CRISPR-muokattu HLA-luovuttajan maksansiirto hylkäämisen vähentämiseksi
Vaiheen 1/2, avoin, yhden käsivarren tutkimus Ex vivo CRISPR-CAS9-geenin muokatun luovuttajan maksansiirron kohdentavan HLA-luokan I (HLA-A, HLA-B) ja luokan II (CIITA) geenien turvallisuuden, immunogeenisyyden vähentämisen, siirron toiminnan ja toteutettavuuden arvioimiseksi.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Ehdot
Interventio / Hoito
Yksityiskohtainen kuvaus
Elinsiirtojen hylkääminen johtuu pääasiassa luovuttajien HLA: n (ihmisen leukosyyttien antigeenin) molekyylien immuunijärjestelmän tunnistamisesta vieraana. Erityisesti HLA-A: n ja HLA-B: n (luokan I) epäsuhteet ovat voimakkaasti immunogeenisiä ja voivat provosoida T-soluvälitteistä siirteen hyljintää. HLA-luokan II molekyylit (HLA-DR, DQ, DP), joka ilmenee luovuttajien antigeeniä esitteleviin soluihin, voi myös aktivoida CD4⁺ T-solut ja edistää hyljintää. Nykyinen terapia perustuu immunosuppressiivisiin lääkkeisiin, joilla on merkittäviä riskejä. Prekliiniset tutkimukset ovat osoittaneet, että luovuttajasolujen HLA-molekyylien geneettisesti "poistaminen" voi tylsää immuunivasteet: esimerkiksi solut, joilla on HLA-A, HLA-B ja HLA-DR, koputtivat CRISPR: n kautta, aiheuttivat vähän tai ei ollenkaan solujen lisääntymistä in vitro, mikä osoittaa huomattavasti immunogeenisyyttä. Samoin ksenotransplanttimalleissa geenien kolminkertainen poisto (mukaan lukien luokan I ja luokan II säätelijä CIita) luovuttajaeläimissä heikensivät merkittävästi ihmisen T-solujen aktivaatiota ja pitkittynyttä siirteen eloonjäämistä. Nämä havainnot tarjoavat vahvan perusteen, että HLA: n muokattu luovuttajaelimet voisivat välttää ihmisen immuunijärjestelmää suurelta osin vähentäen tai viivästyttäen hylkäämistä.
Luovuttajan maksan ex vivo -geeninmuokkaus: Tässä tutkimuksessa kuolleiden luovuttajien maksat tapahtuvat ex vivo crispr-cas9 -genomin muokkaamiseen ennen siirtoa. Muokkauskohteet ovat HLA-A ja HLA-B (tärkeimmän luokan I alloanantigeenien poistamiseksi) ja CIita (luokan II transaktivaattori, joiden poisto poistaa HLA-DR/DQ/DP-ekspression luovuttajasoluissa). Kypsyttämällä HLA-A ja -B jättäen HLA-C-ekspression ehjiksi, tavoitteena on poistaa kaikkein immunogeenisimmät luokan I molekyylit, mutta ylläpitää joitain HLA: n läsnäoloa luonnollisen tappajasolujen "puuttuvien" -vasteiden lieventämiseksi. CIITA: n poistaminen estää HLA -luokan II proteiinien ilmentymisen vähentäen siten CD4⁺ T -solujen aktivaatiota siirteen vastaan. CRISPR -editointi suoritetaan luovuttajan maksan koneen perfuusion aikana (ajanjakso, jolloin elin pidetään elossa kehon ulkopuolella). CRISPR-Cas9-ribonukleoproteiini (CAS9-entsyymi, joka on kompleksoitu HLA-A: n, HLA-B: n ja CIitan opas-RNA: ien kanssa), toimitetaan maksakudokseen perfuusiopiirin läpi. Muokkaus tapahtuu ex vivo, välttäen vastaanottajalle suoraa in vivo -geeniterapiaa. Ennen siirrosta siirte arvioidaan onnistuneelle geenin poistolle (esimerkiksi biopsian immunovärjäys tai virtaussytometria HLA-A/B/DR: n puuttumiseksi solun pinnalla). Vain maksat, joilla on vahvistettu korkean tehokkuuden muokkaus (esim. > 90% kohdegeenihäiriöitä) käytetään siirtoihin maksimaalisen immuunijärjestelmän edu-hyötyjen varmistamiseksi.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Arvioitu)
Vaihe
- Vaihe 2
- Vaihe 1
Yhteystiedot ja paikat
Opiskeluyhteys
- Nimi: Andrew R Linehan
- Puhelinnumero: +1 (302) 615-8388
- Sähköposti: clinical-trials@aotcri.org
Opiskelupaikat
-
-
Changping
-
Beijing, Changping, Kiina, 102206
- Rekrytointi
- Peking University Health Science Center (PKUHSC)
-
Ottaa yhteyttä:
- Huan Yang, Phd
- Puhelinnumero: +8613202512868
- Sähköposti: PAD@aotcri.org
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
- Lapsi
- Aikuinen
- Vanhempi Aikuinen
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- 16-85-vuotiaat aikuiset (mukaan lukien) loppuvaiheen maksasairaus tai akuutti maksan vajaatoiminta, jotka ovat oikeutettuja maksansiirtoon.
- Vaatii maksansiirto ja heille on osoitettu luovuttajan maksasirsi (kuolleesta luovuttajasta), jota käytetään tutkimuksessa geenin muokkauksen jälkeen.
- Ei välittömästi saatavilla täysin HLA-sovitettua luovuttajaa (koska tutkimus kohdistuu potilaille, jotka muuten saavat HLA: n sovittaman elimen; standardijako ei yleensä ota huomioon maksan HLA-sovittamista, joten suurin osa potilaista pätee).
- Lääketieteellisesti sopivat elinsiirtoleikkaukseen ja kykenevä sietää tavanomaista immunosuppressiivista terapiaa (ei siirron vasta -aiheita, kuten hallitsemattomia infektioita tai muita aktiivisia vakavia sairauksia, jotka estäisivät leikkauksen).
- Tietoinen suostumus: Pystyy ymmärtämään oikeudenkäynnin tutkittava luonne ja antamaan kirjallinen tietoinen suostumus. Potilaiden (ja heidän lakimiehensä tarvittaessa) on suostuttava geneettisesti muunnetun elimen käyttöön ja pitkäaikaiseen seurantaan, mukaan lukien useita biopsioita ja immuunijärjestelmää.
- Halukkuus noudattaa kaikkia opintomenettelyjä ja saatavuutta seurannan ajan (mukaan lukien usein seurantavierailut).
Poissulkemiskriteerit:
- Aktiivinen hallitsematon infektio (esim. Sepsis, aktiivinen tuberkuloosi), jotka lisäävät ankarasti siirtoriskiä tai immuuniin liittyvien tulosten sekoittamista.
- Hallitsemattomat HIV- tai krooniset virusinfektiot, joita ei ole hallittu. (Huomaa: Potilaat, joilla on hepatiitti B tai C
- Monimuotoisten elinsiirtovaatimus: Potilaat, jotka tarvitsevat enemmän kuin maksa yksin (esim. Maksa-Kidney kaksoissiirto), suljetaan pois, koska tutkimuksessa arvioidaan vain yhden elimen (maksa) tuloksia.
- Raskaus tai imetys: Kasvatuspotentiaalin naisilla osallistujilla on oltava negatiivinen raskaustesti ennen siirtoa ja heidän on suostuttava käyttämään tehokasta ehkäisyä. Geenimuodostetun elinsiirron vaikutuksia sikiöön/vastasyntyneeseen ei tunneta, ja immunosuppressiiviset lääkkeet voivat myös vahingoittaa raskautta.
- Vakava samanaikainen sairaus, joka ei liity maksasairauksiin, jotka rajoittaisivat eloonjäämisen <1 vuoteen tai tekisivät potilaasta sopimattoman ehdokkaan (esim. Edistynyt sydämen vajaatoiminta, hallitsematon diabetes, jolla on komplikaatioita jne.).
- Allergia tai yliherkkyys tutkimukseen liittyviin tuotteisiin: Jos jokin ex vivo -geenin editoinnissa käytetty komponentti (kuten tietty ajoneuvo tai entsyymi) on tuntenut vastaanottajan vakavia allergioita, ne suljetaan pois. (Esimerkiksi, vaikka epätodennäköistä, jos potilaalla olisi dokumentoitu vaikea immuunireaktio Streptococcus pyogenes CAS9: lle tai vastaaville proteiineille, he eivät olisi ilmoittautuneet.)
- Kyvyttömyys noudattaa protokollaa tai noudattaa seurantaa: Tähän sisältyy psykiatrisia, sosiaalisia tai logistisia tekijöitä, jotka estävät voimakkaan seurantaohjelman noudattamisen (esimerkiksi luotettavan kuljetuksen tai tuen puute).
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Hoito
- Jako: Ei käytössä
- Inventiomalli: Yksittäinen ryhmätehtävä
- Naamiointi: Ei mitään (avoin tarra)
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Kokeellinen: CRISPR-muokattu luovuttajan maksansiirto
Osallistujat läpikäyvät ortotooppisen maksansiirron luovuttajan maksan avulla, jota CRISPR-Cas9 on muokannut ex vivo -geenin HLA-luokan I (A, B) ja luokan II (Ciita-kautta) geenien lyömiseksi.
Vertailuvarsi ei ole; Tuloksia verrataan muokkaamattomien elinsiirtojen historiallisiin normeihin kontekstin suhteen.
|
Luovuttajan maksakudos perfusoituu kehon ulkopuolelle CRISPR-Cas9 RNP -kompleksin kanssa, joka kohdistuu HLA-A: n, HLA-B: n ja CIitan, hypoimmunogeenisen siirteen luomiseksi.
Saatuaan onnistuneen geenien poistoa maksa siirretään potilaaseen tavanomaisten kirurgisten tekniikoiden mukaisesti.
Leikkauksen jälkeinen hoito sisältää rutiininomaisen immunosuppressiivisen terapian suunnitellulla säädöllä, joka perustuu potilaan toleranssiin ja todisteisiin siirteen immunogeenisyydestä.
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Luokan ≥3 hoitoa koskevat haittavaikutukset (TEAES)
Aikaikkuna: Päivä 1 päivä 90
|
Osallistujien lukumäärä, joilla on ≥1 CTCAE V5.0 -luokka 3-5 TEAE, joka arvioidaan geenitervostettuun maksansiirtomenettelyyn,
|
Päivä 1 päivä 90
|
|
Ex vivo HLA -geenin editoinnin toteutettavuus
Aikaikkuna: Päivä 1 päivään 90
|
Luovuttajien maksat, jotka saavuttavat halutut muokkauskriteerit (esim. HLA-A/B: n> 90%: n poistotehokkuus ja luokan II ekspression poistaminen) ja siirretään onnistuneesti vastaanottajiksi.
Toteutettavuutta osoittaa edelleen teknisten kysymysten puuttuminen elinten muokkaamisen ja siirron aikana.
|
Päivä 1 päivään 90
|
|
Siirteen epäonnistumisaste päivänä 90
Aikaikkuna: Päivä 1 päivään 90
|
Osallistujien osuus, jotka vaativat uudelleensiirtoa, siirteen selitystä tai palauttamista listalle, ensisijaisen toiminnan vuoksi
|
Päivä 1 päivään 90
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Akuutin hylkäämisen esiintyvyys 6 ja 12 kuukauden kohdalla
Aikaikkuna: Päivä 1 - kuukausi 12
|
Biopsiavahvistettujen akuutin solujen hyljintäjaksojen osuus potilaista 6 kuukauden kuluessa ja 12 kuukauden kuluessa siirron jälkeen.
Myös hyljinnän vakavuus (luokitellaan standardikriteereillä) ja vaste hoitoon.
Odotettua alhaisempi hylkäämisnopeus tai lievempi hylkääminen osoittaisi onnistuneen immunogeenisyyden vähentymisen.
|
Päivä 1 - kuukausi 12
|
|
Alloreaktiivisuuden immunologiset markkerit
Aikaikkuna: Päivä 1 - kuukausi 12
|
Anti-luovuttajien HLA-vasta-aineiden tasot vastaanottajan veressä (luovuttajaspesifiset vasta-aineet, DSA) ja T-solujen alloimmuunireaktiivisuus (esim. In vitro sekoitettu lymfosyyttireaktio tai Elispot-määritykset luovuttajasoluja vastaan) 3, 6 ja 12 kuukautta.
Vertaamme näitä immunologisia markkereita lähtötasoon ja tyypillisiin siirron jälkeisiin profiileihin.
Oletamme, että muokattujen siirteiden potilaat osoittavat heikentyneitä T -soluvasteita luovuttajaantigeeneille.
|
Päivä 1 - kuukausi 12
|
|
Siirteen selviytyminen ja toiminta vuoden kuluttua
Aikaikkuna: Päivä 1 - kuukausi 12
|
Potilaiden lukumäärä, joilla oli alkuperäinen siirretty maksa, joka selvisi 12 kuukauden kohdalla ilman siirteen menetystä.
|
Päivä 1 - kuukausi 12
|
|
Potilaan selviytyminen vuoden kuluttua
Aikaikkuna: 12 kuukautta
|
Osallistujien yleinen selviytyminen yhden vuoden kuluttua siirrosta.
|
12 kuukautta
|
|
Immunosuppression vähentäminen toteutettavuus
Aikaikkuna: 12 kuukautta
|
Potilaista, joilla on vakaa siirteen toiminta, kyky kaventaa immunosuppressiivista terapiaa 6-12 kuukauden kuluttua siirrosta saostamatta hyljintää.
Tämä mitataan potilaiden osuudella, joka ylläpitää siirteen terveyttä onnistuneesti vähentyneellä immunosuppressantiannosella tai yksinkertaisemmalla hoito -ohjelmalla.
|
12 kuukautta
|
|
Kohteen ulkopuolinen vaikutusten arviointi
Aikaikkuna: 24 kuukautta
|
Tutkimuksessa arvioidaan kaikki todisteet kohdekohtaisista geenien muokkausvaikutuksista, jotka ilmenevät siirrossa (esimerkiksi odottamattomat histologiset muutokset tai poikkeavat maksan toiminnat, jotka voivat viitata tahattomiin geenihäiriöihin).
Muokatun kudoksen genomianalyysit tehdään kohteen ulkopuolisen mutaatiotaajuuden karakterisoimiseksi.
|
24 kuukautta
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Arvioitu)
Opintojen valmistuminen (Arvioitu)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Arvioitu)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Arvioitu)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- AOTCRI-102
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .