Potenciální role SI00B a mozkového neurotrofického faktoru při předpovídání výsledku použití pulzní radiofrekvence při léčbě pacientů s prolapsem bederní ploténky

METODY:

Všichni pacienti budou podrobeni následujícímu:

1) Klinické hodnocení:

1. Odběr podrobné anamnézy týkající se: trvání bolesti, přítomnosti diskogenní bolesti, radikulární bolesti, odpovědi na lékařskou léčbu nebo předchozí intervenční léčby bolesti
2. Neurologické vyšetření: motorické a senzorické vyšetření

3. Posouzení závažnosti neurologických symptomů před, 2 týdny, 1, 3 a 6 měsíců po intervenčním výkonu lékařem, který bude zaslepen, pokud jde o stav pacienta a typ intervence.

   Modifikované skóre Oswestry Back Disability Score (MODI): Skládalo se z dotazníku indexu postižení dolní části zad o intenzitě bolesti, osobní péči, zvedání, stání, chůzi, sezení, spánku, společenském životě, cestování a zaměstnání/domácnosti. Celkem tedy 10 bodů; každý měl skóre v rozmezí 0-5. Celkové skóre se tedy pohybovalo v rozmezí 0-50. Vysoké skóre MODI ukazuje na závažnější funkční postižení související s bolestí.

   Numeric Rating Scale (NRS-11): Je to stupnice pro hodnocení intenzity bolesti. Pohyboval se od 0 do 10, kde 0 znamená žádnou bolest a 10 znamená nejhorší bolest.

4. Posouzení spokojenosti pacienta s intervencí, 2 týdny, 1, 3 a 6 měsíců po intervenčním výkonu lékařem, který bude zaslepen, pokud jde o stav pacienta a typ intervence.

Krátké hodnocení spokojenosti pacientů (SAPS): Skládá se ze sedmi položek, které hodnotí hlavní oblasti spokojenosti pacientů, mezi něž patří spokojenost s léčbou, vysvětlení výsledků léčby, péče lékaře, účast na lékařském rozhodování, respekt ze strany lékaře, čas strávený s lékařem. a spokojenost s nemocniční/klinickou péčí. Škály odpovědí jsou 5bodové stupnice. Skóre SAPS lze interpretovat následovně: 0 až 10 = velmi nespokojen, 11 až 18 = nespokojen, 19 až 26 = spokojen, 27 až 28 = velmi spokojen.

2) Radiologické vyšetření:

Zobrazování magnetickou rezonancí (MRI):

U všech pacientů zařazených do studie bude provedeno zobrazení lumbosakrální páteře magnetickou rezonancí.

Budou použity následující protokoly:

1. T1- vážené snímky (axiální, sagitální).
2. T2- vážené obrazy (axiální, koronální).
3. Sekvence obnovy tlumené inverze kapalinou (FLAIR). 3) Pulzní radiofrekvence (PRF): PRF ganglion dorzálních kořenů (DRG) bude provedena všem účastníkům této studie. Postupy budou prováděny na operačním sále pod skiaskopickým vedením podle norem radiační bezpečnosti. Zacíleno bude dorzální kořenové ganglion lumbosakrálních kořenů. Pacienti budou umístěni na břiše. Lidokain 1% bude infiltrován v místě vstupu do kůže. Použije se 10 cm, 22-gauge radiofrekvenční jehla s 5 mm zakřivenou aktivní špičkou. Pro potvrzení vhodného umístění bude proveden radikulogram a bude stimulován DRG pro potvrzení příslušného nervového kořene. Blízkost jehly k DRG bude určena vhodnou senzorickou stimulací s 50 Hz (0,4-0,6 V) a motorická stimulace při 2 Hz bude použita k určení prahu 1,5-2,0 krát větší než smyslový práh, aby se zabránilo umístění v blízkosti kořene předního nervu. Pulzní léze se vytvoří aplikací 45 V na DRG po dobu 6 minut při 42 °C.

4) Laboratorní hodnocení

A. Stanovení hladiny mozkového neurotrofického faktoru (BDNF) v séru:

Vzorky žilní krve budou odebrány všem zahrnutým pacientům před intervenčním postupem a ponechány 30 minut pro srážení a poté centrifugovány při 2 000-3 000 otáčkách za minutu po dobu 20 minut. Poté bude sérum odděleno a udržováno pod -80 °C. Hladiny BDNF budou hodnoceny pomocí komerčních sendvičových souprav ELISA. Mikroelisastriptová destička bude předem potažena protilátkou specifickou pro BDNF. Vzorky se přidají do příslušných jamek mikroelisastriptivní destičky a přidají se ke specifické protilátce. Poté se do každé jamky mikroelisastriptivní destičky přidá protilátka konjugovaná s křenovou peroxidázou (HRP) specifická pro BDNF a inkubuje se. Volné komponenty budou smyty. Do každé jamky se přidá roztok substrátu TMB. Pouze ty jamky, které obsahují BDNF a HRP konjugovanou BDNF protilátku, budou vypadat modře a po přidání zastavovacího roztoku se změní na žlutou. Optická hustota (OD) bude měřena spektrofotometricky při vlnové délce 450 nm.

B. Stanovení hladiny S100B v séru:

Všichni účastníci podstoupí kvantitativní hodnocení séra S100B před intervenční procedurou aplikací sendvičové enzymatické imunoabsorpční metody (ELISA). Testy budou prováděny na oddělení klinické a chemické patologie Univerzitní nemocnice Beni-suef na automatizované platformě ELISA. Všem zahrnutým pacientům bude odebráno 5 ml plné krve a vložena do sterilní zkumavky. Vzorky krve budou centrifugovány po dobu dvaceti minut při rychlosti 2000-3000 ot./min. Supernatantové sérum bude shromážděno a skladováno při -20 °C až do doby analýzy. Standard S100B bude dodáván jako 120 mikrolitrů obsahujících 4000 ng/l S100B zředěný standardními ředidly pro vytvoření rozsahu ředění od 0 do 2000 ng/l. Do jamek se přidá 50 ml standardu a jamky se inkubují jednu hodinu při teplotě místnosti. Jamky se třikrát promyjí promývacím roztokem (fyziologický roztok pufrovaný fosfátem, PH je od 7,0 do 7,2). Do každé jamky se přidá 100 ml konjugátu. Každá jamka se znovu pětkrát promyje promývacím roztokem. Do každé jamky se přidá 50 ml substrátu A (konjugát S100B křenová peroxidáza (HRP)), poté se přidá 50 ml substrátu B (substrát pro enzym HRP obsahující malé množství 3,3,5,5 tetramethylbenzidinu) a poté jamky zakryjeme a necháme deset minut při pokojové teplotě. Nakonec se do každé jamky přidá 50 ml zastavovacího roztoku (kyselina sírová). Optická hustota bude odečítána při 450 nm. Standardní křivka bude vytvořena pomocí statistického softwaru.