Interwencja dotycząca nadużywania alkoholu przez personel marynarki wojennej Stanów Zjednoczonych w służbie czynnej

Personel czynnej służby Marynarki Wojennej Stanów Zjednoczonych został zrekrutowany do udziału w randomizowanym badaniu pilotażowym oceniającym skuteczność 3-minutowej interwencji wideo mającej na celu promowanie bezpieczniejszego picia i zmniejszanie negatywnych skutków spożywania alkoholu. Wszyscy badani otrzymali świadomą zgodę przed udziałem. Po ukończeniu T1 zapewniono zachętę w postaci karty podarunkowej o wartości 5 USD, a po ukończeniu T2 – karty podarunkowej o wartości 10 USD. Udział podmiotu i dane były anonimowe; identyfikatory osobiste zostały zebrane w celu powiązania próbek i ankiet między punktem czasowym 1 (T1) a punktem czasowym 2 (T2), ale po połączeniu wszystkie dane identyfikacyjne zostały zniszczone. Aby zminimalizować ryzyko związane z gromadzeniem identyfikatorów osobistych, nie zachowaliśmy żadnych identyfikatorów osobistych, w tym kategoryzacji płci uczestników. Pacjenci wypełniali ankietę T1, podając w formularzu tylko identyfikator badania, a następnie byli proszeni o dostarczenie próbki moczu.

Próbki moczu pobrano w toaletach na statku. Zbiory nie były monitorowane. Próbki moczu oznaczono numerem identyfikacyjnym osobnika i przechowywano w temperaturze 4 stopni C do czasu ich wysłania. W przypadku T1 próbki pozostawały schłodzone przez weekend, ponieważ personel odbierający nie byłby dostępny w weekend; w T2 próbki wysłano następnego dnia.

W T1, po dostarczeniu próbki moczu, osoby objęte interwencją oglądały 3-minutowy film, podczas gdy osoby kontrolne opuszczały teren bez oglądania filmu.

Po długim weekendzie poproszono badanych o powrót do obszaru badań, wypełnienie krótkiej ankiety i dostarczenie drugiej próbki moczu.

Na potrzeby tego badania pilotażowego utworzono 3-minutowy film. Jeden z autorów z doświadczeniem w teorii inokulacji (RJD) kierował treścią filmu, który został wyprodukowany, wyreżyserowany i nakręcony w New York University Film School.

Ankiety T1 zbierały dane dotyczące roku urodzenia (jako weryfikacja łączenia danych T1 i T2 w przypadku błędu łączenia), informacje demograficzne obejmujące rasę, status związku i stopień zarobkowy. Dodatkowe pytania obejmowały „czy kiedykolwiek miałeś problem z piciem?”, pytania AUDIT-C oraz pytania dotyczące tego, czy konflikty, wypadki lub inne problemy miały miejsce w wyniku spożywania alkoholu.

W ankiecie T2 zebrano rok urodzenia (patrz wyżej), pytania AUDIT-C (zmodyfikowane w celu odzwierciedlenia danych tylko z poprzedniego weekendu) oraz te same pytania dotyczące konfliktów, wypadków lub innych problemów wynikających ze spożywania alkoholu.

Procedura badania EtG Chemikalia i materiały Wzorce glukuronidu etylu (EtG) i glukuronidu etylu-d5 (EtG-d5) zakupiono w stężeniach 1 mg/ml w 1 ml metanolu z firmy Cerilliant Corp (Round Rock, TX, USA). Metanol, acetonitryl i kwas mrówkowy o czystości do chromatografii cieczowej ze spektrometrią mas (LC-MS) oraz probówki Sarstedt Inc 10 ml sc 16x100 mm zakupiono od Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA). Fiolki Nano-Filter® 0,2 µm PES z naciętą szarą nakrętką pochodziły z firmy Thomson Instrument Company (Oceanside, CA, USA).

Przygotowanie próbki: rozcieńczanie i filtracja 100 µl próbki moczu, 300 µl wody i 100 µl wzorca wewnętrznego EtG-d5 o stężeniu 0,5 µg/ml zmieszano na worteksie w czystej probówce Starstedt. Dwieście µl próbki przeniesiono do fiolki z powłoką fiolki z filtrem. Tłok z filtrem został całkowicie wsunięty do fiolki z otoczką. Dwadzieścia ul przefiltrowanej próbki wstrzyknięto bezpośrednio do LC-MS/MS.

Kalibratory przygotowano w stężeniach 0,05, 0,1, 0,25, 0,5, 1, 5 i 10 µg/mL, a kontrole jakości w stężeniach 0,15 i 7,5 µg/mL, używając 100 µl ślepej próby moczu, 200 µl wody, 100 µl odpowiedniego roztworu roboczego i 100 µl wewnętrznego roztworu wzorcowego.

Analiza instrumentalna Rozdzielanie chromatograficzne przeprowadzono w systemie Nexera UHPLC (Shimadzu, Columbia, MD, US). System Nexera UHPLC składał się z dwóch binarnych wysokosprawnych pomp do chromatografii cieczowej LC-20AD XR, odgazowywacza online (DGU-20A 3R), chłodzonego autosamplera (SIL-20A XR) oraz pieca (CTO-20AC). Kolumnę stanowiła kolumna Hypercarb (2,1 x 100 mm, 3 urn) firmy Thermo Fisher Scientific. Fazę ruchomą, 0,1% kwas mrówkowy w wodzie (A) i acetonitryl (B), dostarczano z szybkością przepływu 0,3 ml/min. Temperatura kolumny wynosiła 30°C. Gradient rozpoczął się od B przy 5%, a następnie wzrastał do 95% w ciągu 6 minut. B przy 95% utrzymywano przez 0,5 minuty, po czym spadło do 5% i utrzymywano przez 1 minutę. Całkowity czas pracy wyniósł 7,5 minuty.

Spektrometrem mas był potrójny kwadrupol LCMS-8050 firmy Shimadzu wyposażony w źródło jonizacji przez elektrorozpylanie (ESI). Przepływy gazu grzewczego i suszącego wynosiły odpowiednio 15 i 10 l/min, przy przepływie gazu rozpylającego 2 l/min. Temperatura międzyfazowa wynosiła 300°C, a temperatura bloku grzejnego wynosiła 400°C. Wszystkie związki analizowano za pomocą ESI w trybie jonizacji ujemnej, a dla każdego analitu uzyskano dwie przemiany w trybie monitorowania wielu reakcji (MRM).

Analiza statystyczna Analizy statystyczne przeprowadzono stosując Stata wersja 15.1 (StataCorp, College Station, TX). Obliczono statystyki opisowe, aby scharakteryzować dane demograficzne uczestników oraz spożycie alkoholu w T1 i T2. Dokładne testy Fishera zastosowano dla zmiennych kategorialnych z n<15 w dowolnej kategorii, a testy sumy rang Wilcoxona dla zmiennych ciągłych o rozkładzie innym niż normalny w celu zbadania związków dwuwymiarowych między grupami. Wszystkie testy były dwustronne z poziomem istotności 0,05.