Genetický vliv genetických faktorů ovlivňujících účinnost desmopresinu u mírné/střední hemofilie A (GIDEMHA)

GIDEMHA je observační, retrospektivní a multicentrická klinicko-biologická studie prováděná v centrech pro léčbu hemofilie (HTC) ve francouzském meziregionu Grand-Ouest včetně HTCs of Angers, Brest, Caen, Nantes, Rennes a Tours.

Cíle studie GIDEMHA jsou:

• Popis farmakokinetiky (PK) FVIII po desmopresinu (DDAVP) u velké retrospektivní kohorty pacientů s mírnou/střední HA,
• Výzkum faktorů souvisejících s pacienty, které ovlivňují tuto FVIII PK,
• Tvorba prediktivních populačních a Bayesovských modelů

Kritéria pro zařazení:

• Muži v jakémkoli věku s mírnou nebo středně těžkou hemofilií
• Terapeutický test s DDAVP realizovaný od roku 2010,
• Měření hladin faktoru VIII bylo provedeno nejméně dvakrát během terapeutického testu, těsně před infuzí DDAVP a 30 nebo 60 minut po,
• Kompletní genotypizace genu F8 pro genetickou diagnostiku hemofilie

Kritéria vyloučení:

• Pacienti s inhibitorem faktoru VIII
• Odmítnutí účasti ve studii
• Nerozumím francouzskému dopisu o nesouhlasu a informacím ve studii

Popis terapeutických testů DDAVP:

Postup terapeutického testu DDAVP byl identický pro všechna zkoušející centra podle doporučení mezinárodních a francouzských guidelines. DDAVP byl vždy podáván intravenózně v dávce 0,3-0,4 μg.kg-1 zředěný v 50 ml fyziologického roztoku po dobu 30 minut. Bylo požadováno, aby hemostatické parametry byly vyhodnoceny před a alespoň 30 nebo 60 minut po infuzi DDAVP. Následná měření provedená v T2h, T4h a T6h po infuzi se také zaznamenají během testu.

Shromážděná data:

Všechna data shromážděná v této studii byla získána z lékařské dokumentace v okamžiku terapeutického testu DDAVP. Obsahují:

• Hladiny aktivity FVIII měřené jednostupňovým testem srážení z plazmy odebrané v 0,109 M citrátu sodném (čerstvém nebo skladovaném při -80 °C). Tyto hladiny FVIII byly měřeny těsně před a po infuzi DDAVP (do 24 hodin, pokud byla k dispozici).
• Molekulární analýza genu F8.
• Krevní skupina
• DDAVP dávky
• Hladiny von Willebrandova faktoru během testu DDAVP
• Stáří
• Hmotnost
• Polymorfismy genů ovlivňujících clearance FVIII, pokud jsou k dispozici
• Hladiny DDAVP v krvi po infuzích DDAVP (pouze pro pacienty s HTC z Rennes a zahrnuto během posledních 5 let)

Farmakodynamické parametry před/po DDAVP Následující farmakokinetické parametry byly vypočteny pomocí aktivity FVIII v závislosti na čase: bazální FVIII, vrchol FVIII (nejvyšší hladina naměřená po podání DDAVP), zotavení FVIII (recFVIII= vrchol FVIII / bazální FVIII), poločas rozpadu FVIII ( FVIII T1/2) a clearance a FVIII plocha pod křivkou (FVIII AUC). Všechny parametry kromě T1/2 byly odhadnuty pomocí nekompartmentové metody. AUC FVIII byla vypočtena pomocí lichoběžníkového tvaru z aktivity FVIII proti době dávkování extrapolované na základní linii na základě poslední pozorované koncentrace.

Rychlostní konstanta eliminace (Ke) byla vypočtena pomocí jednokompartmentového modelu s následující rovnicí: C=C0*e(-Ke.t) kde C, CO, Ke a t označují v tomto pořadí post-DDAVP aktivitu FVIII, maximální aktivitu FVIII, konstantu rychlosti eliminace a čas po podání DDAVP. Statistika dobré shody pro konečnou eliminační fázi byla upravena pro počet bodů použitých při odhadu Ke a pouze ty R2>0,90 byly uchovány pro další analýzy. FVIII T1/2 byl vypočten jako Ln(2)/Ke. T1/2 a AUC byly vypočteny pouze tehdy, pokud byly hladiny FVIII měřeny alespoň ve 4 různých časech, přičemž byly dostupné bazální a maximální hladiny FVIII. Pro ověření metody výzkumníci provedli 2 další měření FVIII (ve 12 h a 24 h) u posledních 10 zařazených pacientů. To umožnilo porovnat FVIII T1/2 získaný z 5 bodů (od T0 do T6h) s FVIII získaným ze 7 bodů (od T0 do T24h).

Skóre pro měření odezvy na DDAVP

Ke kvalitativnímu posouzení biologické odpovědi na DDAVP výzkumníci použili kritéria dříve publikovaná Stoofem et al [11]:

• Absolutní odpověď byla buď „úplná“ (vrchol FVIII ≥0,5 IU.mL-1), „částečná“ (FVIII ≥0,3 – <0,5 IU.mL-1) nebo „nulová“ (FVIII <0,3 IU.mL-1) .
• Relativní odpověď byla definována jako "úplná" (recFVIII >3), "částečná" (recFVIII ≥2 - <3) nebo "nulová" (recFVIII <2).

Dvě další skóre, absolutní trvání a relativní trvání, byla vytvořena pro určení vývoje DDAVP odezvy v průběhu času. Také zahrnovaly každé 3 skupiny (krátkou, střední a dlouhou) na základě údajů shromážděných od všech zahrnutých pacientů, s alespoň 20 % pacientů na skupinu:

• Absolutní trvání určilo dobu, po kterou byla hladina FVIII ≥ 0,5 IU.mL-1 po vrcholu FVIII. Bylo to buď "krátké" (≤3h), "střední" (>3h - ≤6h) nebo "dlouhé" (>6h).
• Relativní trvání odpovídalo FVIII T1/2 a bylo buď "krátké" (≤3h), "střední" (>3h - <5h) nebo "dlouhé" (≥5h).

Tato 4 skóre byla stanovena pro všechny pacienty, ale statistické analýzy podle mutace byly provedeny pouze pro tzv. „hot spot“ mutace F8, definované jako ≥5 pacientů s podobným defektem genu.

Statistické analýzy Popisné charakteristiky byly analyzovány s mediánovými hodnotami, jejich 25-75% mezikvartilovými rozsahy (IQR) a minimálními-maximálními hodnotami (MIN-MAX). K porovnání spojitých proměnných mezi skupinami byly použity neparametrické Kruskal-Wallisovy a Mann-Whitneyho testy. Pro porovnání podílů v kontingenčních tabulkách byl proveden Fisherův přesný test a byl vypočítán poměr šancí. Pro párové srovnání spojitých hodnot byla použita jednorozměrná lineární logistická regrese. Křivky přežití s ​​FVIII ≥0,5 IU.mL-1 různých F8 hot spot mutací byly porovnány Kaplan-Meierovou metodou. Pro kvalitativní hodnoty AR a AD 4 skupin mutací byly vypočteny pozitivní prediktivní hodnota (PPV), negativní prediktivní hodnota (NPV), senzitivita a specificita. Pro každou statistickou analýzu byl stanoven přibližný 95% interval spolehlivosti (95% CI) a p-hodnota <0,05 byla považována za statisticky významnou. SPSS 17.0 (SPSS Inc. Chicago, IL, USA) a GraphPad 5.0 (Prism Software Inc. San Diego CA) byly použity k provedení statistických analýz.