Меры по борьбе со злоупотреблением алкоголем у военнослужащих ВМС США, находящихся на действительной службе

Военнослужащие ВМС США были наняты для участия в рандомизированном пилотном испытании по оценке эффективности 3-минутного видео-вмешательства, предназначенного для пропаганды более безопасного употребления алкоголя и уменьшения неблагоприятных последствий употребления алкоголя. Всем субъектам было предоставлено информированное согласие до участия. Поощрение в виде подарочной карты на 5 долларов было предоставлено после завершения T1, а подарочная карта на 10 долларов - после завершения T2. Участие субъектов и данные были анонимными; персональные идентификаторы были собраны для того, чтобы связать выборки и опросы между моментом времени 1 (T1) и моментом времени 2 (T2), но после связывания все данные идентификатора были уничтожены. Чтобы свести к минимуму риск, связанный со сбором личных идентификаторов, мы не сохраняли никаких личных идентификаторов, включая половую категоризацию участников. Субъекты заполняли опрос T1, указав в форме только идентификатор исследования, а затем их попросили предоставить образец мочи.

Образцы мочи были собраны в туалетах на борту корабля. Сборы не отслеживались. Образцы мочи маркировали идентификационным номером субъекта и хранили при температуре 4°C до отправки. Для T1 образцы оставались в холодильнике в течение выходных, так как принимающий персонал не мог быть доступен в течение выходных; в T2 образцы были отправлены на следующий день.

В Т1, после предоставления образца мочи, субъекты вмешательства смотрели 3-минутное видео, в то время как контрольные субъекты покидали зону, не просматривая видео.

После длинных выходных испытуемых попросили вернуться в зону исследования, пройти краткий опрос и сдать второй образец мочи.

Трехминутное видео было создано для этого экспериментального исследования. Один из авторов с опытом работы в области теории прививок (RJD) руководил содержанием видео, которое было подготовлено, срежиссировано и снято в киношколе Нью-Йоркского университета.

Опросы T1 собирали данные о годе рождения (в качестве проверки при связывании данных T1 и T2 в случае ошибки связывания), демографическую информацию, включая расу, статус отношений и уровень оплаты. Дополнительные вопросы включали «были ли у вас когда-либо проблемы с алкоголем?», вопросы AUDIT-C и вопросы о том, произошли ли конфликты, несчастные случаи или другие проблемы в результате употребления алкоголя.

В опросе T2 собраны данные о годе рождения (см. выше), вопросы AUDIT-C (измененные для отражения данных только за предшествующие выходные) и те же вопросы о конфликтах, несчастных случаях или других проблемах, связанных с употреблением алкоголя.

Процедура тестирования EtG Химические вещества и материалы Стандарты этилглюкуронида (EtG) и этилглюкуронида-d5 (EtG-d5) были приобретены в концентрации 1 мг/мл в 1 мл метанола у Cerilliant Corp (Раунд-Рок, Техас, США). Метанол, ацетонитрил и муравьиная кислота для жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХ-МС) и пробирки Sarstedt Inc на 10 мл подкожно 16x100 мм были приобретены у Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, US). Флаконы с нанофильтром ® 0,2 мкм PES с серой крышкой с предварительно прорезанными отверстиями были получены от компании Thomson Instrument Company (Oceanside, Калифорния, США).

Подготовка образца: разбавление и фильтрация Сто мкл образца мочи, 300 мкл воды и 100 мкл внутреннего стандарта EtG-d5 с концентрацией 0,5 мкг/мл перемешивали на вортексе в чистой пробирке Старштедта. Двести мкл образца переносили в ампулу флакона с фильтром. Поршень с фильтром был вставлен до упора в оболочку флакона. Двадцать мкл отфильтрованного образца вводили непосредственно в ЖХ-МС/МС.

Калибраторы готовили в концентрациях 0,05, 0,1, 0,25, 0,5, 1, 5 и 10 мкг/мл, а контроли качества – в концентрациях 0,15 и 7,5 мкг/мл, используя 100 мкл контрольной мочи, 200 мкл воды, 100 мкл соответствующего рабочего раствора и 100 мкл раствора внутреннего стандарта.

Инструментальный анализ Хроматографическое разделение проводили на системе Nexera UHPLC (Shimadzu, Columbia, MD, US). Система УВЭЖХ Nexera состояла из двух бинарных высокопроизводительных жидкостных хроматографических насосов LC-20AD XR, блока дегазации в режиме реального времени (DGU-20A 3R), охлаждаемого автоматического пробоотборника (SIL-20A XR) и печи (CTO-20AC). Колонка представляла собой колонку Hypercarb (2,1×100 мм, 3 мкм) от Thermo Fisher Scientific. Подвижную фазу, 0,1 % муравьиной кислоты в воде (А) и ацетонитриле (В), подавали со скоростью потока 0,3 мл/мин. Температура колонки составляла 30°С. Градиент начинался с В на уровне 5%, затем увеличивался до 95% за 6 мин. B на уровне 95 % удерживался в течение 0,5 мин, после чего уменьшался до 5 %, и удерживался в течение 1 мин. Общее время выполнения составило 7,5 мин.

Масс-спектрометр представлял собой тройной квадруполь LCMS-8050 от Shimadzu, оснащенный источником ионизации электрораспылением (ESI). Потоки нагревающего газа и сушильного газа составляли 15 и 10 л/мин соответственно, а поток распыляющего газа - 2 л/мин. Температура интерфейса составляла 300°С, а температура нагревательного блока – 400°С. Все соединения анализировали с использованием ESI в режиме отрицательной ионизации, и для каждого анализируемого вещества регистрировали два перехода в режиме мониторинга множественных реакций (MRM).

Статистический анализ Статистический анализ проводили с использованием Stata версии 15.1 (StataCorp, College Station, TX). Описательная статистика была рассчитана для характеристики демографических характеристик участников и употребления алкоголя в Т1 и Т2. Точные критерии Фишера использовались для категориальных переменных с n<15 в любой категории, а критерии суммы рангов Уилкоксона для непрерывных переменных с ненормальным распределением для изучения двумерных ассоциаций между группами. Все тесты были двусторонними с уровнем значимости 0,05.