Desmopressiinin tehoon vaikuttavien geneettisten tekijöiden geneettinen vaikutus lievässä/keskivaikeassa hemofiliassa A (GIDEMHA)

GIDEMHA on havainnollinen, retrospektiivinen ja monikeskinen kliinis-biologinen tutkimus, joka suoritetaan hemofilian hoitokeskuksissa (HTC) Ranskan Grand-Ouestin välisellä alueella, mukaan lukien Angersin, Brestin, Caenin, Nantesin, Rennesin ja Toursin HTC:t.

GIDEMHA-tutkimuksen tavoitteet ovat:

• Kuvaus desmopressiinin (DDAVP) FVIII:n farmakokinetiikasta (PK) suuressa retrospektiivisessä ryhmässä potilaita, joilla on lievä/kohtalainen HA,
• Tutkimus potilaisiin liittyvistä tekijöistä, jotka vaikuttavat tähän FVIII PK:hen,
• Ennustava populaatio- ja Bayes-pohjaisten mallien rakentaminen

Sisällyttämiskriteerit:

• Kaiken ikäiset miehet, joilla on lievä tai kohtalainen hemofilia
• Terapeuttinen testi DDAVP:llä toteutettu vuodesta 2010,
• Tekijä VIII -tasomittaukset suoritettiin vähintään 2 kertaa terapeuttisen testin aikana, juuri ennen DDAVP-infuusiota ja 30 tai 60 minuuttia sen jälkeen,
• F8-geenin täydellinen genotyypitys hemofilian geneettistä diagnoosia varten

Poissulkemiskriteerit:

• Potilaat, joilla on anti-tekijä VIII:n estäjä
• Kieltäytyminen tutkimukseen osallistumisesta
• Ei voi ymmärtää tutkimuksen ranskalaista kieltäytymiskirjettä ja tietoa

Kuvaus DDAVP-terapeuttisista testeistä:

DDAVP-terapeuttisen testin menettely oli identtinen kaikissa tutkijakeskuksissa kansainvälisten ja ranskalaisten ohjeiden mukaisesti. DDAVP annettiin aina suonensisäisesti annoksella 0,3-0,4 μg.kg-1 laimennettuna 50 ml:aan suolaliuosta 30 minuutin aikana. Hemostaattiset parametrit piti arvioida ennen DDAVP-infuusiota ja vähintään 30 tai 60 minuuttia sen jälkeen. Myöhemmät mittaukset, jotka on suoritettu T2h, T4h ja T6h infuusion jälkeen, kirjataan myös testin aikana.

Kerätyt tiedot:

Kaikki tässä tutkimuksessa kerätyt tiedot saatiin lääketieteellisistä tiedostoista DDAVP-terapeuttisen testin hetkellä. Ne sisältävät:

• FVIII-aktiivisuustasot mitattiin yksivaiheisella hyytymismäärityksellä plasmasta, joka on kerätty 0,109 M natriumsitraattiin (tuore tai säilytetty -80 °C:ssa). Nämä FVIII-tasot mitattiin juuri ennen ja jälkeen DDAVP-infuusion (24 tuntiin asti, jos saatavilla).
• F8-geenin molekyylianalyysi.
• Veriryhmä
• DDAVP-annokset
• Von Willebrandin tekijätasot DDAVP-testin aikana
• Ikä
• Paino
• FVIII-puhdistumaan vaikuttavien geenien polymorfismit, jos saatavilla
• Veren DDAVP-tasot DDAVP-infuusioiden jälkeen (vain Rennesin HTC-potilaille ja mukana viimeisten 5 vuoden aikana)

Pre/post-DDAVP:n farmakodynaamiset parametrit Seuraavat farmakokineettiset parametrit laskettiin käyttämällä FVIII:n aktiivisuutta ajan funktiona: perus-FVIII, FVIII:n huippu (korkein taso mitattuna DDAVP:n annon jälkeen), FVIII:n palautuminen (recFVIII = huippu FVIII / perus-FVIII), FVIII:n puoliintumisaika ( FVIII T1/2) ja puhdistuma sekä FVIII käyrän alla oleva pinta-ala (FVIII AUC). Kaikki parametrit paitsi T1/2 arvioitiin ei-osastomenetelmällä. FVIII:n AUC laskettiin käyttämällä puolisuunnikkaan muotoa FVIII-aktiivisuudesta suhteessa annostusaikaan ekstrapoloituna lähtötasoon, perustuen viimeiseen havaittuun pitoisuuteen.

Eliminaationopeusvakio (Ke) laskettiin käyttämällä yhden osaston mallimenetelmää seuraavalla yhtälöllä: C=C0*e(-Ke.t) jossa C, CO, Ke ja t tarkoittavat vastaavasti DDAVP:n jälkeistä FVIII-aktiivisuutta, huippu-FVIII-aktiivisuutta, eliminaationopeusvakiota ja aikaa DDAVP:n annon jälkeen. Terminaalisen eliminaatiovaiheen sovitustilaston hyvyys korjattiin Ke:n estimoinnissa käytettyjen pisteiden lukumäärän mukaan ja vain ne R2>0,90 säilytettiin jatkoanalyysejä varten. FVIII T1/2 laskettiin muodossa Ln(2)/Ke. T1/2 ja AUC laskettiin vain, jos FVIII-tasot mitattiin vähintään 4 eri ajankohtana, ja FVIII:n perus- ja huipputasot olivat saatavilla. Menetelmän validoimiseksi tutkijat suorittivat 2 FVIII-lisämittausta (12 tunnin ja 24 tunnin kohdalla) 10 viimeksi otetulle potilaalle. Tämä mahdollisti 5 pisteestä (T0 - T6h) saatujen FVIII T1/2:n vertaamisen 7 pisteestä (T0 - T24h) saatuun FVIII T1/2:een.

Pisteet, joilla mitataan vastetta DDAVP:hen

Kvalitatiivisesti arvioidakseen biologista vastetta DDAVP:lle tutkijat käyttivät Stoof et al:n aiemmin raportoimia kriteerejä [11]:

• Absoluuttinen vaste oli joko "täydellinen" (FVIII-huippu ≥0,5 IU.ml-1), "osittainen" (FVIII ≥0,3 - <0,5 IU.mL-1) tai "nolla" (FVIII <0,3 IU.mL-1) .
• Suhteellinen vaste määriteltiin "täydelliseksi" (recFVIII >3), "osittaiseksi" (recFVIII ≥2 - <3) tai "nollaksi" (recFVIII <2).

Kaksi muuta pistettä, absoluuttinen kesto ja suhteellinen kesto, rakennettiin määrittämään DDAVP-vasteen kehitys ajan kuluessa. Ne koostuivat myös kolmesta ryhmästä (lyhyet, keskipitkät ja pitkät) kaikilta mukana olevilta potilailta kerättyjen tietojen perusteella, ja vähintään 20 % potilaista ryhmää kohden:

• Absoluuttinen kesto määritti ajan, jolloin FVIII-taso oli ≥ 0,5 IU.mL-1 FVIII-huipun jälkeen. Se oli joko "lyhyt" (≤3h), "keskikokoinen" (>3h - ≤6h) tai "pitkä" (>6h).
• Suhteellinen kesto vastasi FVIII T1/2:ta ja oli joko "lyhyt" (≤3h), "keskikokoinen" (>3h - <5h) tai "pitkä" (≥5h).

Nämä 4 pistettä määritettiin kaikille potilaille, mutta tilastolliset mutaatioanalyysit suoritettiin vain niin kutsutuille "hot spot" F8-mutaatioille, jotka määriteltiin ≥ 5 potilaaksi, joilla oli samanlainen geenivirhe.

Tilastolliset analyysit Kuvaavia ominaisuuksia analysoitiin mediaaniarvoilla, niiden 25-75 %:n kvartiilivälillä (IQR) ja minimi-maksimiarvoilla (MIN-MAX). Ei-parametrisiä Kruskal-Wallis- ja Mann-Whitney-testejä käytettiin jatkuvien muuttujien vertailuun ryhmien välillä. Fisherin tarkka testi suoritettiin vertailutaulukoiden suhteiden vertaamiseksi ja kerroinsuhde laskettiin. Jatkuvien arvojen parivertailussa käytettiin yksimuuttujaista lineaarista logistista regressiota. Eloonjäämiskäyriä, joissa FVIII ≥ 0,5 IU.mL-1 eri F8 hot spot -mutaatioista, verrattiin Kaplan-Meier-menetelmällä. Neljän mutaatioryhmän AR:n ja AD:n kvalitatiivisille arvoille laskettiin positiivinen ennustearvo (PPV), negatiivinen ennustearvo (NPV), herkkyys ja spesifisyys. Jokaiselle tilastoanalyysille määritettiin noin 95 %:n luottamusväli (95 % CI) ja p-arvoa < 0,05 pidettiin tilastollisesti merkitsevänä. SPSS 17.0 (SPSS Inc. Chicago, IL, USA) ja GraphPad 5.0 (Prism Software Inc. San Diego CA) käytettiin tilastollisten analyysien suorittamiseen.