Molekulární diagnostika alergické kontaktní dermatitidy (MODAL)

Alergická kontaktní dermatitida (ACD) je běžné zánětlivé kožní onemocnění, které postihuje přibližně 15–20 % běžné populace v průmyslových zemích a řadí se na první místo mezi nemocemi z povolání v mnoha evropských zemích.

ACD se typicky projevuje jako závažný zánět kůže se zarudnutím, edémem, mokváním a tvorbou krust. Je charakterizována opožděnou hypersenzitivní reakcí typu IV zprostředkovanou alergen-specifickými T buňkami u senzibilizovaných jedinců.

Současná diagnóza se opírá o klinická vyšetření pomocí diagnostického náplastového testování s podezřením na alergenní chemikálie. Metoda náplastového testu se zaměřuje na reprodukci ekzematózních lézí aplikací okluzivních náplastí obsahujících podezřelé alergeny na zdravou kůži pacienta. Jedná se o časově náročný a nákladný proces. Čtení reakce vyžaduje zkušený zdravotnický personál a provádí ji pouze omezený počet odborných dermatoalergologů v celé Evropě (což omezuje dostupnost diagnózy u pacientů s podezřením na ACD). Konečně, pokud je robustnost metody patch-testu nesporná, nelze opomíjet, že výsledky patch-testu jsou někdy falešně pozitivní nebo nerelevantní, což vede k nevhodné léčbě onemocnění.

Proto dnes existuje naléhavá potřeba dostupnosti nových ex vivo/in vitro nástrojů založených na moderním chápání imunitních mechanismů ACD, aby se zlepšil současný diagnostický postup a otevřely se nové cesty pro personalizovanou diagnostiku kožních ACD.

V této souvislosti tým "Epidermální imunita a alergie" (CIRI, Inserm U1111) nedávno charakterizoval molekulární signatury ACD (pomocí mikročipů) na základě pozitivních reakcí náplastových testů na referenční chemické alergeny nebo nealergenní dráždivé látky. Ukázalo se, že existují jedinečné molekulární profily a signální dráhy charakterizující každý zánět. Poté byly vyvinuty metody strojového učení k identifikaci a validaci klasifikačních algoritmů založených na úrovních exprese minimálního souboru biomarkerů (n=12), což umožňuje velmi dobré rozlišení mezi alergenem indukovaným a dráždivým náplastovým testem (což bylo potvrzeno komplementární kvantitativní RT-PCR analýzy). Konečně, někteří pacienti se slabě pozitivními reakcemi náplastových testů na alergeny nevykazují žádné/nízké známky molekulárního podpisu alergie, což je otázka spolehlivosti/relevance výsledků jejich náplastových testů.

Naše výsledky proto zdůrazňují hodnotu molekulárního profilování reakcí náplastových testů pro zlepšení/posílení klinické diagnózy ACD a pro pomoc dermatologovi rozlišit pravdivé a falešně pozitivní reakce náplastových testů.

Důležité je, že tyto výsledky také otevírají nové cesty pro vývoj budoucí diagnózy bodové péče. V současnosti se odhaduje, že pouze 20 % pacientů odeslaných na alergologická vyšetření trpí skutečnou kožní alergií (tj. pacienti s pozitivními náplastovými testy v kombinaci s relevantní klinickou anamnézou a potvrzujícími testy použití). Většina pacientů (80 %) ve skutečnosti trpí podrážděním kůže. Detekce biomarkerů ACD u aktivních ekzémových lézí by proto mohla dermatologovi poskytnout zásadní informace ke zlepšení a urychlení jeho klinické diagnostiky. To by také mohlo zabránit tomu, aby byli četní pacienti (negativní na biomarkery ACD) odesíláni na zbytečná alergologická vyšetření.

K dnešnímu dni však zbývá prokázat, že (i) stejný panel biomarkerů ACD je exprimován jak v akutních ekzémových lézích, tak v pozitivních reakcích patch-testu, a že (ii) detekce těchto biomarkerů umožňuje citlivou a spolehlivou diagnostika kožní alergie.

Hlavním cílem studie bude prokázat koncept, že exprese biomarkerů alergie koreluje s pacienty trpícími skutečnou ACD (tj. pacienti s vysokou expresí biomarkerů v akutních lézích, pozitivními náplastovými testy a příslušnou klinickou anamnézou), oproti těm, u kterých se vyvinulo podráždění kůže (žádná/nízká exprese biomarkerů v akutních lézích, negativní náplastové testy a chybějící klinická anamnéza).