Zásah proti zneužívání alkoholu u personálu amerického námořnictva v aktivní službě

Pracovníci aktivní služby amerického námořnictva byli přijati k účasti na randomizované pilotní studii hodnotící účinnost 3minutové video intervence určené k podpoře bezpečnějšího pití a snížení nepříznivých následků užívání alkoholu. Všem subjektům byl před účastí poskytnut informovaný souhlas. Po dokončení T1 byla poskytnuta pobídka dárkové karty v hodnotě 5 USD a po dokončení T2 byla poskytnuta dárková karta v hodnotě 10 USD. Účast subjektu a údaje byly anonymní; osobní identifikátory byly shromážděny za účelem propojení vzorků a průzkumů mezi časovým bodem 1 (T1) a časovým bodem 2 (T2), ale po propojení byla všechna data identifikátorů zničena. Abychom minimalizovali riziko spojené se shromažďováním osobních identifikátorů, neuchovávali jsme žádné osobní identifikátory, včetně kategorizace účastníků podle pohlaví. Subjekty dokončily průzkum T1 pouze s ID studie na formuláři a poté byly požádány, aby poskytly vzorek moči.

Vzorky moči byly odebírány na toaletách na palubě lodi. Sbírky nebyly sledovány. Vzorky moči byly označeny identifikačním číslem subjektu a skladovány při 4 stupních C, dokud nemohly být odeslány. U T1 zůstaly vzorky chlazené přes víkend, protože přijímající personál nebude během víkendu k dispozici; v T2 byly vzorky odeslány následující den.

V T1, po poskytnutí vzorku moči, sledovali intervenční subjekty 3minutové video, zatímco kontrolní subjekty opustily prostor, aniž by video sledovaly.

Po dlouhém víkendu byly subjekty požádány, aby se vrátily do studované oblasti, dokončily krátký průzkum a poskytly druhý vzorek moči.

3minutové video bylo vytvořeno pro tuto pilotní studii. Jeden z autorů se zkušenostmi s teorií očkování (RJD) řídil obsah videa, které bylo vyrobeno, režírováno a natočeno na New York University Film School.

Průzkumy T1 shromáždily údaje o roce narození (jako ověření při propojování údajů T1 a T2 v případě chyby při spojování), demografické informace včetně rasy, stavu vztahu a platové třídy. Další otázky zahrnovaly „měli jste někdy problém s pitím?“, otázky AUDIT-C a otázky týkající se toho, zda v důsledku užívání alkoholu došlo ke konfliktům, nehodám nebo jiným problémům.

Průzkum T2 shromáždil rok narození (viz výše), otázky AUDIT-C (upravené tak, aby odrážely údaje pouze z předchozího víkendu) a stejné otázky týkající se konfliktů, nehod nebo jiných problémů v důsledku pití alkoholu.

Postup pro testování EtG Chemikálie a materiály Standardy ethylglukuronidu (EtG) a ethylglukuronidu-d5 (EtG-d5) byly zakoupeny v koncentracích 1 mg/ml v 1 ml methanolu od Cerilliant Corp (Round Rock, TX, USA). Kapalná chromatografie-hmotnostní spektrometrie (LC-MS) jakosti methanolu, acetonitrilu a kyseliny mravenčí a zkumavky Sarstedt Inc 10 ml sc 16x100 mm byly zakoupeny od Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA). Vialky Nano-Filter® 0,2 um PES s předem proříznutým šedým uzávěrem byly od Thomson Instrument Company (Oceanside, CA, USA).

Příprava vzorku: ředění a filtrace 100 ul vzorku moči, 300 ul vody a 100 ul vnitřního standardu EtG-d5 o koncentraci 0,5 ug/ml bylo promícháno na vortexu v čisté zkumavce Starstedt. 200 ul vzorku bylo přeneseno do plášťové lahvičky filtrační lahvičky. Píst s filtrem byl zcela zasunut do plášťové lahvičky. Dvacet ul filtrovaného vzorku bylo přímo injikováno do LC-MS/MS.

Kalibrátory byly připraveny v koncentracích 0,05, 0,1, 0,25, 0,5, 1, 5 a 10 µg/ml a kontroly kvality při 0,15 a 7,5 µg/ml, s použitím 100 µl slepé moči, 200 µl vody, 100 µl odpovídajících pracovního roztoku a 100 ul roztoku vnitřního standardu.

Instrumentální analýza Chromatografická separace byla provedena na systému Nexera UHPLC (Shimadzu, Columbia, MD, USA). Systém Nexera UHPLC se skládal ze dvou binárních čerpadel LC-20AD XR pro vysokovýkonnou kapalinovou chromatografii, online odplyňovací jednotky (DGU-20A 3R), chlazeného autosampleru (SIL-20A XR) a pece (CTO-20AC). Kolona byla kolona Hypercarb (2,1 x 100 mm, 3 um) od Thermo Fisher Scientific. Mobilní fáze, 0,1% kyselina mravenčí ve vodě (A) a acetonitril (B), byla dodávána rychlostí 0,3 ml/min. Teplota kolony byla 30 °C. Gradient začínal B na 5 % a poté se zvýšil na 95 % během 6 minut. B na 95 % byl udržován po dobu 0,5 minuty, poté klesl na 5 % a byl udržován po dobu 1 minuty. Celková doba běhu byla 7,5 min.

Hmotnostní spektrometr byl trojitý kvadrupólový LCMS-8050 od Shimadzu vybavený elektrosprejovým ionizačním zdrojem (ESI). Průtok topného plynu a sušícího plynu byl 15 a 10 l/min, v daném pořadí, s průtokem rozprašovacího plynu 2 l/min. Teplota rozhraní byla 300 °C a teplota tepelného bloku byla 400 °C. Všechny sloučeniny byly analyzovány pomocí ESI v režimu negativní ionizace a pro každý analyt byly získány dva přechody v režimu monitorování více reakcí (MRM).

Statistická analýza Statistické analýzy byly provedeny pomocí Stata verze 15.1 (StataCorp, College Station, TX). Popisné statistiky byly vypočítány pro charakterizaci demografie účastníků a podle konzumace alkoholu v T1 a T2. Fisherovy exaktní testy byly použity pro kategorické proměnné s n<15 v jakékoli kategorii a Wilcoxonovy rank-sum testy pro nenormálně distribuované spojité proměnné pro zkoumání bivariačních asociací mezi skupinami. Všechny testy byly oboustranné s hladinou významnosti 0,05.