Genetisk påvirkning av genetiske faktorer som påvirker desmopressinets effekt ved mild/moderat hemofili A (GIDEMHA)

GIDEMHA er en observasjonsmessig, retrospektiv og multisentrisk klinisk-biologisk studie utført i Hemophilia Treatment Centers (HTC) i den franske Grand-Ouest interregionen inkludert HTCs av Angers, Brest, Caen, Nantes, Rennes og Tours.

Målene for GIDEMHA-studien er:

• Beskrivelse av post-desmopressin (DDAVP) FVIII farmakokinetikk (PK) i en stor retrospektiv kohort av pasienter med mild/moderat HA,
• Forskning av pasientrelaterte faktorer som påvirker denne FVIII PK,
• Bygging av prediktive populasjons- og Bayesiansk-baserte modeller

Inklusjonskriterier:

• Menn i alle aldre med mild eller moderat hemofili
• Terapeutisk test med DDAVP realisert siden 2010,
• Faktor VIII-nivåmålinger realisert minst 2 ganger under den terapeutiske testen, like før DDAVP-infusjonen og 30 eller 60 minutter etter,
• Fullstendig genotyping av F8-genet for genetisk diagnose av hemofili

Ekskluderingskriterier:

• Pasienter med en anti-faktor VIII-hemmer
• Avslag på å delta i studien
• Kan ikke forstå studiens franske brev om ikke-motstand og informasjon

Beskrivelse av DDAVP terapeutiske tester:

Prosedyren for den terapeutiske DDAVP-testen var identisk for alle etterforskersentre som anbefalt av internasjonale og franske retningslinjer. DDAVP ble alltid administrert intravenøst ​​i en dose på 0,3-0,4 μg.kg-1 fortynnet i 50 mL saltvannsløsning over 30 minutter. Hemostatiske parametere måtte ha blitt evaluert før og minst 30 eller 60 minutter etter DDAVP-infusjonen. Påfølgende målinger utført ved T2h, T4h og T6h etter infusjonen blir også registrert under testen.

Innsamlede data:

Alle data samlet inn i denne studien ble utstedt fra de medisinske filene i øyeblikket av den terapeutiske DDAVP-testen. De inkluderer:

• FVIII-aktivitetsnivåer målt med en ett-trinns koagulasjonsanalyse fra plasma samlet i 0,109 M natriumcitrat (fersk eller lagret ved -80°C). Disse FVIII-nivåene ble målt like før og etter DDAVP-infusjonen (inntil 24 timer hvis tilgjengelig).
• Molekylær analyse av F8-genet.
• Blod gruppe
• DDAVP doser
• Von Willebrand faktornivåer under DDAVP-testen
• Alder
• Vekt
• Polymorfismer av gener som påvirker FVIII-clearance hvis tilgjengelig
• DDAVP-nivåer i blodet etter DDAVP-infusjoner (kun for pasienter med HTC of Rennes og inkludert i løpet av de siste 5 årene)

Pre/Post-DDAVP farmakodynamiske parametere Følgende farmakokinetiske parametere ble beregnet ved bruk av FVIII-aktivitet versus tid: basal FVIII, FVIII-topp (høyeste nivå målt etter DDAVP-administrasjon), FVIII-gjenoppretting (recFVIII= topp FVIII / basal FVIII), FVIII-halveringstid ( FVIII T1/2) og clearance, og FVIII-areal under kurven (FVIII AUC). Alle parametere unntatt T1/2 ble estimert ved bruk av ikke-kompartmentbasert metode. FVIII AUC ble beregnet ved bruk av trapes fra FVIII-aktivitet versus doseringstid ekstrapolert til baseline, basert på den siste observerte konsentrasjonen.

Elimineringshastighetskonstanten (Ke) ble beregnet ved bruk av en-kompartment modell tilnærming med følgende ligning: C=C0*e(-Ke.t) hvor C, C0, Ke og t angir henholdsvis post-DDAVP FVIII-aktivitet, topp FVIII-aktivitet, eliminasjonshastighetskonstanten og tid etter DDAVP-administrering. Goodness of fit-statistikk for den terminale eliminasjonsfasen ble justert for antall poeng brukt i estimeringen av Ke, og bare de R2>0,90 ble bevart for videre analyser. FVIII T1/2 ble beregnet som Ln(2)/Ke. T1/2 og AUC ble kun beregnet hvis FVIII-nivåer ble målt ved minst 4 forskjellige tidspunkter, med basale og maksimale FVIII-nivåer tilgjengelig. For å validere metoden, utførte etterforskerne 2 ekstra FVIII-målinger (ved 12 timer og 24 timer) hos de siste 10 pasientene som ble registrert. Dette gjorde det mulig å sammenligne FVIII T1/2 oppnådd fra 5 poeng (fra T0 til T6h) med den oppnådd fra 7 poeng (fra TO til T24h).

Poeng for å måle responsen på DDAVP

For å kvalitativt vurdere den biologiske responsen på DDAVP, brukte etterforskerne kriterier tidligere rapportert av Stoof et al [11]:

• Den absolutte responsen var enten "fullstendig" (topp FVIII ≥0,5 IE.mL-1), "delvis" (FVIII ≥0,3 - <0,5 IE.mL-1) eller "null" (FVIII <0,3 IE.mL-1) .
• Den relative responsen ble definert som "fullstendig" (recFVIII >3), "delvis" (recFVIII ≥2 - <3) eller "null" (recFVIII <2).

To andre skårer, absolutt varighet og relativ varighet, ble bygget for å bestemme utviklingen av DDAVP-responsen over tid. De omfattet også hver 3 grupper (kort, middels og lang) basert på dataene samlet inn fra alle pasienter inkludert, med minst 20 % av pasientene per gruppe:

• Den absolutte varigheten bestemte tiden da FVIII-nivået var ≥ 0,5 IU.mL-1 etter FVIII-toppen. Den var enten "kort" (≤3t), "middels" (>3t - ≤6t), eller "lang" (>6t).
• Den relative varigheten tilsvarte FVIII T1/2 og var enten "kort" (≤3t), "middels" (>3t - <5t) eller "lang" (≥5t).

Disse 4 skårene ble bestemt for alle pasienter, men statistiske analyser ved mutasjon ble kun utført for de såkalte "hot spot" F8-mutasjonene, definert som ≥5 pasienter med en lignende genfeil.

Statistiske analyser Beskrivende egenskaper ble analysert med medianverdier, deres 25-75 % interkvartile områder (IQR) og minimum-maksimumsverdier (MIN-MAX). Ikke-parametriske Kruskal-Wallis og Mann-Whitney tester ble brukt for å sammenligne kontinuerlige variabler mellom gruppene. Fishers eksakte test ble utført for å sammenligne proporsjoner i beredskapstabeller og oddsratio ble beregnet. En univariat lineær logistisk regresjon ble brukt for den parede sammenligningen av kontinuerlige verdier. Overlevelseskurver med FVIII ≥0,5 IE.mL-1 av forskjellige F8 hot spot-mutasjoner ble sammenlignet med Kaplan-Meier-metoden. For kvalitative verdier av AR og AD i de 4 mutasjonsgruppene ble positiv prediktiv verdi (PPV), negativ prediktiv verdi (NPV), sensibilitet og spesifisitet beregnet. Et omtrentlig 95 % konfidensintervall ble bestemt (95 % KI) for hver statistisk analyse, og en p-verdi <0,05 ble ansett som statistisk signifikant. SPSS 17.0 (SPSS Inc. Chicago, IL, USA) og GraphPad 5.0 (Prism Software Inc. San Diego CA) ble brukt til å utføre de statistiske analysene.