Genetisk påverkan av genetiska faktorer som påverkar desmopressinets effekt vid mild/måttlig hemofili A (GIDEMHA)

GIDEMHA är en observationell, retrospektiv och multicentrisk klinisk-biologisk studie utförd i Hemophilia Treatment Centers (HTC) i den franska Grand-Ouest interregionen inklusive HTCs i Angers, Brest, Caen, Nantes, Rennes och Tours.

Målen för GIDEMHA-studien är:

• Beskrivning av post-desmopressin (DDAVP) FVIII farmakokinetik (PK) i en stor retrospektiv kohort av patienter med mild/måttlig HA,
• Forskning av patientrelaterade faktorer som påverkar denna FVIII PK,
• Byggande av prediktiva populations- och Bayesianska modeller

Inklusionskriterier:

• Hanar i alla åldrar med mild eller måttlig blödarsjuka
• Terapeutisk test med DDAVP genomfört sedan 2010,
• Mätningar av faktor VIII-nivåer genomfördes minst 2 gånger under det terapeutiska testet, strax före DDAVP-infusionen och 30 eller 60 minuter efter,
• Fullständig genotypning av F8-genen för genetisk diagnos av hemofili

Exklusions kriterier:

• Patienter med en anti-faktor VIII-hämmare
• Vägra att delta i studien
• Det går inte att förstå studiens franska skrivelse om icke-opposition och information

Beskrivning av DDAVP terapeutiska tester:

Tillvägagångssättet för det terapeutiska DDAVP-testet var identiskt för alla utredarcentra enligt de internationella och franska riktlinjerna. DDAVP administrerades alltid intravenöst i en dos av 0,3-0,4 μg.kg-1 utspädd i 50 mL saltlösning under 30 minuter. Hemostatiska parametrar krävdes att ha utvärderats före och minst 30 eller 60 minuter efter DDAVP-infusionen. Efterföljande mätningar som utförs vid T2h, T4h och T6h efter infusionen registreras också under testet.

Insamlad data:

Alla data som samlats in i denna studie utfärdades från medicinska filer vid ögonblicket för det terapeutiska DDAVP-testet. De inkluderar:

• FVIII-aktivitetsnivåer mättes med en koaguleringsanalys i ett steg från plasma uppsamlade i 0,109 M natriumcitrat (färskt eller lagrat vid -80°C). Dessa FVIII-nivåer mättes strax före och efter DDAVP-infusionen (till 24 timmar om tillgängligt).
• Molekylär analys av F8-genen.
• Blodgrupp
• DDAVP doser
• Von Willebrands faktornivåer under DDAVP-testet
• Ålder
• Vikt
• Polymorfismer av gener som påverkar FVIII-clearance om tillgängligt
• DDAVP-nivåer i blodet efter DDAVP-infusioner (endast för patienter med HTC of Rennes och inkluderade under de senaste 5 åren)

Pre/Post-DDAVP farmakodynamiska parametrar Följande farmakokinetiska parametrar beräknades med användning av FVIII-aktivitet kontra tid: basal FVIII, FVIII-topp (högsta nivå uppmätt efter DDAVP-administrering), FVIII-återvinning (recFVIII= topp FVIII / basal FVIII), FVIII-halveringstid ( FVIII T1/2) och clearance, och FVIII-area under kurvan (FVIII AUC). Alla parametrar utom T1/2 uppskattades med hjälp av icke-kompartmenterad metod. FVIII AUC beräknades med användning av trapets från FVIII-aktivitet kontra doseringstid extrapolerad till baslinjen, baserat på den senast observerade koncentrationen.

Elimineringshastighetskonstanten (Ke) beräknades med användning av en-kompartmentmodell med följande ekvation: C=C0*e(-Ke.t) där C, CO, Ke respektive t betecknar post-DDAVP FVIII-aktivitet, topp FVIII-aktivitet, eliminationshastighetskonstanten och tiden efter DDAVP-administrering. Goodness of fit-statistik för den terminala elimineringsfasen justerades för antalet punkter som användes vid uppskattningen av Ke, och endast de R2>0,90 bevarades för ytterligare analyser. FVIII T1/2 beräknades som Ln(2)/Ke. T1/2 och AUC beräknades endast om FVIII-nivåer mättes vid åtminstone 4 olika tidpunkter, med basala och maximala FVIII-nivåer tillgängliga. För att validera metoden genomförde utredarna ytterligare 2 FVIII-mätningar (vid 12h och 24h) hos de senaste 10 patienterna som registrerades. Detta gjorde det möjligt att jämföra FVIII T1/2 erhållen från 5 poäng (från TO till T6h) med den som erhölls från 7 poäng (från TO till T24h).

Poäng för att mäta svaret på DDAVP

För att kvalitativt bedöma det biologiska svaret på DDAVP använde utredarna kriterier som tidigare rapporterats av Stoof et al [11]:

• Det absoluta svaret var antingen "fullständigt" (topp FVIII ≥0,5 IU.mL-1), "partiellt" (FVIII ≥0,3 - <0,5 IU.mL-1) eller "noll" (FVIII <0,3 IU.mL-1) .
• Det relativa svaret definierades som "komplett" (recFVIII >3), "partiellt" (recFVIII ≥2 - <3) eller "noll" (recFVIII <2).

Två andra poäng, absolut varaktighet och relativ varaktighet, byggdes för att bestämma utvecklingen av DDAVP-svaret över tiden. De omfattade också var och en av tre grupper (kort, medel och lång) baserat på data som samlats in från alla inkluderade patienter, med minst 20 % av patienterna per grupp:

• Den absoluta varaktigheten bestämde tiden då FVIII-nivån var ≥ 0,5 IU.mL-1 efter FVIII-toppen. Den var antingen "kort" (≤3h), "medium" (>3h - ≤6h) eller "lång" (>6h).
• Den relativa varaktigheten motsvarade FVIII T1/2 och var antingen "kort" (≤3h), "medium" (>3h - <5h) eller "lång" (≥5h).

Dessa 4 poäng bestämdes för alla patienter, men statistiska analyser genom mutation utfördes endast för de så kallade "hot spot" F8-mutationerna, definierade som ≥5 patienter med en liknande gendefekt.

Statistiska analyser Beskrivande egenskaper analyserades med medianvärden, deras 25-75 % interkvartila intervall (IQR) och minimi-maximivärden (MIN-MAX). Icke-parametriska Kruskal-Wallis och Mann-Whitney tester användes för att jämföra kontinuerliga variabler mellan grupperna. Fishers exakta test utfördes för att jämföra proportioner i beredskapstabeller och oddskvoten beräknades. En univariat linjär logistisk regression användes för den parade jämförelsen av kontinuerliga värden. Överlevnadskurvor med FVIII ≥0,5 IU.mL-1 av olika F8 hotspot-mutationer jämfördes med Kaplan-Meier-metoden. För kvalitativa värden för AR och AD i de 4 mutationsgrupperna beräknades positivt prediktivt värde (PPV), negativt prediktivt värde (NPV), sensibilitet och specificitet. Ett ungefärligt 95 % konfidensintervall bestämdes (95 % CI) för varje statistisk analys och ett p-värde <0,05 ansågs vara statistiskt signifikant. SPSS 17.0 (SPSS Inc. Chicago, IL, USA) och GraphPad 5.0 (Prism Software Inc. San Diego CA) användes för att utföra de statistiska analyserna.