Immunomodulazione dell'endometrio mediante somministrazione in utero di cellule mononucleate del sangue periferico

Uno dei fattori più limitanti nel campo della riproduzione assistita è il fallimento dell'impianto. Un nuovo approccio per aumentare le possibilità di successo prevede l'uso di cellule del sangue del paziente, cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC), che una volta isolate possono essere coltivate per alcuni giorni e quindi inseminate nuovamente nella cavità uterina prima dell'impianto dell'embrione. È stato dimostrato che il sistema immunitario svolge un ruolo importante nel processo di impianto dell'embrione. Ad oggi, almeno tre studi clinici internazionali sembrano confermare l'utilità della somministrazione intrauterina di PBMC nel contesto di ripetuti fallimenti di impianto (RIF) nella fecondazione in vitro (IVF) (RIF: assenza di gravidanza attiva dopo ≥ 3 trasferimenti di embrioni). Il tasso di gravidanza clinica sarebbe raddoppiato o addirittura triplicato. Questo trattamento non è mai stato studiato in uno studio clinico randomizzato in doppio cieco, nel contesto della fecondazione senza RIF o in un trattamento classico come l'inseminazione intrauterina (IUI) con lo sperma del partner.

La nostra ipotesi è che la creazione di una reazione infiammatoria endometriale mediante la somministrazione di PBMC nella cavità uterina consenta una migliore ricettività e di conseguenza un migliore impianto a seguito di un trasferimento di embrioni nell'ambito di un trattamento di fecondazione in vitro.

L'obiettivo è valutare se la somministrazione intrauterina di PBMC migliora l'impianto dell'embrione dopo il trattamento di riproduzione assistita.

I ricercatori hanno in programma di reclutare 148 donne sottoposte a fecondazione in vitro e 220 pazienti sottoposte a UII con sperma del partner per testare la nostra ipotesi. Gli investigatori prevedono inoltre di reclutare tutti i pazienti RIF che accettano di partecipare alla sperimentazione clinica. Lo studio sarà prospettico, randomizzato e in doppio cieco. Il gruppo trattato riceverà una somministrazione intrauterina di PBMC mentre il gruppo di controllo verrà somministrato solo con mezzo di lavaggio dello sperma. PBMC sarà ottenuto da un campione di sangue (massimo 10 ml) pochi giorni prima del trasferimento dell'embrione nei casi di fecondazione in vitro o il giorno dell'inseminazione degli spermatozoi nei casi di IUI. Le PBMC saranno quindi isolate in laboratorio su gradiente di Ficoll per eliminare piastrine, cellule polinucleate e globuli rossi. Le PBMC saranno quindi stimolate con fitoemoagglutinina (PHA) e ormone gonadotropina corionica umana (hCG) per 48 ore. La fenotipizzazione dei linfociti sarà valutata prima e dopo l'attivazione cellulare. Inoltre, il profilo delle citochine sarà stabilito dal supernatante delle cellule stimolate. Questi dati consentiranno di stabilire un legame tra il profilo delle citochine antinfiammatorie pro-versus e il successo dell'impianto rispetto al fallimento per ciascun paziente. Due giorni dopo la semina cellulare, le PBMC verranno somministrate nella cavità uterina della paziente. Il trasferimento dell'embrione verrà eseguito con le stesse modalità del trattamento standard al giorno 3 o 5 secondo i criteri stabiliti dal laboratorio di fecondazione in vitro e in accordo con il medico.