepen) a zvýšené riziko ischemie myokardu a infarktu. Výsledná dysfunkce srdečního svalu vede ke zvýšení hladin prozánětlivých cytokinů, které lze detekovat v krevním řečišti a jejichž hladiny mohou korelovat s přítomností a závažností chorobného stavu. Hypertenze má podobné účinky na mozkové vaskulatury, kde může způsobit rupturu cévy s následkem život ohrožujícího intrakraniálního krvácení. Cévy pod vlivem dlouhodobé hypertenze mohou podléhat hypertrofii vedoucí ke ztluštění cévní stěny se zúžením průsvitu a následně k mozkové ischemii, infarktu a cévní mozkové příhodě.

Dochází k významnému snížení rizika smrtelné a nefatální cévní mozkové příhody, pokud je hypertenze zjištěna včas a účinně kontrolována pomocí antihypertenziv. Ukázalo se, že tato preventivní strategie je výhodnější, když je zahájena v mladším věku a zejména u žen černé rasy, které jsou vystaveny vyššímu riziku a měly by větší prospěch.

U obecné dospělé populace bylo prokázáno, že lipidy a srdeční biomarkery předpovídají výskyt těchto kardiovaskulárních příhod. Tyto biomarkery zahrnují: vysoce citlivý C-reaktivní protein (hsCRP), apolipoproteiny (LDL, Apo B-100, Apo A1), lipoprotein a (Lp(a), oxidovaný LDL, fosfolipáza spojená s lipoproteinem (A2-LpPLA2), sfingosin- 1-fosfát (Sph-1-P), malý denzní lipoprotein s nízkou hustotou (sdLDL) a myeloperoxidáza (MPO). Nedávný systematický přehled markerů primárních kardiovaskulárních příhod odhalil, že z hlediska korelace s rozvojem kardiovaskulárního onemocnění; C-reaktivní protein, fibrinogen, cholesterol, apolipoprotein B, poměr apolipoprotein A/apolipoprotein B, lipoprotein s vysokou hustotou a vitamin D byly užitečné při predikci kardiovaskulárního onemocnění, zatímco u primární mrtvice; fibrinogen a sérová kyselina močová byly silnými markery.

Tato studie se proto zaměřila na stanovení rizika budoucího kardiovaskulárního onemocnění a příhod u přeživších preeklampsie pomocí těchto zavedených biomarkerů ve spojení s testováním genových markerů.

Účastníci by zahrnovali všechny po sobě jdoucí účastníky, kteří splňují kritéria pro zařazení pro každou skupinu studie během 12měsíčního období na všech pracovištích. Byli by poučeni o studii a získali by od nich nebo od příbuzných informovaný souhlas (pokud to pacient není schopen). Od všech účastníků by byl získán 10ml vzorek žilní krve a suchá krevní skvrna na filtračním papíru (lékaři ze všech zúčastněných pracovišť) pro stanovení srdečních, lipidových a genových markerů kardiovaskulárních onemocnění.

Na začátku studie by se pro všechny členy týmu z míst studie konala školení týkající se protokolu studie a monitorování, a to každých čtrnáct dní až do dokončení studie, aby byla zajištěna jednotnost.

Získané krevní vzorky by byly centrifugovány, aby se získala plazma a sérum na každém místě studie, které by pak byly transportovány v ledových obalech oddělení lékařské laboratorní vědy na Babcock University, Ilishan-Remo pro stanovení lipidových a srdečních biomarkerů během genetických studií (extrakce DNA a sekvenování) by se provádělo v Centru pokročilého lékařského výzkumu a biotechnologie (CAMRAB), laboratoři Babcock University Teaching Hospital, Ilishan-Remo. Všechny získané vzorky by byly kódovány tak, aby laboratorní vědec zaslepil identitu účastníků. Získané výsledky by pak byly přeneseny do předem označeného proforma, kde již byly vloženy další podrobnosti o každém účastníkovi, včetně biologických údajů a historie těhotenství. Údaje o účastnících zadané do proforma by se také vkládaly přímo do tabletů propojených s mobilní aplikací Redcap pro webhosting, které by byly později exportovány do SPSS k analýze. Se členy týmu ze všech studijních míst zapojených do studie by byl udržován 24hodinový telefonický kontakt prostřednictvím přímého telefonního hovoru a textových zpráv. Byla by vytvořena chatovací skupina Whatsapp, která by propojila všechny čtyři studijní weby pro snadný přenos informací. Se členy týmu ze všech studijních míst zapojených do studie by byl udržován 24hodinový telefonický kontakt.

Vzorky krve by se odebíraly do lithiových heparinových a obyčejných nádob bez antikoagulantu a okamžitě převážely v nádobě s ledem do laboratoře k analýze, kde by byly centrifugovány při 2 500 otáčkách za minutu po dobu 5 minut na všech místech před transportem obou dobře značených supernatantů séra v obyčejných lahvičkách a plazma v lahvičkách s lithiovým heparinem po dekantaci z nabitých červených krvinek na Babcock University. Alikvoty séra a plazmy by pak byly skladovány při -20ºC na Babcock University až do další analýzy. Kapka krevní skvrny získaná od každého účastníka by se nechala uschnout na vzduchu a poté bezpečně uložena v chladné a suché chladničce před transportem do CAMRAB, kde by byla udržována při -80 °C až do genové analýzy. Vzorky séra a plazmy, které se nepoužívají, by byly skladovány při -80˚C po dobu 5 let.

Měření krevního tlaku by prováděla vyškolená sestra na každém místě manuálně ovládaným rtuťovým sfygmomanometrem a tato měření by se odečítala v sedě. Korotkoffův zvuk V by byl ve všech případech považován za úroveň diastolického krevního tlaku. Krevní tlak by pak byl okamžitě zapsán do proformy studie pro každého účastníka.

Po vysvětlení postupu pomocí formuláře s informacemi o předmětu, získání souhlasu a vyplnění anamnézových segmentů proformy by bylo účastníkům před zahájením jakékoli intravenózní terapie odebráno 10 ml vzorků žilní krve. Tento vzorek by byl odebrán z kontralaterální horní končetiny pacientů, kteří jsou již na intravenózní infuzi. Venózní krev by byla odsáta z předloktní žíly účastníka a umístěna do vakuové zkumavky s lithiovým heparinem (5 ml) a obyčejné lahvičky bez antikoagulancií (5 ml). V době odběru krve by se kapka krve udělala na filtrační papír pro genetickou analýzu.

Všichni účastníci by tak byli sledováni až do konce šestinedělí; pozorování rozvoje preeklampsie u žen přijatých v první polovině těhotenství, u žen přijatých s preeklampsií v těhotenství by se sledovala korelace závažnosti preeklampsie s hladinami biomarkerů au žen přijatých po porodu by byly porovnány hladiny srdečních a genových markerů s těmi ženami, které měly normální těhotenství. Byl by získán telefonický kontakt účastníků a jejich nejbližších a oni nebo nejbližší příbuzní by byli kontaktováni v 1, 2, 5 a 10 letech pro rozvoj kardiovaskulárních příhod a opakovaných sérových hladin biomarkerů.