CRISPR-EDITITED HLA dárce Transplantace jater pro snížení odmítnutí
Fáze 1/2, otevřená studie s jedním ramenem pro vyhodnocení bezpečnosti, snížení imunogenity, funkce transplantace a proveditelnost genů ex vivo CRISPR-Cas9 editovaného dárce jater zaměřené na HLA třídu I (HLA-A, HLA-B) a třídu II (Via Via Via Via CIITA).
Přehled studie
Postavení
Podmínky
Intervence / Léčba
Detailní popis
Odmítnutí transplantace orgánů je primárně poháněno imunitním rozpoznáváním molekul dárce HLA (lidského leukocytového antigenu) jako cizích. Neshoda v HLA-A a HLA-B (třída I) zejména jsou silně imunogenní a mohou vyvolat odmítnutí štěpu zprostředkované T-buňkami. Molekuly HLA třídy II (HLA-DR, DQ, DP), exprimované na dárcovských antigenových buňkách, mohou také aktivovat CD4⁺ T buňky a přispívat k odmítnutí. Současná terapie se opírá o imunosupresivní léky, které nesou významná rizika. Předklinický výzkum ukázal, že geneticky „vymazání“ molekul HLA z dárcovských buněk může tupé imunitní odpovědi: například buňky s HLA-A, HLA-B a HLA-DR vyřazeny prostřednictvím CRISPR vyvolaly in vitro malou až žádnou proliferaci T buněk, což ukazuje na výrazně sníženou imunogenitu. Podobně v modelech xenotransplantu trojitý knockout genů (včetně třídy I a regulátoru třídy II CIITA) u dárcových zvířat významně oslabil aktivaci lidských T-buněk a prodloužený přežití štěpu. Tato zjištění poskytují silné zdůvodnění, že dárcovský orgán upravený HLA by se mohl do značné míry vyhýbat lidskému imunitnímu systému, potenciálně snižovat nebo odkládat odmítnutí.
Gene-editace dárcovského játra ex vivo: V tomto pokusu se před transplantací podstoupí zesnulý donor játra. Cíle editace jsou HLA-A a HLA-B (pro eliminaci hlavních aloantigenů třídy I) a CIITA (transaktivátor třídy II, jejichž knockout zruší expresi HLA-DR/DQ/DP na dárcovských buňkách). Cílem je vyřazení HLA-A a-B, zatímco ponechání HLA-C exprese je odstranit nejvíce imunogenní molekuly třídy I, ale udržuje určitou přítomnost HLA, aby zmírnila přirozené zabijácké buňky „chybějící“ odpovědi. Deaktivace CIITA zabrání expresi proteinů HLA třídy II, čímž se sníží aktivaci CD4⁺ T buněk proti štěpu. Editace CRISPR se provádí během perfuze stroje dárcovské játra (období, ve kterém je orgán udržován naživu mimo tělo). Ribonukleoprotein CRISPR-Cas9 (enzym CAS9 komplexovaný s vodicí RNA pro HLA-A, HLA-B a CIITA) je dodáván do jaterní tkáně prostřednictvím perfuzního obvodu. Úpravy se koná ex vivo a vyhýbá se přímé in vivo genové terapii příjemci. Před transplantací je štěp hodnocen pro úspěšný knockout genu (například biopsickou imunostainováním nebo průtokovou cytometrií, aby se potvrdila absence HLA-A/B/DR na buněčném povrchu). Pouze játra s potvrzenou vysoce účinnou úpravou (např. > 90% narušení cílového genu) se používá pro transplantaci k zajištění maximálního přínosu imunitního úhlu.
Typ studie
Zápis (Odhadovaný)
Fáze
- Fáze 2
- Fáze 1
Kontakty a umístění
Studijní kontakt
- Jméno: Andrew R Linehan
- Telefonní číslo: +1 (302) 615-8388
- E-mail: clinical-trials@aotcri.org
Studijní místa
-
-
Changping
-
Beijing, Changping, Čína, 102206
- Nábor
- Peking University Health Science Center (PKUHSC)
-
Kontakt:
- Huan Yang, Phd
- Telefonní číslo: +8613202512868
- E-mail: PAD@aotcri.org
-
-
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
- Dítě
- Dospělý
- Starší dospělý
Přijímá zdravé dobrovolníky
Popis
Kritéria pro zařazení:
- Dospělí ve věku 16–85 let (včetně) s onemocněním jater nebo akutním selháním jater, kteří mají nárok na transplantaci jater.
- Vyžadujte transplantaci jater a byl přidělen jaterní štěp dárce (od zesnulého dárce), který bude použit ve studii po editaci genů.
- Žádné okamžitě k dispozici plně donor odpovídající HLA (protože studie se zaměřuje na pacienty, kteří by jinak obdrželi orgán HLA-nesouhlasný orgán; standardní alokace obecně nezohledňuje porovnávání HLA pro játra, takže většina pacientů se kvalifikuje).
- Léčivě vhodný pro transplantační chirurgii a schopný tolerovat standardní imunosupresivní terapii (žádné kontraindikace k transplantaci, jako je nekontrolovaná infekce nebo jiné aktivní vážné onemocnění, které by vylučovaly chirurgický zákrok).
- Informovaný souhlas: schopen porozumět vyšetřovací povaze soudního řízení a poskytnout písemný informovaný souhlas. Pacienti (a jejich právní zástupci, pokud je to použitelné) musí souhlasit s používáním geneticky modifikovaného orgánu a k dlouhodobému sledování, včetně více biopsií a imunitního monitorování.
- Ochota dodržovat všechny studijní postupy a dostupnost po dobu sledování (včetně častých návštěv monitorování).
Kritéria pro vyloučení:
- Aktivní nekontrolovaná infekce (např. Sepse, aktivní tuberkulóza), která by vážně zvýšila riziko transplantace nebo zmást interpretaci imunitních výsledků.
- Nekontrolované HIV nebo chronické virové infekce, které nejsou dobře spravovány. (Poznámka: Pacienti s hepatitidou B nebo C mohou být zahrnuti, pokud jsou přiměřeně léčeni nebo pod kontrolou, protože jsou běžné při selhání jater, ale tito pacienti by neměli mít aktivní a replikovat virus při transplantaci, pokud je to možné.)
- Požadavek na transplantaci více orgánů: Pacienti, kteří potřebují více než pouze játra (např. Duální transplantace játra-Kidney), jsou vyloučeny, protože studie hodnotí pouze výsledky jednotlivých orgánů (jater).
- Těhotenství nebo kojení: Ženské účastníky porodu musí mít před transplantací negativní těhotenský test a musí souhlasit s použitím účinné antikoncepce. Účinky transplantace orgánů upraveného genem na plod/kojence nejsou známy a imunosupresivní léčiva mohou také poškodit těhotenství.
- Těžká souběžná onemocnění nesouvisí s onemocněním jater, které by omezilo přežití na <1 rok nebo učinilo pacienta nevhodným kandidátem (např. Pokročilé srdeční selhání, nekontrolovaný diabetes s komplikacemi atd.).
- Alergie nebo přecitlivělost na produkty související s studiem: pokud nějaké komponenty použité při editaci genu ex vivo (jako je specifický vozidlo nebo enzym) mají u příjemce známé závažné alergie, budou vyloučeny. (Například, i když je nepravděpodobné, pokud by pacient měl zdokumentovanou závažnou imunitní reakci na Streptococcus pyogenes Cas9 nebo podobné proteiny, nebyly by zapsány.)
- Neschopnost dodržovat protokol nebo dodržovat sledování: To zahrnuje psychiatrické, sociální nebo logistické faktory, které by zabránily dodržování intenzivního plánu monitorování (například nedostatek spolehlivé přepravy nebo podpory).
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
- Primární účel: Léčba
- Přidělení: N/A
- Intervenční model: Přiřazení jedné skupiny
- Maskování: Žádné (otevřený štítek)
Zbraně a zásahy
Skupina účastníků / Arm |
Intervence / Léčba |
|---|---|
|
Experimentální: Transplantace jater upraveného CRISPR
Účastníci podléhají ortotopické transplantaci jater pomocí dárcovské játra, která byla ex vivo editována CRISPR-Cas9, aby vyřadila geny HLA třídy I (A, B) a třídu II (prostřednictvím CIITA).
Neexistuje žádná komparátorová rameno; Výsledky budou porovnány s historickými normami neupravených transplantací pro kontext.
|
Dárcovská jaterní tkáň je perfundována mimo tělo s komplexem CRISPR-Cas9 RNP zaměřujícím se na HLA-A, HLA-B a CIITA, aby vytvořil hypoimunogenní štěp.
Po potvrzení úspěšného knockout genu jsou játra transplantována do pacienta podle standardních chirurgických technik.
Pooperační péče zahrnuje rutinní imunosupresivní terapii s plánovanými úpravami založenými na toleranci pacienta a důkazů o imunogenitě štěpu.
|
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Výskyt stupně ≥ 3 Nežádoucí účinky (čaje)
Časové okno: 1. den na den 90
|
Počet účastníků zažívajících ≥1 CTCAE V5.0 Stupeň 3-5 čaj souzen související s postupem transplantace jater editovaného genu
|
1. den na den 90
|
|
Proveditelnost editace genu ex vivo HLA
Časové okno: Den 1 až 90
|
Podíl dárcovských játra, které dosahují požadovaných editačních kritérií (např.> 90% knockout účinnosti HLA-A/B a zrušení exprese třídy II) a jsou úspěšně transplantovány na příjemce.
Proveditelnost je dále indikována absencí technických problémů během úpravy a transplantace orgánů.
|
Den 1 až 90
|
|
Míra selhání štěpu v den 90
Časové okno: Den 1 až 90
|
Podíl účastníků vyžadujících opětovné transplantaci, explantát štěpu nebo návrat k seznamu kvůli primární nefunkční. Uniť měření: Účastníci se selháním štěpu (N, %)
|
Den 1 až 90
|
Sekundární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Výskyt akutního odmítnutí po 6 a 12 měsících
Časové okno: Den 1 - 12. Měsíc
|
Podíl pacientů zažívajících biopsii potvrzený epizody akutního buněčného odmítnutí do 6 měsíců a do 12 měsíců po transplantaci.
Rovněž bude zaznamenána závažnost odmítnutí (tříděná podle standardních kritérií) a reakce na léčbu.
Míra odmítnutí nižší než očekávané nebo mírnější odmítnutí by naznačovala úspěšnou redukci imunogenicity.
|
Den 1 - 12. Měsíc
|
|
Imunologické markery aloreaktivity
Časové okno: Den 1 - 12. Měsíc
|
Hladiny anti-donorových HLA protilátek v krvi příjemce (dárcovské protilátky, DSA) a aloimunitní reaktivity T-buněk (např. In vitro smíšená reakce lymfocytů nebo elispotových testů proti dárcovským buňkám) ve 3, 6 a 12 měsících.
Tyto imunologické markery porovnáme s výchozím linií a typickými profily po transplantaci.
Předpokládáme, že pacienti s editovanými štěpy budou vykazovat oslabené reakce T buněk na dárcovské antigeny.
|
Den 1 - 12. Měsíc
|
|
Přežití a funkce štěpu v 1 roce
Časové okno: Den 1 - 12. Měsíc
|
Počet pacientů s původní transplantovanou játra přežívající po 12 měsících bez ztráty štěpu.
|
Den 1 - 12. Měsíc
|
|
Přežití pacientů po 1 roce
Časové okno: 12 měsíců
|
Celkové přežití účastníků po 1 roce po transplantaci.
|
12 měsíců
|
|
Proveditelnost snížení imunosuprese
Časové okno: 12 měsíců
|
U pacientů se stabilní funkcí štěpu se schopnost zužovat imunosupresivní terapii o 6-12 měsíců po transplantaci bez srážení odmítnutí.
To bude měřeno podílem pacientů, kteří úspěšně udržují zdraví štěpu na snížené dávce imunosupresiv nebo jednoduššího režimu.
|
12 měsíců
|
|
Posouzení efektů mimo cíl
Časové okno: 24 měsíců
|
Studie vyhodnotí jakýkoli důkaz efektů editace genů mimo cíl v štěpu (například neočekávané histologické změny nebo aberantní jaterní funkce, které by mohly naznačovat nezamýšlené narušení genu).
Genomické analýzy upravené tkáně budou provedeny pro charakterizaci frekvence mutace mimo cíl.
|
24 měsíců
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia (Aktuální)
Primární dokončení (Odhadovaný)
Dokončení studie (Odhadovaný)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (Odhadovaný)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (Odhadovaný)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Klíčová slova
Další relevantní podmínky MeSH
Další identifikační čísla studie
- AOTCRI-102
Plán pro data jednotlivých účastníků (IPD)
Plánujete sdílet data jednotlivých účastníků (IPD)?
Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty
Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA
Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .