Genetischer Einfluss genetischer Faktoren, die die Wirksamkeit von Desmopressin bei leichter/mittelschwerer Hämophilie A beeinflussen (GIDEMHA)

GIDEMHA ist eine beobachtende, retrospektive und multizentrische klinisch-biologische Studie, die in den Hämophilie-Behandlungszentren (HTC) der französischen Interregion Grand-Ouest durchgeführt wurde, darunter die HTCs von Angers, Brest, Caen, Nantes, Rennes und Tours.

Ziele der GIDEMHA-Studie sind:

• Beschreibung der FVIII-Pharmakokinetik (PK) nach Desmopressin (DDAVP) in einer großen retrospektiven Kohorte von Patienten mit leichter/mittelschwerer HA,
• Erforschung von patientenbezogenen Faktoren, die diese FVIII-PK beeinflussen,
• Erstellung von prädiktiven Populations- und Bayes-basierten Modellen

Einschlusskriterien:

• Männer jeden Alters mit einer leichten oder mittelschweren Hämophilie
• Therapeutischer Test mit DDAVP seit 2010 durchgeführt,
• Faktor-VIII-Spiegelmessungen mindestens zweimal während des therapeutischen Tests, kurz vor der DDAVP-Infusion und 30 oder 60 Minuten danach,
• Vollständige Genotypisierung des F8-Gens zur genetischen Diagnose von Hämophilie

Ausschlusskriterien:

• Patienten mit einem Anti-Faktor-VIII-Hemmer
• Ablehnung der Teilnahme an der Studie
• Unfähig, das französische Nichteinspruchsschreiben und die Informationen der Studie zu verstehen

Beschreibung der DDAVP-Therapietests:

Das Verfahren des DDAVP-Therapietests war für alle Prüfzentren identisch, wie es von internationalen und französischen Richtlinien empfohlen wird. DDAVP wurde immer intravenös in einer Dosis von 0,3–0,4 verabreicht μg.kg-1 verdünnt in 50 ml Kochsalzlösung über 30 Minuten. Hämostatische Parameter mussten vor und mindestens 30 oder 60 Minuten nach der DDAVP-Infusion bestimmt worden sein. Nachfolgende Messungen, die um T2h, T4h und T6h nach der Infusion durchgeführt werden, werden ebenfalls während des Tests aufgezeichnet.

Gesammelte Daten:

Alle in dieser Studie erhobenen Daten stammen aus den Krankenakten zum Zeitpunkt des DDAVP-Therapietests. Sie beinhalten:

• FVIII-Aktivitätsniveaus, gemessen mit einem einstufigen Gerinnungsassay aus Plasma, gesammelt in 0,109 M Natriumcitrat (frisch oder bei -80 °C gelagert). Diese FVIII-Spiegel wurden kurz vor und nach der DDAVP-Infusion (bis 24 Stunden, falls verfügbar) gemessen.
• Molekulare Analyse des F8-Gens.
• Blutgruppe
• DDAVP-Dosen
• Von-Willebrand-Faktorwerte während des DDAVP-Tests
• Alter
• Gewicht
• Polymorphismen von Genen, die die FVIII-Clearance beeinflussen, falls verfügbar
• Blut-DDAVP-Spiegel nach DDAVP-Infusionen (nur für Patienten des HTC von Rennes und eingeschlossen während der letzten 5 Jahre)

Pharmakodynamische Parameter vor/nach DDAVP Die folgenden pharmakokinetischen Parameter wurden unter Verwendung der FVIII-Aktivität gegen die Zeit berechnet: Basal-FVIII, FVIII-Peak (höchster gemessener Wert nach DDAVP-Verabreichung), FVIII-Erholung (recFVIII = Peak-FVIII / Basal-FVIII), FVIII-Halbwertszeit ( FVIII T1/2) und Clearance und FVIII-Fläche unter der Kurve (FVIII-AUC). Alle Parameter mit Ausnahme von T1/2 wurden unter Verwendung der Nicht-Kompartiment-Methode geschätzt. Die FVIII-AUC wurde anhand der Trapezform aus der FVIII-Aktivität gegen die Dosierungszeit, extrapoliert auf den Ausgangswert, basierend auf der zuletzt beobachteten Konzentration, berechnet.

Die Eliminationsratenkonstante (Ke) wurde unter Verwendung eines Ein-Kompartiment-Modellansatzes mit der folgenden Gleichung berechnet: C=C0*e(-Ke.t) wobei C, C0, Ke und t jeweils die Post-DDAVP-FVIII-Aktivität, die Spitzen-FVIII-Aktivität, die Eliminationsgeschwindigkeitskonstante und die Zeit nach der DDAVP-Verabreichung bezeichnen. Die Statistik der Anpassungsgüte für die abschließende Eliminationsphase wurde um die Anzahl der Punkte angepasst, die bei der Schätzung von Ke verwendet wurden, und nur jene R2 > 0,90 wurden für weitere Analysen aufbewahrt. FVIII T1/2 wurde als Ln(2)/Ke berechnet. T1/2 und AUC wurden nur berechnet, wenn die FVIII-Spiegel zu mindestens 4 verschiedenen Zeitpunkten gemessen wurden und die Basal- und Spitzen-FVIII-Spiegel verfügbar waren. Um die Methode zu validieren, führten die Prüfärzte 2 zusätzliche FVIII-Messungen (um 12 Uhr und 24 Uhr) bei den letzten 10 eingeschlossenen Patienten durch. Dies ermöglichte den Vergleich des von 5 Punkten (von T0 bis T6h) erhaltenen FVIII T1/2 mit dem von 7 Punkten (von T0 bis T24h) erhaltenen.

Scores zur Messung der Reaktion auf DDAVP

Um die biologische Reaktion auf DDAVP qualitativ zu beurteilen, verwendeten die Forscher zuvor von Stoof et al. [11] berichtete Kriterien:

• Das absolute Ansprechen war entweder „vollständig“ (FVIII-Spitzenwert ≥0,5 IE.ml-1), „partiell“ (FVIII ≥0,3 – <0,5 IE.ml-1) oder „Null“ (FVIII <0,3 IE.ml-1). .
• Das relative Ansprechen wurde als „vollständig“ (recFVIII > 3), „partiell“ (recFVIII ≥ 2 – < 3) oder „null“ (recFVIII < 2) definiert.

Zwei weitere Scores, absolute Dauer und relative Dauer, wurden erstellt, um die zeitliche Entwicklung der DDAVP-Antwort zu bestimmen. Sie umfassten auch jeweils 3 Gruppen (kurz, mittel und lang), basierend auf den Daten, die von allen eingeschlossenen Patienten gesammelt wurden, mit mindestens 20 % der Patienten pro Gruppe:

• Die absolute Dauer bestimmt die Zeit, in der der FVIII-Spiegel nach dem FVIII-Peak ≥ 0,5 IU.mL-1 war. Sie war entweder „kurz“ (≤3h), „mittel“ (>3h – ≤6h) oder „lang“ (>6h).
• Die relative Dauer entsprach dem FVIII T1/2 und war entweder "kurz" (≤3h), "mittel" (>3h - <5h) oder "lang" (≥5h).

Diese 4 Scores wurden für alle Patienten bestimmt, aber statistische Analysen nach Mutationen wurden nur für die sogenannten "Hot-Spot"-F8-Mutationen durchgeführt, definiert als ≥ 5 Patienten mit einem ähnlichen Gendefekt.

Statistische Analysen Beschreibende Merkmale wurden mit Medianwerten, ihren 25-75%-Quartilsabständen (IQR) und Minimal-Maximal-Werten (MIN-MAX) analysiert. Nichtparametrische Kruskal-Wallis- und Mann-Whitney-Tests wurden verwendet, um kontinuierliche Variablen zwischen den Gruppen zu vergleichen. Fishers exakter Test wurde durchgeführt, um Anteile in Kontingenztabellen zu vergleichen, und das Quotenverhältnis wurde berechnet. Für den paarweisen Vergleich kontinuierlicher Werte wurde eine univariate lineare logistische Regression verwendet. Überlebenskurven mit FVIII ≥0,5 IU.mL-1 verschiedener F8-Hotspot-Mutationen wurden mit der Kaplan-Meier-Methode verglichen. Für qualitative Werte von AR und AD der 4 Mutationsgruppen wurden positiver prädiktiver Wert (PPV), negativer prädiktiver Wert (NPV), Sensibilität und Spezifität berechnet. Für jede statistische Analyse wurde ein ungefähres 95-%-Konfidenzintervall bestimmt (95-%-KI), und ein p-Wert < 0,05 wurde als statistisch signifikant betrachtet. SPSS 17.0 (SPSS Inc. Chicago, IL, USA) und GraphPad 5.0 (Prism Software Inc. San Diego CA) wurden verwendet, um die statistischen Analysen durchzuführen.