Influencia genética de los factores genéticos que influyen en la eficacia de la desmopresina en la hemofilia A leve/moderada (GIDEMHA)

GIDEMHA es un estudio clínico-biológico observacional, retrospectivo y multicéntrico realizado en los Centros de Tratamiento de Hemofilia (HTC) de la interregión del Gran Oeste francés, incluidos los HTC de Angers, Brest, Caen, Nantes, Rennes y Tours.

Los objetivos del estudio GIDEMHA son:

• Descripción de la farmacocinética (PK) del FVIII posterior a la desmopresina (DDAVP) en una gran cohorte retrospectiva de pacientes con HA leve/moderada,
• Investigación de factores relacionados con los pacientes que influyen en esta PK de FVIII,
• Construcción de modelos predictivos basados ​​en población y bayesianos

Criterios de inclusión:

• Varones de cualquier edad con hemofilia leve o moderada
• Test terapéutico con DDAVP realizado desde 2010,
• Mediciones de los niveles de factor VIII realizadas al menos 2 veces durante la prueba terapéutica, justo antes de la infusión de DDAVP y 30 o 60 minutos después,
• Genotipado completo del gen F8 para el diagnóstico genético de la hemofilia

Criterio de exclusión:

• Pacientes con un inhibidor del anti-factor VIII
• Negativa a participar en el estudio.
• Incapaz de entender la carta francesa de no oposición e información del estudio.

Descripción de las pruebas terapéuticas DDAVP:

El procedimiento de la prueba terapéutica DDAVP fue idéntico para todos los centros investigadores según lo recomendado por las guías internacionales y francesas. DDAVP siempre se administró por vía intravenosa a una dosis de 0,3-0,4 μg.kg-1 diluidos en 50 mL de solución salina durante 30 minutos. Los parámetros hemostáticos debían haber sido evaluados antes y al menos 30 o 60 minutos después de la infusión de DDAVP. Las mediciones posteriores realizadas en T2h, T4h y T6h después de la infusión también se registran durante la prueba.

Informacion recolectada:

Todos los datos recogidos en este estudio fueron emitidos de los expedientes médicos en el momento de la prueba terapéutica DDAVP. Incluyen:

• Niveles de actividad de FVIII medidos con un ensayo de coagulación de una etapa a partir de plasmas recolectados en citrato de sodio 0,109 M (fresco o almacenado a -80 °C). Estos niveles de FVIII se midieron justo antes y después de la infusión de DDAVP (hasta 24 horas si estaba disponible).
• Análisis molecular del gen F8.
• Grupo sanguíneo
• Dosis de DDAVP
• Niveles del factor von Willebrand durante la prueba DDAVP
• Edad
• Peso
• Polimorfismos de genes que influyen en la depuración de FVIII, si están disponibles
• Niveles de DDAVP en sangre tras infusiones de DDAVP (solo para pacientes del HTC de Rennes e incluidos durante los últimos 5 años)

Parámetros farmacodinámicos pre/post-DDAVP Los siguientes parámetros farmacocinéticos se calcularon utilizando la actividad del FVIII versus el tiempo: FVIII basal, pico de FVIII (nivel más alto medido después de la administración de DDAVP), recuperación de FVIII (recFVIII= FVIII pico/FVIII basal), vida media de FVIII ( FVIII T1/2) y aclaramiento, y el área bajo la curva de FVIII (FVIII AUC). Todos los parámetros excepto T1/2 se estimaron utilizando un método no compartimental. El AUC del FVIII se calculó utilizando el trapecio de la actividad del FVIII frente al tiempo de dosificación extrapolado al valor inicial, en función de la última concentración observada.

La constante de velocidad de eliminación (Ke) se calculó utilizando el enfoque del modelo de un compartimento con la siguiente ecuación: C=C0*e(-Ke.t) donde C, C0, Ke y t indican, respectivamente, la actividad de FVIII posterior a DDAVP, la actividad máxima de FVIII, la constante de tasa de eliminación y el tiempo después de la administración de DDAVP. El estadístico de bondad de ajuste para la fase de eliminación terminal se ajustó por el número de puntos utilizados en la estimación de Ke, y solo aquellos R2>0.90 se conservaron para análisis posteriores. FVIII T1/2 se calculó como Ln(2)/Ke. T1/2 y AUC se calcularon solo si los niveles de FVIII se midieron al menos en 4 momentos diferentes, estando disponibles los niveles basales y máximos de FVIII. Para validar el método, los investigadores realizaron 2 mediciones adicionales de FVIII (a las 12 y 24 horas) en los últimos 10 pacientes incluidos. Esto permitió comparar el FVIII T1/2 obtenido de 5 puntos (de T0 a T6h) con el obtenido de 7 puntos (de T0 a T24h).

Puntuaciones para medir la respuesta a DDAVP

Para evaluar cualitativamente la respuesta biológica a DDAVP, los investigadores utilizaron criterios previamente informados por Stoof et al [11]:

• La respuesta absoluta fue "completa" (FVIII pico ≥0,5 UI.mL-1), "parcial" (FVIII ≥0,3 - <0,5 UI.mL-1) o "nula" (FVIII <0,3 UI.mL-1) .
• La respuesta relativa se definió como "completa" (recFVIII >3), "parcial" (recFVIII ≥2 - <3) o "nula" (recFVIII <2).

Se construyeron otros dos puntajes, duración absoluta y duración relativa, para determinar la evolución de la respuesta DDAVP a lo largo del tiempo. También comprendían cada uno 3 grupos (corto, medio y largo) en base a los datos recopilados de todos los pacientes incluidos, con al menos un 20% de pacientes por grupo:

• La duración absoluta determinó el tiempo que el nivel de FVIII fue ≥ 0,5 UI.mL-1 después del pico de FVIII. Era "corto" (≤3h), "medio" (>3h - ≤6h) o "largo" (>6h).
• La duración relativa correspondió al FVIII T1/2 y fue "corta" (≤3h), "mediana" (>3h - <5h) o "larga" (≥5h).

Estos 4 puntajes se determinaron para todos los pacientes, pero los análisis estadísticos por mutación se realizaron solo para las llamadas mutaciones F8 de "punto caliente", definidas como ≥5 pacientes que tienen un defecto genético similar.

Análisis estadísticos Las características descriptivas se analizaron con los valores de la mediana, sus rangos intercuartílicos (RIC) 25-75% y los valores mínimo-máximo (MIN-MAX). Se utilizaron las pruebas no paramétricas de Kruskal-Wallis y Mann-Whitney para comparar variables continuas entre los grupos. Se realizó la prueba exacta de Fisher para comparar proporciones en tablas de contingencia y se calculó el Odds ratio. Se utilizó una regresión logística lineal univariada para la comparación pareada de valores continuos. Las curvas de supervivencia con FVIII ≥0,5 UI.mL-1 de diferentes mutaciones hot spot de F8 se compararon mediante el método de Kaplan-Meier. Para los valores cualitativos de AR y AD de los 4 grupos de mutación, se calcularon el valor predictivo positivo (VPP), el valor predictivo negativo (VPN), la sensibilidad y la especificidad. Se determinó un intervalo de confianza aproximado del 95 % (IC del 95 %) para cada análisis estadístico y un valor de p <0,05 se consideró estadísticamente significativo. SPSS 17.0 (SPSS Inc. Chicago, IL, EE. UU.) y GraphPad 5.0 (Prism Software Inc. San Diego CA) se utilizaron para realizar los análisis estadísticos.