CRISPR-redigerad HLA-donatorlevertransplantation för att minska avslag
En fas 1/2, öppen etikett, enarmstudie för att utvärdera säkerheten, immunogenicitetsreduktion, transplantationsfunktion och genomförbarhet av ex vivo CRISPR-CAS9-gen-redigerade donatorlevertransplantation som riktar sig till HLA-klass I (HLA-A, HLA-B) och klass II (via CIITA) gener.
Studieöversikt
Status
Betingelser
Intervention / Behandling
Detaljerad beskrivning
Organtransplantation avstängning drivs främst av immunigenkänning av givare HLA (humant leukocytantigen) molekyler som främmande. Misjanpassningar i HLA-A och HLA-B (klass I) är i synnerhet starkt immunogena och kan provocera T-cellmedierat transplantatavstötning. HLA klass II-molekyler (HLA-DR, DQ, DP), uttryckt på givarantigenpresenterande celler, kan också aktivera CD4⁺ T-celler och bidra till avstötning. Nuvarande terapi förlitar sig på immunsuppressiva läkemedel, som har betydande risker. Preklinisk forskning har visat att genetiskt "radering av" HLA-molekyler från givarmeller kan trubbiga immunsvar: till exempel celler med HLA-A, HLA-B och HLA-DR slog ut via CRISPR framkallade lite till ingen T-cellproliferation in vitro, vilket indikerar kraftigt reducerad immunogenicitet. På liknande sätt, i xenotransplantationsmodeller, försvagades trippel knockout av gener (inklusive klass I och klass II-regulatorn CIITA) hos givardjur signifikant mänsklig T-cellaktivering och långvarig transplantatöverlevnad. Dessa fynd ger en stark grund för att ett HLA-redigerat givarorgan kan undvika det mänskliga immunsystemet i stor utsträckning, vilket potentiellt kan minska eller försena avslag.
Gen-redigering av givarlever ex vivo: I denna studie kommer avlidningsgivare lever att genomgå ex vivo CRISPR-CAS9 genomredigering före transplantation. Redigeringsmålen är HLA-A och HLA-B (för att eliminera de stora klass I-alloantigenerna) och CIITA (klass II-transaktivator, vars knockout avskaffar HLA-DR/DQ/DP-uttryck på donatorceller). Genom att slå ut HLA-A och -B, medan han lämnar HLA-C-uttrycket intakt, är målet att ta bort de mest immunogena klass I-molekylerna men ändå upprätthålla en viss HLA-närvaro för att mildra naturliga mördarecell "saknade-själv" -svar. Inaktivering av CIITA kommer att förhindra uttryck av HLA -klass II -proteiner, vilket minskar CD4⁺ T -cellaktivering mot transplantatet. CRISPR -redigeringen utförs under maskinperfusion av givarlevern (en period där organet hålls vid liv utanför kroppen). Ett CRISPR-CAS9-ribonukleoprotein (Cas9-enzym komplex med styr-RNA för HLA-A, HLA-B och CIITA) levereras in i levervävnaden genom perfusionskretsen. Redigering sker ex vivo och undviker direkt in vivo -genterapi till mottagaren. Innan transplantation utvärderas transplantatet för framgångsrik gen knockout (till exempel genom biopsi immunfärgning eller flödescytometri för att bekräfta frånvaro av HLA-A/B/DR på cellytan). Endast lever med bekräftad högeffektiv redigering (t.ex. > 90% målgenstörning) används för transplantation för att säkerställa maximal förmån för immunutveckling.
Studietyp
Inskrivning (Beräknad)
Fas
- Fas 2
- Fas 1
Kontakter och platser
Studiekontakt
- Namn: Andrew R Linehan
- Telefonnummer: +1 (302) 615-8388
- E-post: clinical-trials@aotcri.org
Studieorter
-
-
Changping
-
Beijing, Changping, Kina, 102206
- Rekrytering
- Peking University Health Science Center (PKUHSC)
-
Kontakt:
- Huan Yang, Phd
- Telefonnummer: +8613202512868
- E-post: PAD@aotcri.org
-
-
Deltagandekriterier
Urvalskriterier
Åldrar som är berättigade till studier
- Barn
- Vuxen
- Äldre vuxen
Tar emot friska volontärer
Beskrivning
Inkluderingskriterier:
- Vuxna i åldern 16-85 (inklusive) med leversjukdom i slutstadiet eller akut leversvikt som är berättigade till levertransplantation.
- Kräver en levertransplantation och har tilldelats ett givarlevertransplantat (från en avliden givare) som kommer att användas i studien efter genredigering.
- Inget omedelbart tillgängligt helt HLA-matchade givare (eftersom studien riktar sig till patienter som annars skulle få ett HLA-missaterat organ; standardallokering anser i allmänhet inte HLA-matchning för lever, så de flesta patienter kommer att kvalificera sig).
- Medicinskt lämpligt för transplantationskirurgi och kan tolerera standard immunsuppressiv terapi (inga kontraindikationer för transplantation såsom okontrollerad infektion eller annan aktiv allvarlig sjukdom som skulle utesluta kirurgi).
- Informerat samtycke: Kunna förstå rättegångens utredning och ge skriftligt informerat samtycke. Patienter (och deras juridiska representanter om tillämpligt) måste samtycka till användning av ett genetiskt modifierat organ och till långvarig uppföljning inklusive flera biopsier och immunövervakning.
- Villighet att följa alla studieprocedurer och tillgänglighet under uppföljningens varaktighet (inklusive ofta övervakningsbesök).
Uteslutningskriterier:
- Aktiv okontrollerad infektion (t.ex. sepsis, aktiv tuberkulos) som kraftigt skulle öka transplantationsrisken eller förvirra tolkning av immunrelaterade resultat.
- Okontrollerade HIV eller kroniska virusinfektioner som inte är välskötta. (Obs: Patienter med hepatit B eller C kan inkluderas om de behandlas tillräckligt eller under kontroll, eftersom dessa är vanliga vid leversvikt, men sådana patienter bör inte ha aktivt, replikera virus vid transplantation om möjligt.)
- Krav på flera organ transplantation: Patienter som behöver mer än en levern ensam (t.ex. lever-Kidney dubbel transplantation) är uteslutna, eftersom försöket endast utvärderar enstaka organ (lever) resultat.
- Graviditet eller amning: Kvinnliga deltagare i fertilfödningspotential måste ha ett negativt graviditetstest före transplantation och måste gå med på att använda effektiv preventivmedel. Effekterna av en genredigerad organtransplantation på ett foster/spädbarn är okända, och immunsuppressiva läkemedel kan också skada en graviditet.
- Allvarlig samtidig sjukdom som inte är relaterad till leversjukdom som skulle begränsa överlevnaden till <1 år eller göra patienten till en olämplig kandidat (t.ex. avancerad hjärtsvikt, okontrollerad diabetes med komplikationer, etc.).
- Allergi eller överkänslighet för studierelaterade produkter: Om några komponenter som används i ex vivo-genredigeringen (såsom ett specifikt fordon eller enzym) har kända allvarliga allergier hos mottagaren, kommer de att uteslutas. (Till exempel, även om det är osannolikt, om en patient hade en dokumenterad allvarlig immunreaktion på Streptococcus pyogenes cas9 eller liknande proteiner, skulle de inte registreras.)
- Oförmåga att följa protokollet eller följa uppföljningen: Detta inkluderar psykiatriska, sociala eller logistiska faktorer som skulle förhindra att det intensiva övervakningsschemat följer det intensiva övervakningsschemat (till exempel brist på tillförlitlig transport eller stöd).
Studieplan
Hur är studien utformad?
Designdetaljer
- Primärt syfte: Behandling
- Tilldelning: N/A
- Interventionsmodell: Enskild gruppuppgift
- Maskning: Ingen (Open Label)
Vapen och interventioner
Deltagargrupp / Arm |
Intervention / Behandling |
|---|---|
|
Experimentell: CRISPR-redigerad givarlevertransplantation
Deltagarna genomgår ortotopisk levertransplantation med hjälp av en givarlever som har varit ex vivo-gen-redigerad av CRISPR-CAS9 för att slå ut HLA-klass I (A, B) och klass II (via CIITA).
Det finns ingen komparatorarm; Resultaten kommer att jämföras med historiska normer för oredigerade transplantationer för sammanhang.
|
Donatorlevervävnad perfunderas utanför kroppen med ett CRISPR-CAS9 RNP-komplex som riktar sig till HLA-A, HLA-B och CIITA, för att skapa ett hypoimmunogent transplantat.
Efter att ha bekräftat framgångsrik gen knockout transplanteras levern till patienten enligt kirurgiska tekniker.
Postoperativ vård inkluderar rutinmässig immunsuppressiv terapi med planerade justeringar baserat på patientens tolerans och bevis på ympimmunogenicitet.
|
Vad mäter studien?
Primära resultatmått
Resultatmått |
Åtgärdsbeskrivning |
Tidsram |
|---|---|---|
|
Förekomst av grad ≥3 behandling-och biverkningshändelser (TEAE)
Tidsram: Dag 1 till dag 90
|
Antal deltagare som upplever ≥1 CTCAE v5.0 Grad 3-5 TEEE bedöms relaterat till den genredigerade levertransplantationsproceduren
|
Dag 1 till dag 90
|
|
Genomförbarhet av ex vivo HLA -genredigering
Tidsram: Dag1 till dag 90
|
Andel av givarlever som uppnår de önskade redigeringskriterierna (t.ex.> 90% knockouteffektivitet för HLA-A/B och avskaffande av klass II-uttryck) och transplanteras framgångsrikt till mottagare.
Genomförbarhet indikeras vidare av frånvaron av tekniska problem under organdedigering och transplantation.
|
Dag1 till dag 90
|
|
Graftfel på dag 90
Tidsram: Dag1 till dag 90
|
Andel deltagare som kräver omtransplantation, transplantatutforskare eller återgår till listan på grund av primär icke-funktion.
|
Dag1 till dag 90
|
Sekundära resultatmått
Resultatmått |
Åtgärdsbeskrivning |
Tidsram |
|---|---|---|
|
Förekomst av akut avslag vid 6 och 12 månader
Tidsram: Dag 1 - månad 12
|
Andelen patienter som upplever biopsi-bekräftade akuta cellulära avstötningsepisoder inom 6 månader och inom 12 månader efter transplantation.
Svårighetsgraden av avslag (graderad efter standardkriterier) och svar på behandling kommer också att registreras.
En lägre än förväntad avvisningsgrad eller mildare avstötning skulle indikera en framgångsrik immunogenicitet.
|
Dag 1 - månad 12
|
|
Immunologiska markörer för alloreaktivitet
Tidsram: Dag 1 - månad 12
|
Nivåer av antidonor HLA-antikroppar i mottagarblod (donorspecifika antikroppar, DSA) och T-cell alloimmun reaktivitet (t.ex. in vitro blandad lymfocytreaktion eller elispotanalyser mot donatorceller) vid 3, 6 och 12 månader.
Vi kommer att jämföra dessa immunologiska markörer med baslinjen och till typiska profiler efter transplantation.
Vi antar att patienter med redigerade transplantat kommer att visa dämpade T -cellrespons på givarantigener.
|
Dag 1 - månad 12
|
|
Transplantatöverlevnad och funktion vid 1 år
Tidsram: Dag 1 - månad 12
|
Antal patienter med den ursprungliga transplanterade levern som överlever vid 12 månader utan transplantatförlust.
|
Dag 1 - månad 12
|
|
Patientöverlevnad vid 1 år
Tidsram: 12 månader
|
Deltagarnas överlevnad vid 1 år efter transplantation.
|
12 månader
|
|
Immunsuppression reduktion genomförbarhet
Tidsram: 12 månader
|
Bland patienter med stabil transplantatfunktion, förmåga att avsmalna immunsuppressiv terapi med 6-12 månader efter transplantation utan utfällning av avslag.
Detta kommer att mätas med andelen patienter som framgångsrikt bibehåller transplantathälsa vid minskad immunsuppressivdos eller enklare behandling.
|
12 månader
|
|
Effekterna utvärdering utanför målet
Tidsram: 24 månader
|
Studien kommer att utvärdera alla bevis på genredigeringseffekter utanför målet som manifesteras i transplantatet (till exempel oväntade histologiska förändringar eller avvikande leverfunktion som kan antyda om oavsiktliga genstörningar).
Genomiska analyser av redigerad vävnad kommer att göras för att karakterisera mutationsfrekvens utanför målet.
|
24 månader
|
Samarbetspartners och utredare
Studieavstämningsdatum
Studera stora datum
Studiestart (Faktisk)
Primärt slutförande (Beräknad)
Avslutad studie (Beräknad)
Studieregistreringsdatum
Först inskickad
Först inskickad som uppfyllde QC-kriterierna
Första postat (Beräknad)
Uppdateringar av studier
Senaste uppdatering publicerad (Beräknad)
Senaste inskickade uppdateringen som uppfyllde QC-kriterierna
Senast verifierad
Mer information
Termer relaterade till denna studie
Nyckelord
Ytterligare relevanta MeSH-villkor
Andra studie-ID-nummer
- AOTCRI-102
Plan för individuella deltagardata (IPD)
Planerar du att dela individuella deltagardata (IPD)?
Läkemedels- och apparatinformation, studiedokument
Studerar en amerikansk FDA-reglerad läkemedelsprodukt
Studerar en amerikansk FDA-reglerad produktprodukt
Denna information hämtades direkt från webbplatsen clinicaltrials.gov utan några ändringar. Om du har några önskemål om att ändra, ta bort eller uppdatera dina studieuppgifter, vänligen kontakta register@clinicaltrials.gov. Så snart en ändring har implementerats på clinicaltrials.gov, kommer denna att uppdateras automatiskt även på vår webbplats .