Intervención sobre el uso indebido de alcohol en el personal de la Marina de los EE. UU. en servicio activo

Se reclutó personal en servicio activo de la Marina de los EE. UU. para participar en un ensayo piloto aleatorio que evaluó la eficacia de una intervención de video de 3 minutos diseñada para promover un consumo más seguro de alcohol y reducir las consecuencias adversas del consumo de alcohol. Todos los sujetos recibieron su consentimiento informado antes de la participación. Se proporcionó un incentivo de una tarjeta de regalo de $5 al completar T1 y una tarjeta de regalo de $10 después de completar T2. La participación de los sujetos y los datos fueron anónimos; Se recolectaron identificadores personales para vincular muestras y encuestas entre el punto de tiempo 1 (T1) y el punto de tiempo 2 (T2), pero después de la vinculación, todos los datos del identificador fueron destruidos. Para minimizar el riesgo asociado con la recopilación de identificadores personales, no conservamos ningún identificador personal, para incluir la categorización por sexo de los participantes. Los sujetos completaron la encuesta T1 con solo la identificación del estudio en el formulario y luego se les pidió que proporcionaran una muestra de orina.

Las muestras de orina se recogieron en los baños a bordo del barco. Las colecciones no fueron monitoreadas. Las muestras de orina se etiquetaron con el número de identificación del sujeto y se almacenaron a 4 grados C hasta que pudieran enviarse. Para T1, las muestras permanecieron refrigeradas durante el fin de semana ya que el personal de recepción no estaría disponible durante el fin de semana; en T2, las muestras se enviaron al día siguiente.

En T1, después de proporcionar la muestra de orina, los sujetos de intervención vieron un video de 3 minutos, mientras que los sujetos de control abandonaron el área sin mirar el video.

Después del fin de semana largo, se pidió a los sujetos que regresaran al área de estudio, completaran una breve encuesta y proporcionaran una segunda muestra de orina.

El video de 3 minutos fue creado para este estudio piloto. Uno de los autores con experiencia en teoría de la inoculación (RJD) guió el contenido del video, que fue producido, dirigido y filmado en la Escuela de Cine de la Universidad de Nueva York.

Las encuestas T1 recopilaron datos sobre el año de nacimiento (como verificación al vincular los datos T1 y T2 en caso de error de vinculación), información demográfica para incluir raza, estado civil y grado salarial. Las preguntas adicionales incluyeron "¿alguna vez ha tenido un problema con la bebida?", las preguntas del AUDIT-C y preguntas sobre si se produjeron conflictos, accidentes u otros problemas como resultado del consumo de alcohol.

La encuesta T2 recolectó el año de nacimiento (ver arriba), preguntas AUDIT-C (modificadas para reflejar datos solo del fin de semana anterior) y las mismas preguntas sobre conflictos, accidentes u otros problemas como resultado del consumo de alcohol.

Procedimiento para la prueba de EtG Productos químicos y materiales Los estándares de glucurónido de etilo (EtG) y glucurónido de etilo-d5 (EtG-d5) se adquirieron en concentraciones de 1 mg/mL en 1 mL de metanol de Cerilliant Corp (Round Rock, TX, EE. UU.). Se compraron metanol, acetonitrilo y ácido fórmico, y tubos sc de 10 ml de 16 x 100 mm de Sarstedt Inc de cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC-MS) de Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, EE. UU.). Los viales Nano-Filter ® de PES de 0,2 µm con tapa gris precortada eran de Thomson Instrument Company (Oceanside, CA, EE. UU.).

Preparación de la muestra: dilución y filtración Cien µL de muestra de orina, 300 µL de agua y 100 µL del estándar interno EtG-d5 a 0,5 µg/mL se mezclaron con vórtex en un tubo Starstedt limpio. Se transfirieron 200 µl de la muestra al vial con cubierta del vial de filtro. El émbolo con filtro se insertó completamente en el vial de cubierta. Veinte µL de la muestra filtrada se inyectaron directamente en el LC-MS/MS.

Se prepararon calibradores a concentraciones 0.05, 0.1, 0.25, 0.5, 1, 5 y 10 µg/mL, y controles de calidad a 0.15 y 7.5 µg/mL, utilizando 100 µL de blanco de orina, 200 µL de agua, 100 µL del correspondiente solución de trabajo y 100 µL de la solución estándar interna.

Análisis instrumental La separación cromatográfica se llevó a cabo en un sistema UHPLC Nexera (Shimadzu, Columbia, MD, EE. UU.). El sistema Nexera UHPLC constaba de dos bombas binarias de cromatografía líquida de alto rendimiento LC-20AD XR, una unidad de desgasificación en línea (DGU-20A 3R), un inyector automático refrigerado (SIL-20A XR) y un horno (CTO-20AC). La columna era una columna Hypercarb (2,1 x 100 mm, 3 µm) de Thermo Fisher Scientific. La fase móvil, ácido fórmico al 0,1 % en agua (A) y acetonitrilo (B), se suministró a un caudal de 0,3 ml/min. La temperatura de la columna fue de 30ºC. El gradiente comenzó con B al 5 % y luego aumentó al 95 % en 6 min. B al 95 % se mantuvo durante 0,5 min, después de lo cual disminuyó al 5 % y se mantuvo durante 1 min. El tiempo total de ejecución fue de 7,5 min.

El espectrómetro de masas era un LCMS-8050 de triple cuadrupolo de Shimadzu equipado con una fuente de ionización por electropulverización (ESI). Los flujos de gas de calentamiento y gas de secado fueron de 15 y 10 L/min, respectivamente, con un flujo de gas de nebulización de 2 L/min. La temperatura de interfaz fue de 300°C y la temperatura del bloque térmico fue de 400°C. Todos los compuestos se analizaron usando ESI en modo de ionización negativa, y se adquirieron dos transiciones en modo de monitoreo de reacción múltiple (MRM) para cada analito.

Análisis estadístico Los análisis estadísticos se realizaron utilizando Stata versión 15.1 (StataCorp, College Station, TX). Se calcularon estadísticas descriptivas para caracterizar la demografía de los participantes y el consumo de alcohol en T1 y T2. Se utilizaron pruebas exactas de Fisher para variables categóricas con n<15 en cualquier categoría y pruebas de suma de rangos de Wilcoxon para variables continuas que no se distribuyen normalmente para examinar las asociaciones bivariadas entre los grupos. Todas las pruebas fueron bilaterales con un nivel de significación de 0,05.