CRISPR-édité HLA Donor Fiver Transplant pour réduire le rejet
Une étude de phase 1/2, ouverte et à bras unique pour évaluer la sécurité, la réduction de l'immunogénicité, la fonction de transplantation et la faisabilité de la transplantation du foie de donneur édité ex vivo Crispr-CAS9 ciblant les gènes HLA de classe I (HLA-A, HLA-B) et de classe II (via CIITA).
Aperçu de l'étude
Statut
Les conditions
Intervention / Traitement
Description détaillée
Le rejet de la transplantation d'organes est principalement entraîné par la reconnaissance immunitaire des molécules de donneur HLA (antigène leucocytaire humain) comme étrangère. Les décalages dans HLA-A et HLA-B (classe I) en particulier sont fortement immunogènes et peuvent provoquer le rejet du greffon médié par les cellules T. Les molécules HLA de classe II (HLA-DR, DQ, DP), exprimées sur les cellules présentant l'antigène donneur, peuvent également activer les cellules T CD4⁺ et contribuer au rejet. La thérapie actuelle repose sur des médicaments immunosuppresseurs, qui comportent des risques importants. Des recherches précliniques ont montré que les molécules HLA génétiquement "effaçant" des cellules donneurs peuvent émousser les réponses immunitaires: par exemple, les cellules avec HLA-A, HLA-B et HLA-DR sont éliminées via CRISPR a provoqué peu de prolifération des lymphocytes T in vitro, indiquant considérablement l'immunogénicité. De même, dans les modèles de xénotransplantation, le triple knock-out des gènes (y compris la classe I et le régulateur de classe II CIITA) chez les animaux donneurs ont considérablement affaibli l'activation des cellules T humaines et une survie prolongée du greffon. Ces résultats fournissent une justification forte qu'un organe donneur édité par HLA pourrait échapper au système immunitaire humain dans une large mesure, réduisant ou retardant le rejet.
Édition de gènes du foie de donneur Ex vivo: Dans cet essai, les foies de donateurs décédés subiront une modification ex vivo du génome CRISPR-CAS9 avant la transplantation. Les cibles d'édition sont HLA-A et HLA-B (pour éliminer les principaux alloantigènes de classe I) et CIITA (transactivateur de classe II, dont le knockout abolit l'expression HLA-DR / DQ / DP sur les cellules donneurs). En éliminant HLA-A et -B, tout en laissant l'intact de l'expression de HLA-C, l'objectif est d'éliminer les molécules les plus immunogènes de classe I, tout en conservant une présence HLA pour atténuer les réponses de "self-self" de la cellule tueuse naturelle. La désactivation de la CIITA empêchera l'expression des protéines HLA de classe II, réduisant ainsi l'activation des cellules C CD4⁺ contre la greffe. L'édition CRISPR est effectuée lors de la perfusion de la machine du foie du donneur (une période où l'organe est maintenu en vie en dehors du corps). Une ribonucléoprotéine CRISPR-CAS9 (enzyme Cas9 complexée avec des ARN guide pour HLA-A, HLA-B et CIITA) est délivré dans le tissu hépatique par le circuit de perfusion. L'édition a lieu ex vivo, en évitant la thérapie génique directe in vivo au destinataire. Avant la transplantation, la greffe est évaluée pour une élimination directe du gène (par exemple, par immunocoloration de biopsie ou cytométrie en flux pour confirmer l'absence de HLA-A / B / DR à la surface cellulaire). Seuls les foies avec une modification confirmée à haute efficacité (par exemple. > 90% des perturbations du gène cible) sont utilisées pour la transplantation afin d'assurer un bénéfice d'immunité maximale.
Type d'étude
Inscription (Estimé)
Phase
- Phase 2
- La phase 1
Contacts et emplacements
Coordonnées de l'étude
- Nom: Andrew R Linehan
- Numéro de téléphone: +1 (302) 615-8388
- E-mail: clinical-trials@aotcri.org
Lieux d'étude
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Changping
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Beijing, Changping, Chine, 102206
- Recrutement
- Peking University Health Science Center (PKUHSC)
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Contact:
- Huan Yang, Phd
- Numéro de téléphone: +8613202512868
- E-mail: PAD@aotcri.org
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Critères de participation
Critère d'éligibilité
Âges éligibles pour étudier
- Enfant
- Adulte
- Adulte plus âgé
Accepte les volontaires sains
La description
Critères d'inclusion:
- Adultes âgés de 16 à 85 ans (inclus) atteints d'une maladie hépatique terminale ou d'une insuffisance hépatique aiguë qui sont éligibles à la transplantation hépatique.
- Nécessitent une greffe du foie et ont reçu une greffe de foie de donneur (d'un donneur décédé) qui sera utilisé dans l'étude après l'édition des gènes.
- Aucun donneur entièrement disponible entièrement HLA (puisque l'étude cible les patients qui, autrement, recevraient un organe HLA à inadéquation;
- Médicalement adapté à la chirurgie de la transplantation et capable de tolérer le traitement immunosuppresseur standard (aucune contre-indication de la transplantation, comme une infection incontrôlée ou une autre maladie grave active qui empêcherait la chirurgie).
- Consentement éclairé: Capable de comprendre la nature étudiante de l'essai et de fournir un consentement éclairé écrit. Les patients (et leurs représentants légaux le cas échéant) doivent consentir à l'utilisation d'un organe génétiquement modifié et à un suivi à long terme, y compris de multiples biopsies et une surveillance immunitaire.
- Volonté de se conformer à toutes les procédures d'étude et la disponibilité pour la durée du suivi (y compris les visites de surveillance fréquentes).
Critères d'exclusion:
- Une infection active non contrôlée (par exemple, septicémie, tuberculose active) qui augmenterait gravement le risque de transplantation ou confondre l'interprétation des résultats immunitaires.
- VIH non contrôlée ou infections virales chroniques qui ne sont pas bien gérées. (Remarque: les patients atteints d'hépatite B ou C peuvent être inclus s'ils sont traités de manière adéquate ou sous contrôle, car ceux-ci sont courants dans l'insuffisance hépatique, mais ces patients ne devraient pas avoir un virus actif et reproduisant à la transplantation si possible.)
- Exigence de transplantation multi-organes: les patients ayant besoin de plus qu'un foie seul (par exemple, la double transplantation du foie-kidney) sont exclus, car l'essai évalue uniquement les résultats d'organe unique (foie).
- Grossesse ou allaitement: les participants aux femmes en potentiel de procréation doivent subir un test de grossesse négatif avant la transplantation et doivent accepter d'utiliser une contraception efficace. Les effets d'une greffe d'organe éditée génique sur un fœtus / nourrisson sont inconnus et les médicaments immunosuppresseurs peuvent également nuire à une grossesse.
- Une maladie concurrente grave non liée aux maladies du foie qui limiterait la survie à <1 an ou ferait du patient un candidat inadapté (par exemple, une insuffisance cardiaque avancée, un diabète incontrôlé avec des complications, etc.).
- Allergie ou hypersensibilité aux produits liés à l'étude: si des composants utilisés dans l'édition de gènes ex vivo (comme un véhicule ou une enzyme spécifique) ont connu des allergies graves chez le receveur, elles seront exclues. (Par exemple, bien que peu probable, si un patient avait une réaction immunitaire sévère documentée à Streptococcus pyogenes Cas9 ou à des protéines similaires, il ne serait pas inscrit.)
- Incapacité à suivre le protocole ou à respecter le suivi: cela comprend des facteurs psychiatriques, sociaux ou logistiques qui empêcheraient le respect du calendrier de surveillance intense (par exemple, le manque de transport ou de soutien fiable).
Plan d'étude
Comment l'étude est-elle conçue ?
Détails de conception
- Objectif principal: Traitement
- Répartition: N / A
- Modèle interventionnel: Affectation à un seul groupe
- Masquage: Aucun (étiquette ouverte)
Armes et Interventions
Groupe de participants / Bras |
Intervention / Traitement |
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Expérimental: Greffe de foie de donneur édité par CRISPR
Les participants subissent une transplantation hépatique orthotopique en utilisant un foie de donneur qui a été édité des gènes ex vivo par CRISPR-CAS9 pour éliminer les gènes HLA de classe I (A, B) et de classe II (via CIITA).
Il n'y a pas de bras de comparateur; Les résultats seront comparés aux normes historiques des greffes non éditées pour le contexte.
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Le tissu du foie donneur est perfusé à l'extérieur du corps avec un complexe RNP CRISPR-CAS9 ciblant HLA-A, HLA-B et CIITA, pour créer une greffe hypo-immunogène.
Après avoir confirmé le knock-out gène réussi, le foie est transplanté dans le patient après des techniques chirurgicales standard.
Les soins postopératoires comprennent un traitement immunosuppresseur de routine avec des ajustements planifiés en fonction de la tolérance du patient et des preuves de l'immunogénicité du greffon.
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Que mesure l'étude ?
Principaux critères de jugement
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
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Incidence de grade ≥3 Événements indésirables émergents du traitement (TEAES)
Délai: Jour 1 au jour 90
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Nombre de participants connaissant ≥1 CTCAE V5.0 Grade 3-5 TEEE jugé lié à la procédure de transplantation hépatique éditée aux gènes
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Jour 1 au jour 90
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Faisabilité de l'édition du gène ex vivo hla
Délai: Jour1 au jour 90
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Proportion de foies donneurs qui atteignent les critères d'édition souhaités (par exemple,> 90% d'efficacité à élimination directe de HLA-A / B et l'abolition de l'expression de classe II) et sont transplantés avec succès en destinataires.
La faisabilité est en outre indiquée par l'absence de problèmes techniques lors de l'édition et de la transplantation d'organes.
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Jour1 au jour 90
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Taux de panne de greffe au jour 90
Délai: Jour1 au jour 90
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Proportion de participants nécessitant une rétransplantation, un explant de greffe ou un retour à l'inscription en raison de la non-fonction primaire. Unité de mesure: les participants avec une défaillance du greffon (n,%)
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Jour1 au jour 90
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Mesures de résultats secondaires
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
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Incidence du rejet aigu à 6 et 12 mois
Délai: Jour 1 - Mois 12
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La proportion de patients souffrant d'épisodes de rejet cellulaire aigu confirmé à la biopsie dans les 6 mois et dans les 12 mois après la transplantation.
La gravité du rejet (gradée par des critères standard) et la réponse au traitement seront également enregistrées.
Un taux de rejet inférieur à celle-ci ou un rejet plus doux indiquerait une réduction réussie de l'immunogénicité.
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Jour 1 - Mois 12
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Marqueurs immunologiques de l'alloréactivité
Délai: Jour 1 - Mois 12
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Niveaux d'anticorps anti-Donor HLA dans le sang receveur (anticorps spécifiques du donneur, DSA) et la réactivité alloimmune des cellules T (par exemple, réaction de lymphocytes mixtes in vitro ou tests elispot contre les cellules donneur) à 3, 6 et 12 mois.
Nous comparerons ces marqueurs immunologiques à la ligne de base et aux profils post-transplantation typiques.
Nous émettons l'hypothèse que les patients atteints de greffes éditées présenteront des réponses atténuées sur les lymphocytes T aux antigènes donneurs.
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Jour 1 - Mois 12
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Survie et fonction du greffon à 1 an
Délai: Jour 1 - Mois 12
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Nombre de patients avec le foie transplanté d'origine survivant à 12 mois sans perte de greffe.
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Jour 1 - Mois 12
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Survie des patients à 1 an
Délai: 12 mois
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Survie globale des participants à 1 an après la transplantation.
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12 mois
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Faisabilité de réduction de l'immunosuppression
Délai: 12 mois
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Parmi les patients ayant une fonction de greffe stable, la capacité de réduire le traitement immunosuppresseur par 6 à 12 mois après la transplantation sans rejet précipité.
Ceci sera mesuré par la proportion de patients en conservant avec succès la santé du greffon sur un dosage d'immunosuppresseur réduit ou un régime plus simple.
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12 mois
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Évaluation des effets hors cible
Délai: 24 mois
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L'essai évaluera toute preuve d'effets d'édition de gènes hors cible se manifestant dans la greffe (par exemple, des changements histologiques inattendus ou une fonction hépatique aberrante qui pourrait faire allusion aux perturbations des gènes involontaires).
Des analyses génomiques du tissu édité seront effectuées pour caractériser la fréquence de mutation hors cible.
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24 mois
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Collaborateurs et enquêteurs
Dates d'enregistrement des études
Dates principales de l'étude
Début de l'étude (Réel)
Achèvement primaire (Estimé)
Achèvement de l'étude (Estimé)
Dates d'inscription aux études
Première soumission
Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité
Première publication (Estimé)
Mises à jour des dossiers d'étude
Dernière mise à jour publiée (Estimé)
Dernière mise à jour soumise répondant aux critères de contrôle qualité
Dernière vérification
Plus d'information
Termes liés à cette étude
Mots clés
- Modification des gènes
- CRISPR-Cas9
- Transplantation d'organe
- Greffe du foie
- Maladie du foie en phase terminale nécessitant une transplantation
- Prévention du rejet de l'allogreffe dans la transplantation hépatique
- Réduction de l'immunogénicité
- HLA KO
- Greffe hypo-immunogène
- Rejet d'allogreffe
- Organe de donneur universel
Termes MeSH pertinents supplémentaires
Autres numéros d'identification d'étude
- AOTCRI-102
Plan pour les données individuelles des participants (IPD)
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Informations sur les médicaments et les dispositifs, documents d'étude
Étudie un produit pharmaceutique réglementé par la FDA américaine
Étudie un produit d'appareil réglementé par la FDA américaine
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