Biomarcadores cardíacos na pré-eclâmpsia: previsão de doença e risco de eventos cardiovasculares futuros em sobreviventes (PreeclampBIO)

A pré-eclâmpsia é uma doença fortemente ligada ao risco de acidente vascular cerebral e outras doenças cardiovasculares. Esta é uma condição com maior prevalência nos países de baixa e média renda do mundo, especialmente na África subsaariana, onde a morbidade e a mortalidade são supostamente mais altas. Espera-se um número maior de sobreviventes com os crescentes ganhos globais na redução da mortalidade materna associada à pré-eclâmpsia. Estas doenças cardiovasculares isquemia miocárdica, infarto do miocárdio e acidente vascular cerebral são as principais causas de morte súbita porque as condições precursoras; aterosclerose e hipertensão são em grande parte assintomáticas. Existem biomarcadores estabelecidos para essas condições que podem ser usados ​​como ferramentas de triagem. A baixa utilização de exames de rotina de saúde e a natureza assintomática desses eventos aumentam o risco de morte súbita prematura por essas condições. O período pós-natal oferece uma boa oportunidade para triagem desses eventos para detectar mulheres em risco e oferecer cuidados preventivos precoces.

A pré-eclâmpsia é essencialmente uma doença do trofoblasto, também tem demonstrado estar associada ao estresse oxidativo, fenômeno que aumenta os níveis de peroxidação do colesterol LDL, levando ao aumento da sua captação pelos macrófagos, resultando na formação de células espumosas e aterosclerose. A pré-eclâmpsia também está associada a alterações inflamatórias que alteram a integridade vascular - efeito que pode persistir além da gravidez, resultando em aterosclerose que predispõe à isquemia miocárdica, infarto do miocárdio e acidente vascular cerebral.

Essas alterações na vasculatura são assintomáticas e, a menos que a hipertensão seja detectada precocemente e o tratamento vasoprotetor ou antitrombótico seja iniciado, pode ocorrer morte súbita por acidente vascular cerebral ou infarto agudo do miocárdio.

A doença cardíaca hipertensiva refere-se a condições cardíacas que resultam do efeito da hipertensão. O coração, neste caso, agora trabalha sob uma pressão mais alta, resultando na hipertrofia do músculo cardíaco, espessamento da vasculatura arterial cardíaca (levando à doença arterial coronariana) e aumento do risco de isquemia miocárdica e infarto. A disfunção muscular cardíaca resultante leva a níveis crescentes de citocinas pró-inflamatórias, que podem ser detectadas na corrente sanguínea e cujos níveis podem se correlacionar com a presença e gravidade da condição da doença. A hipertensão tem efeitos semelhantes na vasculatura cerebral, onde pode causar ruptura de vasos resultando em hemorragia intracraniana com risco de vida. Os vasos sob a influência da hipertensão de longa duração podem sofrer hipertrofia levando ao espessamento da parede do vaso com estreitamento do lúmen e, em seguida, isquemia cerebral, infarto e acidente vascular cerebral.

Há uma redução significativa no risco de AVC fatal e não fatal se a hipertensão for detectada precocemente e efetivamente controlada com medicamentos anti-hipertensivos. Essa estratégia preventiva demonstrou ser mais benéfica quando iniciada em uma idade mais jovem e especialmente em mulheres da raça negra, que correm maior risco e se beneficiariam mais.

Na população adulta em geral, lipídios e biomarcadores cardíacos demonstraram predizer a ocorrência desses eventos cardiovasculares. Esses biomarcadores incluem: Proteína C reativa de alta sensibilidade (hsCRP), Apolipoproteínas (LDL, Apo B-100, Apo A1), Lipoproteína a (Lp(a), LDL oxidada, Fosfolipase associada à lipoproteína (A2-LpPLA2), Esfingosina- 1-fosfato (Sph-1-P), pequena lipoproteína densa de baixa densidade (sdLDL) e mieloperoxidase (MPO). Uma revisão sistemática recente sobre marcadores de eventos cardiovasculares primários revelou que, em termos de correlação com o desenvolvimento de doença cardiovascular; Proteína C-reativa, fibrinogênio, colesterol, apolipoproteína B, relação apolipoproteína A/apolipoproteína B, lipoproteína de alta densidade e vitamina D foram úteis na predição de doença cardiovascular, enquanto para AVC primário; fibrinogênio e ácido úrico sérico foram marcadores fortes.

Este estudo, portanto, teve como objetivo determinar o risco de doenças e eventos cardiovasculares futuros em sobreviventes de pré-eclâmpsia usando esses biomarcadores estabelecidos, em conjunto com o teste de marcadores genéticos.

Os participantes incluiriam todos os participantes consecutivos que atendessem aos critérios de inclusão para cada grupo de estudo dentro do período de 12 meses em todos os locais. Eles seriam instruídos sobre o estudo e o consentimento informado obtido deles ou de parentes (quando o paciente não puder fazê-lo). Uma amostra de 10ml de sangue venoso e uma mancha de sangue seco em papel de filtro seriam obtidas (por médicos de todos os locais participantes) de todos os participantes para análise de marcadores cardíacos, lipídicos e genéticos de doenças cardiovasculares.

No início do estudo, sessões de treinamento sobre o protocolo do estudo e monitoramento seriam realizadas para todos os membros da equipe dos locais de estudo e isso seria feito quinzenalmente até a conclusão do estudo para garantir a uniformidade.

As amostras de sangue obtidas seriam centrifugadas para obter plasma e soro em cada local de estudo, que seriam então transportadas em bolsas de gelo departamento de ciência laboratorial médica da Universidade Babcock, Ilishan-Remo para análise de lipídios e biomarcadores cardíacos enquanto os estudos genéticos (extração de DNA e sequenciamento) seria feito no Centro de Pesquisa Médica Avançada e Biotecnologia (CAMRAB), laboratório do Babcock University Teaching Hospital, Ilishan-Remo. Todas as amostras obtidas seriam codificadas de forma que o cientista do laboratório não soubesse a identidade dos participantes. Os resultados obtidos seriam então transferidos para o proforma pré-etiquetado, onde outros detalhes de cada participante, incluindo os dados biográficos e o histórico de gravidez, já foram inseridos. Os detalhes dos participantes inseridos no proforma também seriam inseridos diretamente em tablets vinculados ao aplicativo móvel Redcap para hospedagem na web, que seriam exportados posteriormente para o SPSS para análise. O contato telefônico de vinte e quatro horas seria mantido com os membros da equipe de todos os locais de estudo envolvidos no estudo, por meio de telefonema direto e mensagem de texto. Um grupo de bate-papo do Whatsapp seria criado para vincular todos os quatro locais de estudo para facilitar a transmissão de informações. O contato telefônico de vinte e quatro horas seria mantido com os membros da equipe de todos os locais de estudo envolvidos no estudo.

As amostras de sangue seriam coletadas em recipientes de heparina de lítio e anticoagulantes simples e transportadas imediatamente em um recipiente de gelo para o laboratório para análise, onde seriam centrifugadas a 2.500 rpm por 5 minutos, em todos os locais, antes do transporte de ambos os sobrenadantes bem marcados soros em frascos simples e plasma em frascos de heparina de lítio após decantação dos glóbulos vermelhos embalados para a Babcock University. Alíquotas de soro e plasma seriam então armazenadas a -20ºC na Babcock University até análise posterior. A gota de sangue obtida de cada participante seria deixada secar ao ar e, em seguida, armazenada com segurança em uma geladeira de armazenamento seco e fresco antes do transporte para o CAMRAB, onde seria mantida a -80˚C até a análise do gene. As amostras de soro e plasma que não forem usadas seriam armazenadas a -80˚C por 5 anos.

As medições da pressão arterial seriam obtidas por uma enfermeira treinada em cada local com esfigmomanômetro de mercúrio operado manualmente e essas leituras seriam feitas na posição sentada. O V do som de Korotkoff seria tomado como o nível da pressão arterial diastólica em todos os casos. A pressão arterial seria então imediatamente inserida no pró-forma do estudo para cada participante.

Depois de explicar o procedimento com o auxílio do formulário de informações do sujeito, obter o consentimento e preencher os segmentos de histórico do pró-forma, 10 ml de amostras de sangue venoso seriam obtidos dos participantes antes do início de qualquer terapia intravenosa. Essa amostra seria coletada do membro superior contralateral de pacientes que já estão em infusão intravenosa. O sangue venoso seria aspirado da veia antecubital do participante e colocado em um tubo a vácuo de heparina de lítio (5mls) e um frasco simples sem anticoagulante (5mls). No momento da coleta de sangue, seria feita uma gota de sangue em um papel filtro para análise genética.

Todas as participantes seriam acompanhadas até o final do puerpério; observação para o desenvolvimento de pré-eclâmpsia em mulheres admitidas na primeira metade da gravidez, aquelas admitidas com pré-eclâmpsia na gravidez seriam observadas para a correlação da gravidade da pré-eclâmpsia com os níveis de biomarcadores e aquelas recrutadas após o parto teriam seus níveis de marcadores cardíacos e genéticos comparados com as de mulheres que tiveram gestações normais. O contato telefônico dos participantes e seus parentes próximos seria obtido e eles ou parentes próximos seriam contatados em intervalos de 1, 2, 5 e 10 anos para desenvolvimento de eventos cardiovasculares e níveis séricos repetidos de biomarcadores.