Genetisk indflydelse af genetiske faktorer, der påvirker desmopressinets effektivitet ved mild/moderat hæmofili A (GIDEMHA)

GIDEMHA er en observationel, retrospektiv og multicentrisk klinisk-biologisk undersøgelse udført i Hemophilia Treatment Centres (HTC) i den franske Grand-Ouest interregion, herunder HTC'er i Angers, Brest, Caen, Nantes, Rennes og Tours.

Målene for GIDEMHA-undersøgelsen er:

• Beskrivelse af post-desmopressin (DDAVP) FVIII farmakokinetik (PK) i en stor retrospektiv kohorte af patienter med mild/moderat HA,
• Forskning af patientrelaterede faktorer, der påvirker denne FVIII PK,
• Opbygning af prædiktive befolknings- og Bayesiansk-baserede modeller

Inklusionskriterier:

• Mænd i alle aldre med mild eller moderat hæmofili
• Terapeutisk test med DDAVP realiseret siden 2010,
• Målinger af faktor VIII-niveauer realiseret mindst 2 gange under den terapeutiske test, lige før DDAVP-infusionen og 30 eller 60 minutter efter,
• Komplet genotypebestemmelse af F8-genet til genetisk diagnose af hæmofili

Eksklusionskriterier:

• Patienter med en anti-faktor VIII-hæmmer
• Afvisning af at deltage i undersøgelsen
• Ude af stand til at forstå undersøgelsens franske skrivelse om ikke-modsigelse og information

Beskrivelse af DDAVP terapeutiske tests:

Proceduren for den terapeutiske DDAVP-test var identisk for alle investigatorcentre som anbefalet af internationale og franske retningslinjer. DDAVP blev altid administreret intravenøst ​​i en dosis på 0,3-0,4 μg.kg-1 fortyndet i 50 ml saltvandsopløsning over 30 minutter. Hæmostatiske parametre skulle være blevet evalueret før og mindst 30 eller 60 minutter efter DDAVP-infusionen. Efterfølgende målinger udført ved T2h, T4h og T6h efter infusionen registreres også under testen.

Indsamlede data:

Alle data indsamlet i denne undersøgelse blev udstedt fra de medicinske filer på tidspunktet for den terapeutiske DDAVP-test. De omfatter:

• FVIII-aktivitetsniveauer målt med et et-trins koagulationsassay fra plasmaer opsamlet i 0,109 M natriumcitrat (frisk eller opbevaret ved -80°C). Disse FVIII-niveauer blev målt lige før og efter DDAVP-infusionen (indtil 24 timer, hvis tilgængelig).
• Molekylær analyse af F8-genet.
• Blodgruppe
• DDAVP doser
• Von Willebrand faktorniveauer under DDAVP-testen
• Alder
• Vægt
• Polymorfier af gener, der påvirker FVIII-clearancen, hvis tilgængelig
• DDAVP-niveauer i blodet efter DDAVP-infusioner (kun for patienter med HTC of Rennes og inkluderet i løbet af de sidste 5 år)

Præ/Post-DDAVP farmakodynamiske parametre Følgende farmakokinetiske parametre blev beregnet ved hjælp af FVIII aktivitet versus tid: basal FVIII, FVIII top (højeste niveau målt efter DDAVP administration), FVIII genvinding (recFVIII = top FVIII / basal FVIII), FVIII halveringstid ( FVIII T1/2) og clearance og FVIII-areal under kurven (FVIII AUC). Alle parameter undtagen T1/2 blev estimeret ved hjælp af ikke-kompartmentel metode. FVIII AUC blev beregnet under anvendelse af den trapezformede fra FVIII aktivitet versus doseringstid ekstrapoleret til baseline, baseret på den sidst observerede koncentration.

Elimineringshastighedskonstanten (Ke) blev beregnet ved hjælp af en-kompartment model tilgang med følgende ligning: C=C0*e(-Ke.t) hvor C, C0, Ke og t angiver henholdsvis post-DDAVP FVIII-aktiviteten, maksimal FVIII-aktivitet, eliminationshastighedskonstanten og tiden efter DDAVP-administration. Goodness of fit-statistik for den terminale elimineringsfase blev justeret for antallet af point, der blev brugt i estimeringen af ​​Ke, og kun de R2>0,90 blev bevaret til yderligere analyser. FVIII T1/2 blev beregnet som Ln(2)/Ke. T1/2 og AUC blev kun beregnet, hvis FVIII-niveauer blev målt på mindst 4 forskellige tidspunkter, hvor basale og maksimale FVIII-niveauer var tilgængelige. For at validere metoden udførte efterforskerne 2 yderligere FVIII-målinger (ved 12 timer og 24 timer) hos de sidste 10 indrullerede patienter. Dette gjorde det muligt at sammenligne FVIII T1/2 opnået fra 5 point (fra TO til T6h) med det opnået fra 7 point (fra TO til T24h).

Scorer for at måle responsen på DDAVP

For kvalitativt at vurdere den biologiske respons på DDAVP brugte efterforskerne kriterier, der tidligere er rapporteret af Stoof et al [11]:

• Det absolutte respons var enten "komplet" (peak FVIII ≥0,5 IE.mL-1), "delvis" (FVIII ≥0,3 - <0,5 IE.mL-1) eller "nul" (FVIII <0,3 IE.mL-1) .
• Den relative respons blev defineret som "komplet" (recFVIII >3), "delvis" (recFVIII ≥2 - <3) eller "nul" (recFVIII <2).

To andre scores, absolut varighed og relativ varighed, blev bygget til at bestemme udviklingen af ​​DDAVP-responset over tid. De omfattede også hver 3 grupper (kort, mellem og lang) baseret på data indsamlet fra alle inkluderede patienter, med mindst 20 % af patienterne pr. gruppe:

• Den absolutte varighed bestemte den tid, hvor FVIII-niveauet var ≥ 0,5 IU.mL-1 efter FVIII-toppen. Den var enten "kort" (≤3 timer), "middel" (>3 timer - ≤6 timer) eller "lang" (>6 timer).
• Den relative varighed svarede til FVIII T1/2 og var enten "kort" (≤3 timer), "middel" (>3 timer - <5 timer) eller "lang" (≥5 timer).

Disse 4 scores blev bestemt for alle patienter, men statistiske analyser ved mutation blev kun udført for de såkaldte "hot spot" F8-mutationer, defineret som ≥5 patienter med en lignende gendefekt.

Statistiske analyser Beskrivende karakteristika blev analyseret med medianværdier, deres 25-75 % interkvartile områder (IQR) og minimum-maksimum værdier (MIN-MAX). Ikke-parametriske Kruskal-Wallis og Mann-Whitney tests blev brugt til at sammenligne kontinuerte variable mellem grupperne. Fishers eksakte test blev udført for at sammenligne proportioner i beredskabstabeller, og oddsforholdet blev beregnet. En univariat lineær logistisk regression blev brugt til den parrede sammenligning af kontinuerte værdier. Overlevelseskurver med FVIII ≥0,5 IU.mL-1 af forskellige F8 hot spot mutationer blev sammenlignet ved Kaplan-Meier metoden. For kvalitative værdier af AR og AD i de 4 mutationsgrupper blev positiv prædiktiv værdi (PPV), negativ prædiktiv værdi (NPV), sensibilitet og specificitet beregnet. Et omtrentligt 95 % konfidensinterval blev bestemt (95 % CI) for hver statistisk analyse, og en p-værdi <0,05 blev betragtet som statistisk signifikant. SPSS 17.0 (SPSS Inc. Chicago, IL, USA) og GraphPad 5.0 (Prism Software Inc. San Diego CA) blev brugt til at udføre de statistiske analyser.