Imunomodulace endometria podáním mononukleárních buněk periferní krve in utero

Jedním z nejvíce limitujících faktorů v oblasti asistované reprodukce je selhání implantace. Nový přístup ke zvýšení šancí na úspěch zahrnuje použití buněk z krve pacientky, mononukleárních buněk periferní krve (PBMC), které po izolaci lze několik dní kultivovat a poté inseminovat zpět do děložní dutiny před implantací embrya. Bylo prokázáno, že imunitní systém hraje hlavní roli v procesu implantace embrya. K dnešnímu dni se zdá, že alespoň tři mezinárodní klinické studie potvrzují užitečnost intrauterinního podávání PBMC v situaci opakovaného selhání implantace (RIF) při oplodnění in vitro (IVF) (RIF: nepřítomnost aktivního těhotenství po ≥ 3 transferech embryí). Míra klinického těhotenství by se zdvojnásobila nebo dokonce ztrojnásobila. Tato léčba nebyla nikdy studována v randomizované dvojitě zaslepené klinické studii, v kontextu oplodnění bez RIF nebo v klasické léčbě, jako je intrauterinní inseminace (IUI) partnerskými spermiemi.

Naší hypotézou je, že vytvoření endometriální zánětlivé reakce podáním PBMC v děložní dutině umožňuje lepší vnímavost a následně lepší implantaci po embryotransferu v rámci IVF léčby.

Cílem je vyhodnotit, zda intrauterinní podání PBMC zlepšuje implantaci embrya po léčbě asistované reprodukce.

Vyšetřovatelé plánují přijmout 148 žen podstupujících IVF a 220 pacientek podstupujících UII s partnerským spermatem, aby otestovali naši hypotézu. Vyšetřovatelé také plánují nábor všech pacientů s RIF, kteří přijmou účast v klinické studii. Studie bude prospektivní, randomizovaná a dvojitě zaslepená. Ošetřené skupině bude podáváno intrauterinní podání PBMC, zatímco kontrolní skupině bude podáváno pouze médium pro promývání spermatu. PBMC budou odebrány ze vzorku krve (maximálně 10 ml) několik dní před embryotransferem v případech IVF nebo v den inseminace spermií v případech IUI. PBMC pak budou izolovány v laboratoři na Ficollově gradientu, aby se odstranily krevní destičky, polynukleární buňky a červené krvinky. PBMC pak budou stimulovány fytohemaglutininem (PHA) a hormonem lidského choriového gonadotropinu (hCG) po dobu 48 hodin. Před a po aktivaci buněk bude hodnocena fenotypizace lymfocytů. Kromě toho bude cytokinový profil stanoven ze supernatantu stimulovaných buněk. Tyto údaje umožní u každého pacienta stanovit vazbu mezi profilem pro-versus protizánětlivých cytokinů a úspěšností implantace versus selháním. Dva dny po naočkování buněk bude PBMC podán do děložní dutiny pacientky. Transfer embrya bude proveden stejným způsobem jako standardní léčba 3. nebo 5. den podle kritérií stanovených IVF laboratoří a po dohodě s lékařem.