Trasplante de hígado de donante HLA editado por CRISPR para reducir el rechazo
Un estudio de fase 1/2, etiqueta abierta, de un solo brazo para evaluar la seguridad, la reducción de la inmunogenicidad, la función de trasplante y la viabilidad de la transplante de hígado de donantes de genes CRISPR-CAS9 editado por el gen CRISPR-CAS9 dirigido a los genes HLA Clase I (HLA-A, HLA-B) y la clase II (VIA CIITA).
Descripción general del estudio
Estado
Condiciones
Intervención / Tratamiento
Descripción detallada
El rechazo del trasplante de órganos es impulsado principalmente por el reconocimiento inmune de las moléculas de HLA de donantes (antígeno leucocitario humano) como extrañas. Los desajustes en HLA-A y HLA-B (Clase I) en particular son fuertemente inmunogénicos y pueden provocar el rechazo de injerto mediado por las células T. Las moléculas de clase II de HLA (HLA-DR, DQ, DP), expresadas en células presentadoras de antígeno donante, también pueden activar las células T CD4⁺ y contribuir al rechazo. La terapia actual se basa en medicamentos inmunosupresores, que conllevan riesgos significativos. La investigación preclínica ha demostrado que las moléculas de HLA de "borrar" genéticamente de las células donantes pueden imprimir respuestas inmunes: por ejemplo, las células con HLA-A, HLA-B y HLA-DR noqueadas a través de CRISPR provocaron poca o ninguna proliferación de células T in vitro, lo que indica inmunogenicidad muy reducida. Del mismo modo, en los modelos de xenotransplante, el triple eliminación de genes (incluidos los reguladores de clase I y el regulador de clase II) en animales donantes debilitó significativamente la activación de las células T humanas y la supervivencia prolongada del injerto. Estos hallazgos proporcionan una justificación fuerte de que un órgano donante editado por HLA podría evadir el sistema inmune humano en gran medida, reduciendo o retrasando el rechazo.
Edición de genes del hígado de donante ex vivo: en este juicio, los hígados de donantes fallecidos se someterán a edición del genoma CRISPR-CAS9 ex vivo antes del trasplante. Los objetivos de edición son HLA-A y HLA-B (para eliminar los principales aloantígenos de clase I) y CIITA (Transactivador de Clase II, cuyo nocaut elimina la expresión HLA-DR/DQ/DP en las células donantes). Al eliminar HLA-A y -B, mientras deja intacta la expresión de HLA-C, el objetivo es eliminar las moléculas de clase I más inmunogénicas, pero mantener cierta presencia de HLA para mitigar las respuestas de "faltantes" de células asesinas naturales. Deshabilitar CIITA evitará la expresión de proteínas HLA de clase II, reduciendo así la activación de células T CD4⁺ contra el injerto. La edición CRISPR se realiza durante la perfusión de la máquina del hígado donante (un período en el que el órgano se mantiene vivo fuera del cuerpo). Una ribonucleoproteína CRISPR-CAS9 (enzima Cas9 complejada con ARN guía para HLA-A, HLA-B y CIITA) se administra al tejido hepático a través del circuito de perfusión. La edición tiene lugar ex vivo, evitando la terapia génica in vivo directa al receptor. Antes del trasplante, el injerto se evalúa para la eliminación de genes exitosa (por ejemplo, mediante inmunotinción de biopsia o citometría de flujo para confirmar la ausencia de HLA-A/B/DR en la superficie celular). Solo hígados con edición confirmada de alta eficiencia (p. Ej. > 90% de interrupción del gen objetivo) se utilizan para el trasplante para garantizar un beneficio máximo de evasión inmune.
Tipo de estudio
Inscripción (Estimado)
Fase
- Fase 2
- Fase 1
Contactos y Ubicaciones
Estudio Contacto
- Nombre: Andrew R Linehan
- Número de teléfono: +1 (302) 615-8388
- Correo electrónico: clinical-trials@aotcri.org
Ubicaciones de estudio
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Changping
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Beijing, Changping, Porcelana, 102206
- Reclutamiento
- Peking University Health Science Center (PKUHSC)
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Contacto:
- Huan Yang, Phd
- Número de teléfono: +8613202512868
- Correo electrónico: PAD@aotcri.org
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Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
- Niño
- Adulto
- Adulto Mayor
Acepta Voluntarios Saludables
Descripción
Criterios de inclusión:
- Los adultos de 16 a 85 años (inclusive) con enfermedad hepática en etapa terminal o insuficiencia hepática aguda que son elegibles para el trasplante de hígado.
- Requiere un trasplante de hígado y se les ha asignado un injerto de hígado de donante (de un donante fallecido) que se utilizará en el estudio después de la edición de genes.
- No hay un donante de HLA totalmente disponible de inmediato (ya que el estudio se dirige a los pacientes que de otro modo recibirían un órgano sin HLA; la asignación estándar generalmente no considera la coincidencia de HLA para el hígado, por lo que la mayoría de los pacientes calificarán).
- Médicamente adecuado para la cirugía de trasplante y puede tolerar la terapia inmunosupresora estándar (no hay contraindicaciones para trasplante, como la infección no controlada u otra enfermedad grave activa que impediría la cirugía).
- Consentimiento informado: Capaz de comprender la naturaleza de investigación del juicio y proporcionar consentimiento informado por escrito. Los pacientes (y sus representantes legales, si corresponde) deben consentir el uso de un órgano genéticamente modificado y a un seguimiento a largo plazo, incluidas múltiples biopsias y monitoreo inmune.
- La voluntad de cumplir con todos los procedimientos de estudio y disponibilidad para la duración del seguimiento (incluidas las visitas de monitoreo frecuentes).
Criterios de exclusión:
- Infección activa no controlada (por ejemplo, sepsis, tuberculosis activa) que aumentaría severamente el riesgo de trasplante o la interpretación confundida de los resultados inmunes.
- VIH no controlado o infecciones virales crónicas que no están bien administradas. (Nota: los pacientes con hepatitis B o C pueden incluirse si se tratan adecuadamente o bajo control, ya que estos son comunes en la insuficiencia hepática, pero dichos pacientes no deberían tener virus activo y replicante en el trasplante si es posible).
- Requisito de trasplante de múltiples órganos: se excluyen los pacientes que necesitan más que un hígado solo (por ejemplo, trasplante dual de hígado-kidney), ya que el ensayo solo evalúa los resultados de un solo órgano (hígado).
- Embarazo o lactancia materna: las participantes femeninas de potencial de férula deben tener una prueba de embarazo negativa antes del trasplante y deben aceptar usar una anticoncepción efectiva. Se desconocen los efectos de un trasplante de órganos editado por genes en un feto/bebé, y los medicamentos inmunosupresores también pueden dañar un embarazo.
- Enfermedad concurrente grave no relacionada con la enfermedad hepática que limitaría la supervivencia a <1 año o haría del paciente un candidato inadecuado (por ejemplo, insuficiencia cardíaca avanzada, diabetes no controlada con complicaciones, etc.).
- Alergia o hipersensibilidad a los productos relacionados con el estudio: si los componentes utilizados en la edición del gen ex vivo (como un vehículo o enzima específico) han conocido alergias severas en el destinatario, se excluirán. (Por ejemplo, aunque es poco probable, si un paciente tuviera una reacción inmune grave documentada a Streptococcus pyogenes Cas9 o proteínas similares, no se inscribirían).
- Incapacidad para seguir el protocolo o cumplir con el seguimiento: esto incluye factores psiquiátricos, sociales o logísticos que evitarían adherirse al intenso horario de monitoreo (por ejemplo, falta de transporte o apoyo confiable).
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Propósito principal: Tratamiento
- Asignación: N / A
- Modelo Intervencionista: Asignación de un solo grupo
- Enmascaramiento: Ninguno (etiqueta abierta)
Armas e Intervenciones
Grupo de participantes/brazo |
Intervención / Tratamiento |
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Experimental: Trasplante de hígado de donante editado por CRISPR
Los participantes se someten a un trasplante de hígado ortotópico utilizando un hígado donante que ha sido editado por el gen ex vivo por CRISPR-CAS9 para eliminar los genes HLA Clase I (A, B) y Clase II (a través de CIITA).
No hay brazo comparador; Los resultados se compararán con las normas históricas de los trasplantes sin editar para el contexto.
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El tejido hepático donante se perfusa fuera del cuerpo con un complejo CRISPR-CAS9 RNP dirigido a HLA-A, HLA-B y CIITA, para crear un injerto hipoimmunogénico.
Después de confirmar el noqueo de genes exitosos, el hígado se trasplanta al paciente después de técnicas quirúrgicas estándar.
La atención postoperatoria incluye la terapia inmunosupresora de rutina con ajustes planificados basados en la tolerancia del paciente y la evidencia de inmunogenicidad del injerto.
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Incidencia de grado ≥3 eventos adversos emergentes de tratamiento (TEAES)
Periodo de tiempo: Día 1 al día 90
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Número de participantes que experimentan ≥1 CTCAE v5.0 Grado 3-5 TEAE juzgado relacionado con el procedimiento de trasplante de hígado editado por genes
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Día 1 al día 90
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Viabilidad de la edición del gen HLA ex vivo
Periodo de tiempo: Día 1 a día 90
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La proporción de hígados donantes que logran los criterios de edición deseados (por ejemplo,> 90% de eficiencia de eliminación de HLA-A/B y abolición de la expresión de clase II) y se trasplantan con éxito a los receptores.
La viabilidad se indica además por la ausencia de problemas técnicos durante la edición y trasplante de órganos.
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Día 1 a día 90
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Tasa de falla del injerto en el día 90
Periodo de tiempo: Día 1 a día 90
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Proporción de participantes que requieren re-trasplante, explante del injerto o regresar a la lista debido a la no función primaria. Unidad de medida: participantes con falla del injerto (n, %)
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Día 1 a día 90
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Incidencia de rechazo agudo a los 6 y 12 meses
Periodo de tiempo: Día 1 - Mes 12
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La proporción de pacientes que experimentan episodios de rechazo celular agudos confirmados por biopsia dentro de los 6 meses y dentro de los 12 meses posteriores al trasplante.
También se registrará la gravedad del rechazo (graduada por criterios estándar) y la respuesta al tratamiento.
Una tasa de rechazo o rechazo más leve de lo esperado indicaría una reducción de inmunogenicidad exitosa.
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Día 1 - Mes 12
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Marcadores inmunológicos de la aloreactividad
Periodo de tiempo: Día 1 - Mes 12
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Niveles de anticuerpos HLA anti-donor en sangre receptor (anticuerpos específicos de donantes, DSA) y reactividad aloinmune de células T (por ejemplo, reacción de linfocitos mixtos in vitro o ensayos de Elispot contra células donantes) a los 3, 6 y 12 meses.
Compararemos estos marcadores inmunológicos con la línea de base y con los perfiles típicos posteriores al trasplante.
Presumimos que los pacientes con injertos editados mostrarán respuestas de células T atenuadas a los antígenos donantes.
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Día 1 - Mes 12
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Supervivencia y función del injerto al año
Periodo de tiempo: Día 1 - Mes 12
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Número de pacientes con el hígado trasplantado original que sobreviven a los 12 meses sin pérdida de injerto.
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Día 1 - Mes 12
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Supervivencia del paciente al 1 año
Periodo de tiempo: 12 meses
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Supervivencia general de los participantes al año después del trasplante.
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12 meses
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Viabilidad de reducción de inmunosupresión
Periodo de tiempo: 12 meses
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Entre los pacientes con función de injerto estable, la capacidad de disminuir la terapia inmunosupresora en 6 a 12 meses después del trasplante sin precipitar el rechazo.
Esto se medirá por la proporción de pacientes que mantienen con éxito la salud del injerto en una dosis de inmunosupresores reducido o un régimen más simple.
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12 meses
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Evaluación de efectos fuera del objetivo
Periodo de tiempo: 24 meses
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El ensayo evaluará cualquier evidencia de efectos de edición de genes fuera del objetivo que se manifiestan en el injerto (por ejemplo, cambios histológicos inesperados o una función hepática aberrante que podría insinuar interrupciones genéticas no intencionadas).
Se realizarán análisis genómicos de tejido editado para caracterizar la frecuencia de mutación fuera del objetivo.
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24 meses
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Colaboradores e Investigadores
Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio (Actual)
Finalización primaria (Estimado)
Finalización del estudio (Estimado)
Fechas de registro del estudio
Enviado por primera vez
Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad
Publicado por primera vez (Estimado)
Actualizaciones de registros de estudio
Última actualización publicada (Estimado)
Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad
Última verificación
Más información
Términos relacionados con este estudio
Palabras clave
- Edición de genes
- CRISPR-Cas9
- Transplante de organo
- Trasplante de hígado
- Enfermedad hepática en etapa terminal que requiere trasplante
- Prevención del rechazo de aloinjerto en el trasplante de hígado
- Reducción de inmunogenicidad
- HLA Knockout
- Injerto hipoinmunogénico
- Rechazo de aloinjerto
- Órgano donante universal
Términos MeSH relevantes adicionales
Otros números de identificación del estudio
- AOTCRI-102
Plan de datos de participantes individuales (IPD)
¿Planea compartir datos de participantes individuales (IPD)?
Información sobre medicamentos y dispositivos, documentos del estudio
Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
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