Biomarkery sercowe w stanie przedrzucawkowym: przewidywanie choroby i ryzyko przyszłych incydentów sercowo-naczyniowych u osób, które przeżyły (PreeclampBIO)

Stan przedrzucawkowy jest chorobą silnie powiązaną z ryzykiem udaru mózgu i innych chorób sercowo-naczyniowych. Jest to stan występujący częściej w krajach o niskich i średnich dochodach na świecie, zwłaszcza w Afryce Subsaharyjskiej, gdzie zachorowalność i śmiertelność są podobno wyższe. Oczekuje się większej liczby osób, które przeżyły, wraz z rosnącymi globalnymi korzyściami w redukcji śmiertelności matek związanej ze stanem przedrzucawkowym. Te choroby sercowo-naczyniowe niedokrwienie mięśnia sercowego, zawał mięśnia sercowego i udar są głównymi przyczynami nagłej śmierci, ponieważ warunki prekursorowe; miażdżyca i nadciśnienie są w większości bezobjawowe. Istnieją ustalone biomarkery dla tych stanów, które można wykorzystać jako narzędzia przesiewowe. Niskie wykorzystanie rutynowych badań lekarskich i bezobjawowy charakter tych zdarzeń zwiększają ryzyko nagłej przedwczesnej śmierci z powodu tych chorób. Okres poporodowy stwarza dobrą okazję do badań przesiewowych pod kątem tych zdarzeń w celu wykrycia kobiet z grupy ryzyka i zaoferowania wczesnej profilaktyki.

Stan przedrzucawkowy jest zasadniczo chorobą trofoblastu, wykazano również, że wiąże się ze stresem oksydacyjnym, zjawiskiem, które zwiększa poziom peroksydacji cholesterolu LDL, prowadząc do jego zwiększonego wychwytu przez makrofagi, co skutkuje powstawaniem komórek piankowatych i miażdżycą. Stan przedrzucawkowy jest również związany ze zmianami zapalnymi, które zmieniają integralność naczyń – efekt, który może utrzymywać się po ciąży, powodując miażdżycę, która predysponuje do niedokrwienia mięśnia sercowego, zawału mięśnia sercowego i udaru mózgu.

Te zmiany w układzie naczyniowym są bezobjawowe i jeśli nadciśnienie nie zostanie wcześnie wykryte i nie zostanie rozpoczęte leczenie wazoprotekcyjne lub przeciwzakrzepowe, może dojść do nagłej śmierci z powodu udaru mózgu lub ostrego zawału mięśnia sercowego.

Nadciśnieniowa choroba serca odnosi się do chorób serca, które wynikają z efektu nadciśnienia. Serce w tym przypadku pracuje teraz pod zwiększonym ciśnieniem, co skutkuje przerostem mięśnia sercowego, pogrubieniem naczyń tętniczych serca (prowadzącym do choroby wieńcowej) oraz zwiększonym ryzykiem niedokrwienia i zawału mięśnia sercowego. Wynikająca z tego dysfunkcja mięśnia sercowego prowadzi do wzrostu poziomu cytokin prozapalnych, które można wykryć w krwioobiegu i których poziom może korelować z obecnością i ciężkością stanu chorobowego. Nadciśnienie ma podobny wpływ na układ naczyniowy mózgu, gdzie może spowodować pęknięcie naczynia skutkujące zagrażającym życiu krwotokiem śródczaszkowym. Naczynia pod wpływem długotrwałego nadciśnienia tętniczego mogą ulegać przerostowi prowadzącemu do pogrubienia ściany naczynia ze zwężeniem światła, a następnie niedokrwieniem mózgu, zawałem i udarem mózgu.

Ryzyko udaru mózgu prowadzącego do zgonu i niezakończonego zgonem znacznie się zmniejsza, jeśli nadciśnienie zostanie wcześnie wykryte i skutecznie kontrolowane lekami hipotensyjnymi. Wykazano, że ta strategia zapobiegawcza jest bardziej korzystna, gdy rozpoczyna się ją w młodszym wieku, zwłaszcza u kobiet rasy czarnej, które są bardziej zagrożone i odniosłyby większe korzyści.

Wykazano, że w ogólnej populacji dorosłych lipidy i biomarkery sercowe pozwalają przewidywać występowanie tych zdarzeń sercowo-naczyniowych. Te biomarkery obejmują: białko C-reaktywne o wysokiej czułości (hsCRP), apolipoproteiny (LDL, Apo B-100, Apo A1), lipoproteinę a (Lp(a), utleniony LDL, fosfolipazę związaną z lipoproteinami (A2-LpPLA2), sfingozynę- 1-fosforan (Sph-1-P), mała gęsta lipoproteina o małej gęstości (sdLDL) i mieloperoksydaza (MPO). Niedawny systematyczny przegląd markerów pierwotnych incydentów sercowo-naczyniowych wykazał, że pod względem korelacji z rozwojem chorób sercowo-naczyniowych; Białko C-reaktywne, fibrynogen, cholesterol, apolipoproteina B, stosunek apolipoproteina A/apolipoproteina B, lipoproteina o wysokiej gęstości i witamina D były przydatne w przewidywaniu chorób sercowo-naczyniowych, natomiast w przypadku pierwotnego udaru mózgu; silnymi markerami były fibrynogen i kwas moczowy w surowicy.

Badanie to miało zatem na celu określenie ryzyka przyszłych chorób sercowo-naczyniowych i zdarzeń u osób, które przeżyły stan przedrzucawkowy, przy użyciu tych ustalonych biomarkerów w połączeniu z testowaniem markerów genowych.

Uczestnikami będą wszyscy kolejni uczestnicy, którzy spełniają kryteria włączenia dla każdej grupy badawczej w okresie 12 miesięcy we wszystkich ośrodkach. Zostaliby poinformowani o badaniu i uzyskaniu świadomej zgody od nich lub od krewnych (gdy pacjent nie jest w stanie tego zrobić). Od wszystkich uczestników pobrano 10 ml próbki krwi żylnej i suchą plamkę krwi na bibule filtracyjnej (przez lekarzy ze wszystkich uczestniczących ośrodków) w celu oznaczenia sercowych, lipidowych i genetycznych markerów chorób układu krążenia.

Na początku badania odbywałyby się sesje szkoleniowe dotyczące protokołu badania i monitorowania dla wszystkich członków zespołu z ośrodków badawczych i odbywałoby się to co dwa tygodnie, aż do zakończenia badania, aby zapewnić jednolitość.

Uzyskane próbki krwi byłyby odwirowywane w celu uzyskania osocza i surowicy w każdym miejscu badania, które następnie byłyby transportowane w wydziale okładów z lodu laboratorium medycznego Uniwersytetu Babcock, Ilishan-Remo w celu oznaczenia biomarkerów lipidowych i sercowych, podczas gdy badania genetyczne (ekstrakcja DNA i sekwencjonowanie) zostałoby wykonane w Centrum Zaawansowanych Badań Medycznych i Biotechnologii (CAMRAB), laboratorium w Szpitalu Uniwersyteckim Babcock, Ilishan-Remo. Wszystkie uzyskane próbki byłyby zakodowane w taki sposób, że naukowiec laboratoryjny nie zna tożsamości uczestników. Uzyskane wyniki zostaną następnie przeniesione do wstępnie oznakowanego formularza, w którym wprowadzono już inne szczegóły dotyczące każdego uczestnika, w tym dane osobowe i historię ciąży. Dane uczestników wprowadzone do proformy byłyby również wprowadzane bezpośrednio do tabletów połączonych z aplikacją mobilną Redcap do hostingu stron internetowych, a następnie eksportowane do SPSS w celu analizy. Utrzymywano dwudziestoczterogodzinny kontakt telefoniczny z członkami zespołu ze wszystkich ośrodków badawczych zaangażowanych w badanie, poprzez bezpośrednie rozmowy telefoniczne i wiadomości tekstowe. Zostanie utworzona grupa czatu WhatsApp, aby połączyć wszystkie cztery witryny badawcze w celu łatwego przesyłania informacji. Utrzymywano dwudziestoczterogodzinny kontakt telefoniczny z członkami zespołu ze wszystkich ośrodków badawczych zaangażowanych w badanie.

Próbki krwi byłyby zbierane do heparyny litowej i zwykłych pojemników wolnych od antykoagulantów i natychmiast transportowane w pojemniku z lodem do laboratorium w celu analizy, gdzie byłyby wirowane przy 2500 obr./min przez 5 minut we wszystkich miejscach, przed transportem obu dobrze oznakowanych supernatantów surowice w zwykłych butelkach i osocze w butelkach z heparyną litową po przelaniu z upakowanych krwinek czerwonych na Uniwersytet Babcock. Porcje surowicy i osocza będą następnie przechowywane w temperaturze -20ºC na Uniwersytecie Babcock do czasu dalszej analizy. Kropla plamki krwi pobrana od każdego uczestnika zostałaby pozostawiona do wyschnięcia na powietrzu, a następnie bezpiecznie przechowywana w chłodnej, suchej lodówce przed transportem do CAMRAB, gdzie byłaby utrzymywana w temperaturze -80˚C do czasu analizy genów. Próbki surowicy i osocza, które nie są używane, będą przechowywane w temperaturze -80˚C przez 5 lat.

Pomiary ciśnienia krwi byłyby wykonywane przez przeszkoloną pielęgniarkę w każdym miejscu za pomocą ręcznie obsługiwanego sfigmomanometru zasilanego rtęcią, a odczyty te byłyby wykonywane w pozycji siedzącej. Dźwięk Korotkowa V byłby traktowany jako poziom rozkurczowego ciśnienia krwi we wszystkich przypadkach. Ciśnienie krwi byłoby następnie natychmiast wprowadzane do formularza badania dla każdego uczestnika.

Po wyjaśnieniu procedury za pomocą kwestionariusza informacyjnego, uzyskaniu zgody i wypełnieniu części wywiadu proformy, przed rozpoczęciem jakiejkolwiek terapii dożylnej od uczestników pobierane będzie 10 ml próbek krwi żylnej. Ta próbka byłaby pobierana z przeciwległej kończyny górnej pacjentów, którzy już otrzymują infuzję dożylną. Krew żylna będzie pobierana z żyły przedłokciowej uczestnika i umieszczana w rurce próżniowej z heparyną litową (5 ml) i zwykłej butelce bez antykoagulantu (5 ml). W momencie pobierania krwi kropla krwi byłaby umieszczana na bibule filtracyjnej do analizy genetycznej.

W ten sposób wszystkie uczestniczki byłyby obserwowane do końca połogu; obserwacja rozwoju stanu przedrzucawkowego u kobiet przyjętych w pierwszej połowie ciąży, kobiet przyjętych ze stanem przedrzucawkowym w ciąży byłaby obserwowana pod kątem korelacji nasilenia stanu przedrzucawkowego z poziomami biomarkerów, a kobiety rekrutowane po porodzie miałyby porównywane poziomy markerów sercowych i genetycznych z tymi kobietami, które miały normalne ciąże. Uzyskano by kontakt telefoniczny z uczestnikami i ich najbliższymi krewnymi oraz z nimi lub z najbliższymi krewnymi w odstępach 1, 2, 5 i 10 lat w celu rozwoju zdarzeń sercowo-naczyniowych i powtórzenia poziomu biomarkerów w surowicy.