Il ruolo potenziale di SI00B e del fattore neurotrofico derivato dal cervello nella previsione dell'esito dell'uso della radiofrequenza pulsata nel trattamento di pazienti con prolasso del disco lombare

METODI:

Tutti i pazienti saranno sottoposti a quanto segue:

1) Valutazione clinica:

1. Anamnesi dettagliata relativa a: durata del dolore, presenza di dolore discogenico, dolore radicolare, risposta al trattamento medico o precedente gestione interventistica del dolore
2. Esame neurologico: esame motorio e sensoriale

3. Valutazione della gravità dei sintomi neurologici prima, 2 settimane, 1, 3 e 6 mesi dopo la procedura interventistica da parte di un medico che sarà all'oscuro delle condizioni del paziente e del tipo di intervento.

   Modificato Oswestry Back Disability Score (MODI): Consisteva in un questionario sull'indice di disabilità della lombalgia sull'intensità del dolore, la cura personale, il sollevamento, la posizione eretta, la camminata, la seduta, il sonno, la vita sociale, i viaggi e l'occupazione/casa. Quindi, totale 10 punti; ognuno aveva un intervallo di punteggio compreso tra 0 e 5. Quindi, il punteggio totale era compreso tra 0 e 50. Un punteggio MODI alto indica una disabilità funzionale più grave correlata al dolore.

   Numeric Rating Scale (NRS-11): è una scala per la valutazione dell'intensità del dolore. Variava da 0 a 10, dove 0 indica nessun dolore e 10 indica il dolore peggiore.

4. Valutazione della soddisfazione del paziente in merito all'intervento, 2 settimane, 1, 3 e 6 mesi dopo la procedura interventistica da parte di un medico che sarà all'oscuro delle condizioni del paziente e del tipo di intervento.

La valutazione breve della soddisfazione del paziente (SAPS): consiste in sette elementi che valutano i domini fondamentali della soddisfazione del paziente che includono la soddisfazione del trattamento, la spiegazione dei risultati del trattamento, l'assistenza del medico, la partecipazione al processo decisionale medico, il rispetto da parte del medico, il tempo trascorso con il medico e soddisfazione per le cure ospedaliere/cliniche. Le scale di risposta sono scale a 5 punti. I punteggi SAPS possono essere interpretati come segue: da 0 a 10 = molto insoddisfatto, da 11 a 18 = insoddisfatto, da 19 a 26 = soddisfatto, da 27 a 28 = molto soddisfatto.

2) Valutazione radiologica:

Imaging a risonanza magnetica (MRI):

Verrà eseguita la risonanza magnetica del rachide lombosacrale per tutti i pazienti inclusi nello studio.

Verranno utilizzati i seguenti protocolli:

1. Immagini pesate in T1 (assiali, sagittali).
2. Immagini pesate in T2 (assiali, coronali).
3. Sequenza FLAIR (Fluid Attenuated Inversion Recovery). 3) Radiofrequenza pulsata (PRF): PRF del ganglio della radice dorsale (DRG) verrà eseguito a tutti i partecipanti a questo studio. Le procedure saranno eseguite in sala operatoria sotto guida fluoroscopica seguendo gli standard di radioprotezione. Sarà preso di mira il ganglio della radice dorsale delle radici lombosacrali. I pazienti saranno posizionati proni. La lidocaina 1% sarà infiltrata nel sito di ingresso della pelle. Verrà utilizzato un ago per radiofrequenza da 10 cm, calibro 22 con punta attiva curva da 5 mm. Verrà eseguito un radicologramma per confermare il posizionamento appropriato e il DRG verrà stimolato per confermare la corretta radice nervosa coinvolta. La vicinanza dell'ago al DRG sarà determinata da un'appropriata stimolazione sensoriale con 50 Hz (0,4-0,6 V) e la stimolazione motoria a 2 Hz sarà utilizzata per determinare una soglia 1,5-2,0 volte maggiore della soglia sensoriale per evitare il posizionamento vicino alla radice del nervo anteriore. Verrà generata una lesione pulsata applicando 45 V al DRG per 6 minuti a 42°C.

4) Valutazione di laboratorio

A. Valutazione del livello sierico del fattore neurotrofico derivato dal cervello (BDNF):

I campioni di sangue venoso verranno prelevati da tutti i pazienti inclusi prima della procedura interventistica e conservati per 30 minuti per la coagulazione, quindi centrifugati a 2.000-3.000 rpm per 20 minuti. Quindi, il siero sarà separato e mantenuto sotto -80 c. I livelli di BDNF saranno valutati utilizzando kit ELISA-sandwich commerciali. La piastra Microelisastripplate sarà pre-rivestita con un anticorpo specifico per il BDNF. I campioni verranno aggiunti ai pozzetti appropriati della piastra Microelisastrip e uniti all'anticorpo specifico. Quindi un anticorpo coniugato con perossidasi di rafano (HRP) specifico per BDNF verrà aggiunto a ciascun pozzetto di 'Microelisastripplate e incubato. I componenti liberi verranno lavati via. La soluzione di substrato TMB verrà aggiunta a ciascun pozzetto. Solo i pozzetti che contengono l'anticorpo BDNF coniugato con BDNF e HRP appariranno blu e poi vireranno al giallo dopo l'aggiunta della soluzione di arresto. La densità ottica (OD) sarà misurata spettrofotometricamente alla lunghezza d'onda di 450 nm.

B. Valutazione del livello sierico di S100B:

Tutti i partecipanti saranno sottoposti a valutazione quantitativa del siero S100B prima della procedura interventistica applicando una tecnica di analisi immunoassorbente legata all'enzima sandwich (ELISA). I test saranno eseguiti presso il dipartimento di patologia clinica e chimica, ospedale universitario Beni-suef su una piattaforma ELISA automatizzata. Cinque ml di sangue intero verranno prelevati da tutti i pazienti inclusi e inseriti in una provetta sterile. I campioni di sangue verranno centrifugati per venti minuti ad una velocità di 2000-3000 giri/min. Il siero surnatante sarà raccolto e conservato a -20 C fino al momento dell'analisi. Lo standard di S100B verrà fornito come 120 microlitri contenenti 4000 ng/L di S100B diluiti con diluenti standard per generare un intervallo di diluizione da 0 a 2000 ng/L. Cinquanta mL di standard saranno aggiunti ai pozzetti, saranno incubati per un'ora a temperatura ambiente. I pozzetti saranno lavati tre volte con soluzione di lavaggio (soluzione salina tamponata con fosfato, PH compreso tra 7.0 e 7.2). Verranno aggiunti 100 mL di coniugato per ciascun pozzetto. Ciascun pozzetto sarà nuovamente lavato con la soluzione di lavaggio cinque volte. Cinquanta mL di substrato A (S100B coniugato di perossidasi di rafano (HRP)) verranno aggiunti a ciascun pozzetto seguiti dall'aggiunta di cinquanta mL di substrato B (substrato per l'enzima HRP contenente una piccola quantità di 3,3,5,5 tetrametilbenzidina) quindi i pozzetti sarà coperto e lasciato a temperatura ambiente per dieci minuti. Infine, in ciascun pozzetto verranno aggiunti cinquanta mL di soluzione di arresto (acido solforico). La densità ottica sarà letta a 450 nm. La curva standard sarà costruita utilizzando un software statistico.