Cardiale biomarkers bij pre-eclampsie: voorspelling van ziekte en het risico van toekomstige cardiovasculaire gebeurtenissen bij overlevenden (PreeclampBIO)

Pre-eclampsie is een ziekte die sterk verband houdt met het risico op een beroerte en andere hart- en vaatziekten. Dit is een aandoening die vaker voorkomt in de lage- en middeninkomenslanden van de wereld, met name Afrika ten zuiden van de Sahara, waar de morbiditeit en mortaliteit naar verluidt hoger is. Er worden grotere aantallen overlevenden verwacht met de toenemende wereldwijde winst in de vermindering van moedersterfte in verband met pre-eclampsie. Deze hart- en vaatziekten myocardischemie, hartinfarct en beroerte zijn belangrijke oorzaken van plotseling overlijden omdat de voorloperaandoeningen; atherosclerose en hypertensie zijn grotendeels asymptomatisch. Er zijn gevestigde biomarkers voor deze aandoeningen die kunnen worden gebruikt als screeningtools. Het lage gebruik van routinematige medische controle en de asymptomatische aard van deze gebeurtenissen verhogen het risico op plotselinge vroegtijdige dood door deze aandoeningen. De postnatale periode biedt een goede gelegenheid om op deze gebeurtenissen te screenen om risicovrouwen op te sporen en vroegtijdige preventieve zorg aan te bieden.

Pre-eclampsie is in wezen een ziekte van de trofoblast. Er is ook aangetoond dat het verband houdt met oxidatieve stress, een fenomeen dat de niveaus van LDL-cholesterolperoxidatie verhoogt, wat leidt tot een verhoogde opname door macrofagen, wat resulteert in de vorming van schuimcellen en atherosclerose. Pre-eclampsie wordt ook in verband gebracht met inflammatoire veranderingen die de vasculaire integriteit aantasten - een effect dat kan aanhouden na de zwangerschap, resulterend in atherosclerose die predisponeert voor myocardischemie, myocardinfarct en beroerte.

Deze veranderingen in het vaatstelsel zijn asymptomatisch en tenzij hypertensie vroegtijdig wordt ontdekt en vasoprotectieve of antitrombotische behandeling wordt gestart, kan een plotselinge dood optreden als gevolg van een beroerte of een acuut myocardinfarct.

Hypertensieve hartziekte verwijst naar hartaandoeningen die het gevolg zijn van het effect van hypertensie. Het hart werkt in dit geval nu onder een hogere druk, wat resulteert in hypertrofie van de hartspier, verdikking van de cardiale arteriële vasculatuur (leidend tot coronaire hartziekte) en een verhoogd risico op myocardischemie en infarct. De resulterende disfunctie van de hartspier leidt tot toenemende niveaus van pro-inflammatoire cytokines, die kunnen worden gedetecteerd in de bloedbaan en waarvan de niveaus kunnen correleren met de aanwezigheid en ernst van de ziektetoestand. Hypertensie heeft vergelijkbare effecten op de cerebrale vasculatuur, waar het bloedvatruptuur kan veroorzaken, wat kan leiden tot levensbedreigende intracraniale bloedingen. De bloedvaten onder invloed van langdurige hypertensie kunnen hypertrofie ondergaan, wat leidt tot verdikking van de vaatwand met vernauwing van het lumen en vervolgens cerebrale ischemie, infarct en beroerte.

Er is een significante vermindering van het risico op een fatale en niet-fatale beroerte als hypertensie vroegtijdig wordt ontdekt en effectief onder controle wordt gehouden met antihypertensiva. Het is aangetoond dat deze preventieve strategie van meer nut is als ze op jongere leeftijd wordt gestart en vooral bij vrouwen van het zwarte ras die een groter risico lopen en er meer baat bij zouden hebben.

Bij de algemene volwassen bevolking is aangetoond dat lipiden en cardiale biomarkers het optreden van deze cardiovasculaire gebeurtenissen voorspellen. Deze biomarkers omvatten: zeer gevoelige C-reactieve proteïne (hsCRP), apolipoproteïnen (LDL, Apo B-100, Apo A1), lipoproteïne a (Lp(a), geoxideerd LDL, lipoproteïne-geassocieerde fosfolipase (A2-LpPLA2), sfingosine- 1-fosfaat (Sph-1-P), klein compact lipoproteïne met lage dichtheid (sdLDL) en myeloperoxidase (MPO). Een recente systematische review van markers voor primaire cardiovasculaire gebeurtenissen onthulde dat in termen van correlatie met de ontwikkeling van hart- en vaatziekten; C-reactief proteïne, fibrinogeen, cholesterol, apolipoproteïne B, de verhouding apolipoproteïne A/apolipoproteïne B, lipoproteïne met hoge dichtheid en vitamine D waren nuttig bij het voorspellen van hart- en vaatziekten, terwijl voor primaire beroerte; fibrinogeen en serumurinezuur waren sterke markers.

Deze studie was daarom gericht op het bepalen van het risico op toekomstige hart- en vaatziekten en gebeurtenissen bij overlevenden van pre-eclampsie met behulp van deze gevestigde biomarkers, in combinatie met het testen op genmarkers.

Deelnemers zijn alle opeenvolgende deelnemers die voldoen aan de inclusiecriteria voor elke studiegroep binnen de periode van 12 maanden op alle locaties. Ze zouden geïnformeerd worden over het onderzoek en geïnformeerde toestemming krijgen van hen of van familieleden (wanneer de patiënt hiertoe niet in staat is). Een monster van 10 ml veneus bloed en een droge bloedvlek op filtreerpapier zouden worden verkregen (door artsen van alle deelnemende locaties) van alle deelnemers voor het testen van hart-, lipiden- en genmarkers van hart- en vaatziekten.

Aan het begin van het onderzoek zouden er trainingssessies over het onderzoeksprotocol en monitoring worden gehouden voor alle teamleden van de onderzoekslocaties en dit zou tweewekelijks worden gedaan tot het einde van het onderzoek om uniformiteit te waarborgen.

De verkregen bloedmonsters zouden worden gecentrifugeerd om plasma en serum te verkrijgen op elke onderzoekslocatie, die vervolgens zouden worden getransporteerd in de afdeling ijspakken van de medische laboratoriumwetenschap van de Babcock University, Ilishan-Remo voor het testen van lipide en cardiale biomarkers terwijl de genetische studies (DNA-extractie en sequencing) zou worden gedaan in het Center for Advanced Medical Research and Biotechnology (CAMRAB), laboratorium in het Babcock University Teaching Hospital, Ilishan-Remo. Alle verkregen monsters zouden zodanig worden gecodeerd dat de laboratoriumwetenschapper verblind is voor de identiteit van de deelnemers. De verkregen resultaten worden vervolgens overgebracht naar de vooraf gelabelde proforma waar andere details van elke deelnemer, inclusief de persoonsgegevens en zwangerschapsgeschiedenis, al zijn ingevoerd. De gegevens van de deelnemers die in de proforma zijn ingevoerd, worden ook rechtstreeks ingevoerd in tablets die zijn gekoppeld aan de mobiele Redcap-applicatie voor webhosting, die later voor analyse naar SPSS worden geëxporteerd. Er zou 24 uur per dag telefonisch contact worden onderhouden met teamleden van alle onderzoekslocaties die bij het onderzoek betrokken waren, via een rechtstreeks telefoongesprek en sms. Er zou een whatsapp-chatgroep worden gemaakt om alle vier de studiesites met elkaar te verbinden, zodat informatie gemakkelijk kan worden overgedragen. Er zou 24 uur per dag telefonisch contact worden onderhouden met teamleden van alle onderzoekslocaties die bij het onderzoek betrokken waren.

De bloedmonsters zouden worden verzameld in containers zonder lithiumheparine en gewone antistollingsmiddelen en onmiddellijk in een ijscontainer naar het laboratorium worden vervoerd voor analyse, waar ze 5 minuten bij 2500 tpm zouden worden gecentrifugeerd, op alle locaties, voordat beide goed gelabelde supernatant werden vervoerd. sera in gewone flessen en plasma in lithiumheparineflessen na decanteren van de verpakte rode bloedcellen naar Babcock University. Serum- en plasma-aliquots zouden vervolgens worden bewaard bij -20ºC in Babcock University tot verdere analyse. De bloedvlekdruppel die van elke deelnemer werd verkregen, zou aan de lucht kunnen drogen en vervolgens veilig worden opgeslagen in een koele, droge opslagkoelkast voordat hij naar CAMRAB werd vervoerd, waar hij tot genanalyse op -80˚C zou worden gehouden. Serum- en plasmamonsters die niet worden gebruikt, worden 5 jaar bij -80˚C bewaard.

Bloeddrukmetingen zouden worden uitgevoerd door een getrainde verpleegster op elke locatie met een handmatig bediende, door kwik aangedreven sfygmomanometer en deze metingen zouden in zittende positie worden gedaan. De Korotkoff-klank V zou in alle gevallen worden genomen als het niveau voor de diastolische bloeddruk. De bloeddruk zou dan onmiddellijk worden ingevoerd in de onderzoeksproforma voor elke deelnemer.

Na het uitleggen van de procedure met behulp van het informatieformulier voor de patiënt, het verkrijgen van toestemming en het invullen van de geschiedenissegmenten van de proforma, zou 10 ml veneuze bloedmonsters van de deelnemers worden verkregen voorafgaand aan het begin van een intraveneuze therapie. Dit monster zou worden verzameld uit het contralaterale bovenste lidmaat van patiënten die al een intraveneus infuus krijgen. Het veneuze bloed zou worden opgezogen uit de ante-cubitale ader van de deelnemer en in een lithiumheparine-vacuümbuis (5 ml) en een gewone antistollingsmiddelvrije fles (5 ml) worden geplaatst. Op het moment van bloedafname zou een druppel bloed op een filtreerpapier worden gemaakt voor genetische analyse.

Alle deelnemers zouden dus tot het einde van het puerperium worden gevolgd; observatie voor de ontwikkeling van pre-eclampsie bij vrouwen die in de eerste helft van de zwangerschap zijn opgenomen, degenen die zijn opgenomen met pre-eclampsie tijdens de zwangerschap zouden worden geobserveerd op de correlatie van de ernst van de pre-eclampsie met de niveaus van biomarkers en bij degenen die postpartum werden gerekruteerd, zouden hun niveaus van hart- en genmarkers worden vergeleken met die van vrouwen die een normale zwangerschap hebben gehad. Telefonisch contact met de deelnemers en hun naaste verwanten zou worden verkregen en zij of naaste verwanten zouden worden gecontacteerd met tussenpozen van 1, 2, 5 en 10 jaar voor de ontwikkeling van cardiovasculaire gebeurtenissen en herhaalde serumspiegels van biomarkers.