Transplante de fígado do doador de HLA editado por CRISPR para reduzir a rejeição
Um estudo de fase 1/2, abertura aberta, para avaliar a segurança, redução de imunogenicidade, função de transplante e viabilidade de transplante de doador de genes do gene CRISP9 ex vivo, direcionando os genes HLA Classe I (HLA-A, HLA-B) e Classe II (via CIITA).
Visão geral do estudo
Status
Condições
Intervenção / Tratamento
Descrição detalhada
A rejeição do transplante de órgãos é impulsionada principalmente pelo reconhecimento imune das moléculas de HLA (antígeno de leucócitos humanas) como estrangeiros. As incompatibilidades em HLA-A e HLA-B (classe I) em particular são fortemente imunogênicas e podem provocar rejeição de enxerto mediada por células T. As moléculas HLA Classe II (HLA-DR, DQ, DP), expressas em células apresentadoras de antígeno doador, também podem ativar as células T CD4⁺ e contribuir para a rejeição. A terapia atual depende de medicamentos imunossupressores, que carregam riscos significativos. A pesquisa pré-clínica mostrou que as moléculas de HLA geneticamente "apagando" de células doadoras podem contornar as respostas imunes: por exemplo, células com HLA-A, HLA-B e HLA-DR nocauteadas por meio de crispr provocaram pouca ou nenhuma proliferação de células T in vitro, indicando imunogenicidade muito reduzida. Da mesma forma, em modelos de xenotransplantes, o nocaute triplo dos genes (incluindo Classe I e o regulador CIITA de classe II) em animais doadores enfraqueceu significativamente a ativação das células T humanas e a sobrevivência prolongada do enxerto. Esses achados fornecem uma forte justificativa de que um órgão doador editado por HLA poderia evitar o sistema imunológico humano em grande parte, potencialmente reduzindo ou atrasando a rejeição.
E-edição de genes do fígado doador ex vivo: Neste ensaio, os fígados falecidos serão submetidos a edição ex vivo do genoma do CRISPR-CAS9 antes do transplante. Os alvos de edição são HLA-A e HLA-B (para eliminar os aloantígenos principais da classe I) e CIITA (transativador de classe II, cujo nocaute abole a expressão de HLA-DR/DQ/DP nas células doadoras). Ao eliminar intactas o HLA-A e -B, ao deixar a expressão do HLA-C, o objetivo é remover as moléculas de classe I mais imunogênicas, mas manter alguma presença no HLA para mitigar as respostas naturais da célula assassina "desaparecidas". O CIITA desativado impedirá a expressão de proteínas HLA classe II, reduzindo assim a ativação das células T CD4⁺ contra o enxerto. A edição do CRISPR é realizada durante a perfusão da máquina do fígado doador (um período em que o órgão é mantido vivo fora do corpo). Uma ribonucleoproteína CRISPR-CAS9 (enzima Cas9 complexada com RNAs de guia para HLA-A, HLA-B e CIITA) é entregue no tecido hepático através do circuito de perfusão. A edição ocorre ex vivo, evitando terapia genética direta in vivo ao destinatário. Antes do transplante, o enxerto é avaliado quanto ao knockout de genes bem-sucedido (por exemplo, por imunocoloração de biópsia ou citometria de fluxo para confirmar a ausência de HLA-A/B/DR na superfície celular). Somente fígados com edição confirmada de alta eficiência (por exemplo > 90% de interrupção do gene-alvo) são usados para transplante para garantir o benefício máximo de evasão imune.
Tipo de estudo
Inscrição (Estimado)
Estágio
- Fase 2
- Fase 1
Contactos e Locais
Contato de estudo
- Nome: Andrew R Linehan
- Número de telefone: +1 (302) 615-8388
- E-mail: clinical-trials@aotcri.org
Locais de estudo
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Changping
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Beijing, Changping, China, 102206
- Recrutamento
- Peking University Health Science Center (PKUHSC)
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Contato:
- Huan Yang, Phd
- Número de telefone: +8613202512868
- E-mail: PAD@aotcri.org
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Critérios de participação
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
- Filho
- Adulto
- Adulto mais velho
Aceita Voluntários Saudáveis
Descrição
Critérios de inclusão:
- Adultos de 16 a 85 anos (inclusive) com doença hepática final ou insuficiência hepática aguda que são elegíveis para o transplante de fígado.
- Requer um transplante de fígado e recebeu um enxerto de fígado doador (de um doador falecido) que será usado no estudo após a edição de genes.
- Nenhum doador totalmente disponível para HLA (como o estudo tem como alvo pacientes que de outra forma receberiam um órgão incompatível com HLA; a alocação padrão geralmente não considera a correspondência do HLA para o fígado, portanto, a maioria dos pacientes se qualifica).
- Medicamente, adequado para cirurgia de transplante e capaz de tolerar a terapia imunossupressora padrão (sem contra -indicações para transplante, como infecção não controlada ou outra doença grave ativa que impediria a cirurgia).
- Consentimento informado: capaz de entender a natureza de investigação do julgamento e fornecer consentimento informado por escrito. Os pacientes (e seus representantes legais, se aplicável) devem consentir no uso de um órgão geneticamente modificado e a acompanhamento a longo prazo, incluindo múltiplas biópsias e monitoramento imunológico.
- Disposição de cumprir todos os procedimentos de estudo e disponibilidade durante a duração do acompanhamento (incluindo visitas frequentes de monitoramento).
Critérios de exclusão:
- Infecção não controlada ativa (por exemplo, sepse, tuberculose ativa) que aumentaria severamente o risco de transplante ou a interpretação de confundir os resultados relacionados a imunes.
- HIV não controlado ou infecções virais crônicas que não são bem gerenciadas. (Nota: Pacientes com hepatite B ou c podem ser incluídos se tratados adequadamente ou sob controle, pois são comuns na insuficiência hepática, mas esses pacientes não devem ter ativo, replicando o vírus no transplante, se possível.)
- Requisito de transplante de vários órgãos: os pacientes que precisam de mais do que um fígado são excluídos (por exemplo, transplante duplo de fígado-Kidney), pois o estudo está avaliando apenas os resultados de órgão único (fígado).
- Gravidez ou amamentação: as participantes do potencial de gravidez devem ter um teste negativo de gravidez antes do transplante e devem concordar em usar contracepção eficaz. Os efeitos de um transplante de órgão editado por genes em um feto/bebê são desconhecidos, e os medicamentos imunossupressores também podem prejudicar uma gravidez.
- Doença concorrente grave não relacionada à doença hepática que limitaria a sobrevivência a <1 ano ou tornaria o paciente um candidato inadequado (por exemplo, insuficiência cardíaca avançada, diabetes descontrolado com complicações etc.).
- Alergia ou hipersensibilidade aos produtos relacionados ao estudo: se algum componente usado na edição de genes ex vivo (como um veículo ou enzima específico) tiver alergias graves no destinatário, elas serão excluídas. (Por exemplo, embora improvável, se um paciente tivesse uma reação imune grave documentada a Streptococcus pyogenes Cas9 ou proteínas similares, elas não estariam inscritos.)
- Incapacidade de seguir o protocolo ou cumprir o acompanhamento: isso inclui fatores psiquiátricos, sociais ou logísticos que impediriam a aderência ao cronograma de monitoramento intenso (por exemplo, falta de transporte ou suporte confiável).
Plano de estudo
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
- Finalidade Principal: Tratamento
- Alocação: N / D
- Modelo Intervencional: Atribuição de grupo único
- Mascaramento: Nenhum (rótulo aberto)
Armas e Intervenções
Grupo de Participantes / Braço |
Intervenção / Tratamento |
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Experimental: Transplante de fígado do doador editado por crise
Os participantes sofrem transplante de fígado ortotópico usando um fígado doador que foi editado por genes ex vivo pelo CRISPR-CAS9 para eliminar genes HLA Classe I (A, B) e Classe II (via CIITA).
Não há braço comparador; Os resultados serão comparados às normas históricas de transplantes não editados para o contexto.
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O tecido hepático doador é perfundido fora do corpo com um complexo RNP CRISPR-CAS9 direcionado a HLA-A, HLA-B e CIITA, para criar um enxerto hipoimunogênico.
Depois de confirmar um nocaute bem -sucedido de genes, o fígado é transplantado para o paciente após técnicas cirúrgicas padrão.
Os cuidados pós-operatórios incluem terapia imunossupressora de rotina com ajustes planejados com base na tolerância e evidência do paciente de imunogenicidade do enxerto.
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O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
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Incidência de grau ≥3 Eventos adversos emergentes do tratamento (TEAES)
Prazo: Dia 1 ao Dia 90
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Número de participantes com ≥1 ctcae v5.0 grau 3-5 Teae julgado relacionado ao procedimento de transplante de fígado com edição de genes
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Dia 1 ao Dia 90
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Viabilidade da edição de genes ex vivo hla
Prazo: Dia1 ao dia 90
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Proporção de fígados doadores que atingem os critérios de edição desejados (por exemplo,> 90% de eficiência de nocaute do HLA-A/B e abolição da expressão de classe II) e são transplantados com sucesso em receptores.
A viabilidade é ainda indicada pela ausência de questões técnicas durante a edição e transplante de órgãos.
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Dia1 ao dia 90
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Taxa de falha do enxerto no dia 90
Prazo: Dia1 ao dia 90
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Proporção de participantes que exigem re-transplante, explante de enxerto ou retornando à listagem devido à não função primária.
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Dia1 ao dia 90
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Medidas de resultados secundários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
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Incidência de rejeição aguda aos 6 e 12 meses
Prazo: Dia 1 - mês 12
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A proporção de pacientes que sofrem de episódios de rejeição celular aguda confirmada por biópsia dentro de 6 meses e dentro de 12 meses após o transplante.
A gravidade da rejeição (classificada por critérios padrão) e a resposta ao tratamento também serão registradas.
Uma taxa de rejeição inferior ao esperado ou rejeição mais suave indicaria uma redução bem-sucedida de imunogenicidade.
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Dia 1 - mês 12
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Marcadores imunológicos da alorreatividade
Prazo: Dia 1 - mês 12
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Níveis de anticorpos anti-doadores HLA no sangue receptor (anticorpos específicos do doador, DSA) e reatividade aloimune de células T (por exemplo, reação de linfócitos mistos in vitro ou ensaios de ELISPOT contra células doadoras) aos 3, 6 e 12 meses.
Compararemos esses marcadores imunológicos com os perfis de linha de base e pós-transplante típicos.
Nossa hipótese é que os pacientes com enxertos editados mostram respostas atenuadas de células T aos antígenos doadores.
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Dia 1 - mês 12
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Sobrevivência e função do enxerto em 1 ano
Prazo: Dia 1 - mês 12
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Número de pacientes com o fígado transplantado original sobrevivendo aos 12 meses sem perda de enxerto.
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Dia 1 - mês 12
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Sobrevivência do paciente em 1 ano
Prazo: 12 meses
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Sobrevivência geral dos participantes em 1 ano após o transplante.
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12 meses
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Viabilidade de redução de imunossupressão
Prazo: 12 meses
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Entre os pacientes com função estável do enxerto, a capacidade de diminuir a terapia imunossupressora por 6 a 12 meses após o transplante sem rejeição precipitada.
Isso será medido pela proporção de pacientes, mantendo com sucesso a saúde do enxerto em dosagem imunossupressora reduzida ou regime mais simples.
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12 meses
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Avaliação de efeitos fora do alvo
Prazo: 24 meses
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O estudo avaliará qualquer evidência de efeitos de edição de genes fora do alvo que se manifestam no enxerto (por exemplo, alterações histológicas inesperadas ou função hepática aberrante que poderia sugerir interrupções gene não intencionais).
Análises genômicas do tecido editado serão feitas para caracterizar a frequência de mutação fora do alvo.
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24 meses
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Colaboradores e Investigadores
Datas de registro do estudo
Datas Principais do Estudo
Início do estudo (Real)
Conclusão Primária (Estimado)
Conclusão do estudo (Estimado)
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
Primeira postagem (Estimado)
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (Estimado)
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
Última verificação
Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Palavras-chave
Termos MeSH relevantes adicionais
Outros números de identificação do estudo
- AOTCRI-102
Plano para dados de participantes individuais (IPD)
Planeja compartilhar dados de participantes individuais (IPD)?
Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo
Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA
Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA
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