CRISPR-bewerkte HLA-donor-levertransplantatie om afwijzing te verminderen
Een fase 1/2, open-label, single-arm studie om de veiligheid, immunogeniciteitsreductie, transplantatiefunctie en haalbaarheid van ex vivo CRISPR-Cas9 gen-bewerkte donor-levertransplantatie te evalueren gericht op HLA-klasse I (HLA-A, HLA-B) en klasse II (via CIITA) genen.
Studie Overzicht
Toestand
Conditie
Interventie / Behandeling
Gedetailleerde beschrijving
Organtransplantatieafwijzing wordt voornamelijk aangedreven door immuunherkenning van donor HLA (menselijk leukocytenantigeen) moleculen als vreemd. Mismatches in HLA-A en HLA-B (klasse I) zijn met name sterk immunogeen en kunnen door T-cel gemedieerde transplantaatafstoting uitlokken. HLA Class II-moleculen (HLA-DR, DQ, DP), uitgedrukt op donorantigeenpresenterende cellen, kunnen ook CD4⁺ T-cellen activeren en bijdragen aan afstoting. De huidige therapie is gebaseerd op immunosuppressieve geneesmiddelen, die aanzienlijke risico's met zich meebrengen. Preklinisch onderzoek heeft aangetoond dat genetisch "wissen" HLA-moleculen uit donorcellen immuunresponsen kunnen boeien: cellen met HLA-A, HLA-B en HLA-DR uitgeschakeld via CRISPR hebben weinig tot geen T-celproliferatie in vitro opgeroepen, wat een sterk verminderde immunogeniteit aangeeft. Evenzo, in xenotransplantatiemodellen, hebben drievoudige knock-out van genen (inclusief klasse I en de Klasse II-regulator CIITA) bij donormieren de menselijke T-celactivering en langdurige transplantaatoverleving aanzienlijk verzwakt. Deze bevindingen bieden een sterke redenering dat een HLA-bewerkt donororgaan het menselijke immuunsysteem in grote mate zou kunnen ontwijken, waardoor de afwijzing mogelijk wordt verminderd of uitstelt.
Gene-bewerking van donor lever ex vivo: in deze proef zullen overleden-donor levers ex vivo crispr-Cas9 genoombewerking ondergaan voorafgaand aan transplantatie. De bewerkingsdoelen zijn HLA-A en HLA-B (om de belangrijkste klasse I alloantigenen te elimineren) en CIITA (Klasse II-transactivator, wiens knock-out HLA-DR/DQ/DP-expressie op donorcellen afschaft). Door HLA-A en -B uit te schakelen, terwijl HLA-C-expressie intact wordt gelaten, is het doel om de meest immunogene klasse I-moleculen te verwijderen, maar toch enige HLA-aanwezigheid te behouden om de "ontbrekende" reacties van de natuurlijke moordenaarcellen te beperken. Het uitschakelen van CIITA zal expressie van HLA -klasse II -eiwitten voorkomen, waardoor de activering van CD4⁺ T -cellen tegen het transplantaat wordt verminderd. De CRISPR -bewerking wordt uitgevoerd tijdens machineperfusie van de donorlever (een periode waarin het orgel in leven wordt gehouden buiten het lichaam). Een CRISPR-CAS9 ribonucleoproteïne (Cas9-enzym gecomplexeerd met geleider-RNA's voor HLA-A, HLA-B en CIITA) wordt via het perfusiecircuit in het leverweefsel geleverd. Bewerken vindt plaats ex vivo en vermijdt directe in vivo gentherapie voor de ontvanger. Vóór transplantatie wordt het transplantaat beoordeeld op succesvolle gen knock-out (bijvoorbeeld door biopsie-immunokleuring of flowcytometrie om afwezigheid van HLA-A/B/DR op het celoppervlak te bevestigen). Alleen levers met bevestigde zeer efficiënte bewerking (bijv. > 90% Doelgenverstoring) worden gebruikt voor transplantatie om maximaal immuun-ontwijkingsvoordeel te garanderen.
Studietype
Inschrijving (Geschat)
Fase
- Fase 2
- Fase 1
Contacten en locaties
Studiecontact
- Naam: Andrew R Linehan
- Telefoonnummer: +1 (302) 615-8388
- E-mail: clinical-trials@aotcri.org
Studie Locaties
-
-
Changping
-
Beijing, Changping, China, 102206
- Werving
- Peking University Health Science Center (PKUHSC)
-
Contact:
- Huan Yang, Phd
- Telefoonnummer: +8613202512868
- E-mail: PAD@aotcri.org
-
-
Deelname Criteria
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
- Kind
- Volwassen
- Oudere volwassene
Accepteert gezonde vrijwilligers
Beschrijving
Inclusiecriteria:
- Volwassenen van 16-85 (inclusief) met eindstadium leverziekte of acuut leverfalen die in aanmerking komen voor levertransplantatie.
- Vereist een levertransplantatie en is een donorlevertransplantaat (van een overleden donor) toegewezen die in de studie na het bewerken van genen zal worden gebruikt.
- Geen onmiddellijk beschikbaar volledig HLA-gematchte donor (omdat het onderzoek zich richt op patiënten die anders een HLA-mismatched orgaan zouden ontvangen; standaardallocatie houdt in het algemeen geen HLA-matching voor lever, dus de meeste patiënten zullen in aanmerking komen).
- Medisch geschikt voor transplantatiechirurgie en in staat om standaard immunosuppressieve therapie te verdragen (geen contra -indicaties voor transplantatie zoals ongecontroleerde infectie of andere actieve ernstige ziekten die chirurgie zou uitsluiten).
- Geïnformeerde toestemming: in staat om het onderzoek van het proces te begrijpen en schriftelijke geïnformeerde toestemming te geven. Patiënten (en hun wettelijke vertegenwoordigers indien van toepassing) moeten instemmen met het gebruik van een genetisch gemodificeerd orgaan en met follow-up op de lange termijn, inclusief meerdere biopten en immuunmonitoring.
- Bereidheid om te voldoen aan alle studieprocedures en beschikbaarheid voor de follow-up duur (inclusief frequente monitoringbezoeken).
Uitsluitingscriteria:
- Actieve ongecontroleerde infectie (bijv. Sepsis, actieve tuberculose) die het transplantatierisico of de verwarrende interpretatie van immuungerelateerde resultaten ernstig zou verhogen.
- Ongecontroleerde hiv- of chronische virale infecties die niet goed beheerd zijn. (Opmerking: patiënten met hepatitis B of C kunnen worden opgenomen indien adequaat behandeld of onder controle, omdat deze gebruikelijk zijn bij leverfalen, maar dergelijke patiënten mogen niet actief zijn, replicerend virus bij transplantatie indien mogelijk.)
- Multi-organ transplantatie-eis: patiënten die meer dan een lever alleen nodig hebben (bijv. Lever-kidney dubbele transplantatie) worden uitgesloten, omdat de studie alleen de resultaten van één orgaan (lever) evalueert.
- Zwangerschap of borstvoeding: vrouwelijke deelnemers aan het vruchtbaar potentieel moeten een negatieve zwangerschapstest hebben voorafgaand aan transplantatie en moeten ermee instemmen effectieve anticonceptie te gebruiken. De effecten van een gen-bewerkte orgaantransplantatie op een foetus/baby zijn onbekend en immunosuppressieve geneesmiddelen kunnen ook een zwangerschap schaden.
- Ernstige gelijktijdige ziekte die niet verband houdt met leverziekte die de overleving zou beperken tot <1 jaar of de patiënt een ongeschikte kandidaat zou maken (bijvoorbeeld geavanceerd hartfalen, ongecontroleerde diabetes met complicaties, enz.).
- Allergie of overgevoeligheid voor studiegerelateerde producten: als componenten die worden gebruikt in de ex vivo-genbewerking (zoals een specifiek voertuig of enzym) zijn bekend met ernstige allergieën in de ontvanger, zullen ze worden uitgesloten. (Hoewel onwaarschijnlijk, als een patiënt een gedocumenteerde ernstige immuunreactie had op Streptococcus pyogenes Cas9 of soortgelijke eiwitten, zouden ze niet worden ingeschreven.)
- Onvermogen om het protocol te volgen of te voldoen aan de follow-up: dit omvat psychiatrische, sociale of logistieke factoren die voorkomen dat u zich aan het intense monitoringschema houdt (bijvoorbeeld gebrek aan betrouwbare transport of ondersteuning).
Studie plan
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
- Primair doel: Behandeling
- Toewijzing: NVT
- Interventioneel model: Opdracht voor een enkele groep
- Masker: Geen (open label)
Wapens en interventies
Deelnemersgroep / Arm |
Interventie / Behandeling |
|---|---|
|
Experimenteel: CRISPR-bewerkte donor levertransplantatie
Deelnemers ondergaan orthotopische levertransplantatie met behulp van een donorlever die door CRISPR-CAS9 ex vivo-gen is bewerkt om HLA Klasse I (A, B) en Klasse II (via CIITA) genen uit te schakelen.
Er is geen comparatorarm; De resultaten zullen worden vergeleken met historische normen van onbewerkte transplantaties voor context.
|
Donor leverweefsel is geperfuseerd buiten het lichaam met een CRISPR-CAS9 RNP-complex gericht op HLA-A, HLA-B en CIITA, om een hypoimmunogeen transplantaat te creëren.
Na het bevestigen van succesvolle gen knock -out, wordt de lever getransplanteerd in de patiënt na standaard chirurgische technieken.
Postoperatieve zorg omvat routinematige immunosuppressieve therapie met geplande aanpassingen op basis van de tolerantie van de patiënt en bewijs van transplantaat-immunogeniteit.
|
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Incidentie van graad ≥3 behandelings-opkomende bijwerkingen (TEEAS)
Tijdsspanne: Dag 1 tot dag 90
|
Aantal deelnemers met ≥1 CTCAE V5.0 Grade 3-5 Teae beoordeeld gerelateerd aan de gen-bewerkte levertransplantatieprocedure
|
Dag 1 tot dag 90
|
|
Haalbaarheid van ex vivo hla -genbewerking
Tijdsspanne: Dag 1 tot dag 90
|
Het aandeel donor levers dat de gewenste bewerkingscriteria bereikt (bijv.> 90% knock-out efficiëntie van HLA-A/B en afschaffing van klasse II-expressie) en worden met succes getransplanteerd in ontvangers.
Feasibility is further indicated by the absence of technical issues during organ editing and transplantation.
|
Dag 1 tot dag 90
|
|
Graftfoutpercentage op dag 90
Tijdsspanne: Dag 1 tot dag 90
|
Aandeel van de deelnemers die opnieuw transplantatie, transplantaat explantaat of terugkeer naar lijst vereist vanwege primaire niet-functie. UNIT VAN MAATSCHAP: Deelnemers met transplantaatfalen (n, %)
|
Dag 1 tot dag 90
|
Secundaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Incidentie van acute afwijzing na 6 en 12 maanden
Tijdsspanne: Dag 1 - maand 12
|
Het aandeel patiënten met biopsie-bevestigde acute cellulaire afstotingsafleveringen binnen 6 maanden en binnen 12 maanden na transplantatie.
De ernst van de afwijzing (beoordeeld door standaardcriteria) en de respons op de behandeling zal ook worden geregistreerd.
Een lager dan verwachte afstotingssnelheid of mildere afwijzing zou wijzen op een succesvolle vermindering van immunogeniteit.
|
Dag 1 - maand 12
|
|
Immunologische markers van alloreactiviteit
Tijdsspanne: Dag 1 - maand 12
|
Niveaus van anti-donor HLA-antilichamen in ontvangersbloed (donorspecifieke antilichamen, DSA) en T-cel allo-immuunreactiviteit (bijv. In vitro gemengde lymfocytenreactie of ELISPOT-assays tegen donorcellen) bij 3, 6 en 12 maanden.
We zullen deze immunologische markers vergelijken met basislijn en met typische post-transplantatieprofielen.
Onze hypothese is dat patiënten met bewerkte transplantaten verzwakte T -celreacties op donorantigenen zullen vertonen.
|
Dag 1 - maand 12
|
|
Graft Survival and Function op 1 jaar
Tijdsspanne: Dag 1 - maand 12
|
Aantal patiënten met de oorspronkelijke getransplanteerde lever die na 12 maanden overleefde zonder transplantaatverlies.
|
Dag 1 - maand 12
|
|
Overleving van de patiënt op 1 jaar
Tijdsspanne: 12 maanden
|
Algemene overleving van deelnemers op 1 jaar na transplantatie.
|
12 maanden
|
|
Haalbaarheid van immunosuppressievermindering
Tijdsspanne: 12 maanden
|
Onder patiënten met een stabiele transplantaatfunctie, kan het vermogen om de immunosuppressieve therapie met 6-12 maanden na transplantatie af te tapiteren zonder afwijzing te verslaan.
Dit zal worden gemeten door het aandeel patiënten met succes de gezondheid van het transplantaat te handhaven bij verminderde immunosuppressiva of eenvoudiger regime.
|
12 maanden
|
|
Off-Target Effects Assessment
Tijdsspanne: 24 maanden
|
Trial zal elk bewijs evalueren van off-target genbewerkingseffecten die zich in het transplantaat manifesteren (bijvoorbeeld onverwachte histologische veranderingen of afwijkende leverfunctie die kunnen wijzen op onbedoelde genverstoringen).
Genomische analyses van bewerkte weefsel zullen worden gedaan om off-target mutatiefrequentie te karakteriseren.
|
24 maanden
|
Medewerkers en onderzoekers
Studie record data
Bestudeer belangrijke data
Studie start (Werkelijk)
Primaire voltooiing (Geschat)
Studie voltooiing (Geschat)
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
Eerst geplaatst (Geschat)
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Geschat)
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
Laatst geverifieerd
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Trefwoorden
Aanvullende relevante MeSH-voorwaarden
Andere studie-ID-nummers
- AOTCRI-102
Plan Individuele Deelnemersgegevens (IPD)
Bent u van plan om gegevens van individuele deelnemers (IPD) te delen?
Informatie over medicijnen en apparaten, studiedocumenten
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd geneesmiddel
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd apparaatproduct
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .